孙巍
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京化工大学更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：理学更多>>
- 重组C-反应蛋白的纯化与肽标记的同位素稀释质谱测定被引量：3
- 2016年
- 本文依次采用Immobilized p-Aminophenyl Phosphoryl Choline Gel亲和层析柱和Superdex 75 10/300 GL分子筛层析柱分离纯化HEK293细胞重组C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP),对其进行了凝胶电泳、酶切、MALDI-TOF-MS鉴定,并利用蛋白质酶解-同位素稀释质谱法对其进行准确定量。结果表明,重组得到的样品符合CRP结构特征,液相纯度为96.527%,蛋白质酶解-同位素稀释质谱法定量的结果为3.32mg/g,扩展不确定度为0.19mg/g(k=2)。本文建立的蛋白质酶解-同位素稀释质谱法不受样品中肽类/蛋白类杂质的影响,提高了C-反应蛋白含量测定的准确度和精密度,定量结果可溯源至SI单位,为C-反应蛋白标准物质的研制奠定了基础。
- 张春鹂宋德伟孙巍刘钰肖鹏李红梅
- 关键词：C-反应蛋白亲和层析法肽类同位素稀释质谱法
