冯德明
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 杂种落叶松愈伤组织诱导培养基的建立和优化被引量：2
- 2014年
- [目的]建立一种高效稳定的杂种落叶松组织培养体系。[方法]以杂种落叶松成熟合子胚作为外植体材料,对其按照不同处理方式进行消毒,且以不同种类培养基和激素种类及浓度进行愈伤组织的诱导,测算愈伤组织的体积。[结果]将去皮种子用流水冲洗2 d,用70%乙醇消毒1 min转入4%NaClO消毒15 min后,再将剥出的胚放入0.5%NaClO消毒2 min胚存活率最高;在光照条件下,BM培养基中添加2.0 mg/L TDZ愈伤组织的诱导效果最好,愈伤组织的诱导率为90.5%;愈伤组织的L、W、H与t呈类线性关系,体积与时间呈类指数关系。[结论]为落叶松稳定组织培养体系的构建和优化提供方法。
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- 关键词：杂种落叶松成熟合子胚愈伤组织诱导
- 刚毛柽柳ThDREB基因在酵母中的表达及抗逆能力分析被引量：6
- 2017年
- DREB蛋白能特异地与DRE(dehydration responsive element)顺式作用元件结合,从而调控下游多个与逆境相关基因的表达,在植物对多种逆境胁迫的应答反应中起重要调节作用。为了研究刚毛柽柳ThDREB基因是否具有抗逆功能,将Th DREB基因插入到酵母表达载体p YES2中构建成重组载体,转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中获得重组型酵母。分别比较转ThDREB基因酵母和转空载体对照酵母在山梨醇、H_2O_2、CdCl_2、NaCl、Na_2CO_3、MgCl_2、-20℃胁迫处理之后的存活能力。结果显示,ThDREB基因能有效提高转基因酵母的抗干旱、盐、碱、氧化、重金属及低温胁迫的能力,表明Th DREB基因可能参与了柽柳多种抗逆调控过程。
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- 关键词：刚毛柽柳DREB转录因子酵母表达
- 落叶松愈伤组织诱导体系优化
- 2015年
- 以落叶松成熟合子胚为作为外植体材料,对其按照不同处理方式进行消毒、且以不同种类培养基和激素种类及浓度进行愈伤组织的诱导,测算愈伤组织的体积。统计分析结果表明:将去皮种子用流水冲洗2 d,用70%酒精消毒1min转入4%Na Cl O消毒10 min后,再将剥出的胚放入0.5%Na Cl O消毒2 min胚存活率最高;在光照条件下,MS培养基为愈伤组织诱导的优良培养基,2.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA或1.0 mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA激素组合为最佳。
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- 关键词：落叶松愈伤组织
- 刚毛柽柳ThP5CR基因的克隆及抗逆功能分析被引量：9
- 2017年
- 【目的】脯氨酸在植物对盐和干旱胁迫应答中起重要的渗透调节作用,增加植物体内脯氨酸含量可以提高植物抗逆性。吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)是合成脯氨酸的重要还原酶,本研究拟从抗旱耐盐植物刚毛柽柳中克隆获得1个ThP5CR基因,研究该基因的抗逆功能,为该基因用于林木基因工程育种奠定理论基础。【方法】以"Pyrroline 5 Carboxylate Reductase"作为关键词,对实验室前期构建的刚毛柽柳转录组序列进行比对查找获得ThP5CR基因c DNA序列,并通过RT-PCR和测序验证克隆获得的ThP5CR基因序列。利用生物信息学工具进行序列分析。利用Real time RT-PCR分析不同逆境处理下ThP5CR基因在刚毛柽柳根和叶中的表达情况。为了进一步分析ThP5CR基因的抗逆功能,构建了植物过表达载体pROKⅡ-ThP5CR,并进行刚毛柽柳瞬时转化,同时以pROKⅡ瞬时侵染刚毛柽柳作为对照。分析比较Na Cl和甘露醇胁迫后2种瞬时转化刚毛柽柳的脯氨酸、MDA、H2O2含量和二氨基联苯胺(DAB)、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)及伊文思蓝(Evans blue)染色情况,以综合评定ThP5CR基因的抗逆功能。【结果】ThP5CR基因编码273个氨基酸,编码蛋白分子量为28.29 k Da,理论等电点为9.22。含有典型的NADP结构域和P5CR二聚体结构域。2种胁迫(Na Cl和PEG6000)和3种激素(ABA、GA3和JA)处理后,刚毛柽柳ThP5CR基因的表达都发生了不同程度的改变,且每种处理后至少有1个时间点发生了明显改变。此外,Na Cl胁迫、PEG6000胁迫和ABA激素处理对ThP5CR基因的表达产生的影响更为显著。对2种瞬时表达刚毛柽柳植株中ThP5CR基因的表达分析显示成功获得瞬时过表达转基因株系(标记为OX)。进一步的生理指标和生理染色结果显示,非胁迫条件下,过表达植株脯氨酸含量高于对照植株(标记为Con);150 mmol·L-1Na Cl和200 mmol·L-1甘露醇胁迫后,2种转基因株系脯氨酸含量差异则更显著;NBT、
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- 关键词：刚毛柽柳基因表达耐盐抗旱
