张艺宝
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划上海市科学技术委员会科研基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 两种玻璃化胚胎冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻效果比较被引量：2
- 2013年
- 目的探讨EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻的效果。方法 6个品系小鼠(KM、ICR、BALB/c、C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59)的2-cell胚胎分别用EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法进行冷冻和复苏,比较两种冷冻方法的胚胎复苏率和着床率。结果 6个品系小鼠冷冻胚胎EFS方法的平均复苏率为69.97%(47.9%～83.6%),DAP方法的平均复苏率47.23%(26.3%～76.7%),EFS方法明显优于DAP方法。其中KM、ICR和BALB/c小鼠EFS方法的冷冻复苏率显著高于DAP方法(P<0.01);冻融胚胎移植后EFS方法的平均着床率27.23%(1.75%～45.0%),DAP方法的平均着床率31.43%(7.0%～46.3%)。除KM、ICR小鼠外,其他4个品系小鼠的着床率DAP方法高于EFS方法。结论 KM和ICR远交群小鼠胚胎适合用EFS方法冷冻保存;C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59三个品系小鼠DAP方法优于EFS方法,但差异不大;BALB/c小鼠两种玻璃化冷冻方法的冻融胚胎着床率均较低,需进一步研究。
- 王俊风李淼张艺宝郁丽丽魏勤刘丽均施美莲徐平
- 关键词：胚胎玻璃化冷冻复苏率着床率小鼠
- 三种不同冷冻保护剂对小鼠附睾冷冻效果的比较被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨三种不同冷冻保护剂对C57BL/6J小鼠附睾冷冻的效果。方法性成熟并交配过的6～8周龄C57BL/6J雄鼠附睾，分别用3种不同冷冻保护剂二甲基亚砜（DMSO）、丙二醇（PROH）、R18S3进行玻璃化冷冻、复苏和精子采集，观察比较三个实验组的复苏精子形态、存活率以及生殖能力。结果三组冷冻复苏分离后的精子形态完整，具有镰刀头状结构；荧光染色后PROH组精子存活率为（88.17±3.43）％，明显高于DMSO组：（61.17±10.65）％和R18S3组（16.83±6.49）％（ P＜0.05）；经辅助体外受精后均具有受精能力。获得的胚胎移植后可得到正常子代小鼠（DMSO∶PROH∶R18S3＝13∶8∶17）。结论3种冷冻保护剂均适用于C57BL/6J小鼠附睾冷冻，但PROH冷冻效果较好。
- 李淼郁丽丽张艺宝强苏静刘丽均徐平
- 关键词：冷冻保护剂冷冻效果
- 同品系小鼠卵巢移植方法的建立被引量：3
- 2013年
- 目的建立KM、ICR、C57BL/6J、BALB/C四个品系新鲜卵巢异体同位移植的方法。方法上述四个品系出生10 d、20 d、4周的仔鼠作为供体,取出整个卵巢,将卵巢原位移植到同品系4周龄受体雌鼠,术后置于屏障系统内精心饲养,5～8周后,与同品系成年雄鼠交配,观察移植受体是否有正常的繁殖功能。结果同品系不同时间段的新鲜卵巢,移植到同品系受体中,移植卵巢在受体体内可以恢复正常功能,受体可以正常交配,产生正常的仔鼠。结论同品系不同日龄的异体同位卵巢移植方法可行。
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- 关键词：小鼠卵巢移植同位移植
- 移植部位对小鼠睾丸移植效果的影响被引量：1
- 2014年
- 目的比较不同的移植部位对睾丸移植效果的影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。方法按移植部位的不同分为3组:背部皮下组,睾丸白膜内组和肾包膜下组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊的重量,移植物存活率,回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果不同实验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜内组的分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸的分化率为29.2%;肾包膜下组未见分化。结论睾丸白膜内移植最利于精子的发生;背部皮下移植是睾丸移植的次优选择;肾包膜下睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官的安全保存。
- 张艺宝李淼郁丽丽强苏静刘丽均徐平芮荣
- 关键词：小鼠睾丸移植
- 受体和移植时间对小鼠睾丸移植效果的影响
- 2014年
- 通过比较不同受体和不同移植时间对睾丸移植效果的影响,以期探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。按受体不同分为C57BL/6J受体8周组和裸鼠受体8周组,按移植时间的不同分为裸鼠受体8周组和裸鼠受体10周组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析移植物存活率、回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果表明:不同试验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著,裸鼠受体8周组的分化情况好于C57BL/6J受体8周组(P<0.01);裸鼠受体10周组分化好于裸鼠受体8周组(P<0.05)。由此可见裸鼠受体的移植效果要好于同品系受体,将睾丸移植时间从8周延长到10周有利于生殖细胞的分化。
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- 关键词：小鼠睾丸移植移植受体
- 三种冷冻保护剂对新生小鼠睾丸组织冷冻效果的比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨三种不同冷冻保护剂对新生C57BL/6J小鼠睾丸冷冻的效果。方法 5日龄C57BL/6J雄鼠睾丸组织,分别用3种不同冷冻保护剂(二甲基亚砜、丙二醇、EFS20/40)进行玻璃化冷冻。复苏冷冻后的睾丸组织,每组一部分进行组织学分析,另一部分进行组织移植,移植后检测关键基因表达水平以及卵胞质内单精注射,并设相应对照组。结果 3个实验组睾丸组织形态改变与对照组相比均具有显著性差异(P<0.01),其中EFS组分值最低即改变最小;原位移植8周后组织块生长发育,存活率分别为DMSO组16.7%、PROH组13.3%、EFS组23.3%,存在成熟精子;睾丸组织特异性基因pgk-2和TESK1正常表达;卵胞质内单精注射表明移植后睾丸内精子均具有受精能力,胚胎移植后可得到正常子代小鼠(DMSO∶PROH∶EFS=5∶2∶8)。结论 3种冷冻保护剂均能良好保存睾丸组织结构和功能。其中,EFS方法保存的睾丸组织形态改变最小、功能完善更适于睾丸组织的冷冻。
- 李淼郁丽丽张艺宝强苏静刘丽均徐平
- 关键词：小鼠睾丸冷冻保护剂冷冻效果
- 激光打孔技术在小鼠卵子冷冻保存上的运用被引量：1
- 2013年
- 目的比较卵子冷冻复苏后、以及复苏卵子经过激光打孔后,与新鲜精子、冷冻复苏精子体外受精,受精率的变化。方法 (1)通过免疫荧光染色技术,判断卵子冷冻前后透明带糖蛋白-2、微丝以及细胞核的变化;(2)冷冻C57BL/6J小鼠卵子,复苏后一部分卵子打孔,一部分不打孔,然后与9个品系的新鲜精子和冷冻精子体外受精,比较各组受精率的变化。结果 (1)新鲜卵子组透明带糖蛋白-2、微丝及细胞核结构清晰,而冷冻组以及冷冻剂处理组,微丝结构略有变化,透明带糖蛋白-2受到不同程度的损伤,而细胞核在冷冻前后无明显变化;(2)9个品系的新鲜精子与C57BL/6J复苏卵子受精率为17.6%～42.9%,平均为29.6%;新鲜精子与复苏打孔卵子受精率为29.1%～72.3%,平均为49.7%,差异显著(P<0.05);9个品系复苏精子与复苏卵子体外受精率为5.4%～23%,平均为15.5%;复苏精子与复苏打孔卵子受精率为16.7%～48.6%,平均为28.8%,差异显著(P<0.05)。结论 (1)冷冻对卵子的透明带糖蛋白-2有较大的损伤,对微丝有一定的影响,但是对染色体没有影响;(2)冷冻卵子复苏后,体外受精率下降明显,但是复苏卵子经过激光打孔后,可以显著提高体外受精率。
- 刘丽均郁丽丽王俊凤张艺宝李淼施美莲廖侃徐平
- 关键词：卵子冷冻保存
- 仔鼠睾丸组织移植与冷冻保存试验
- 睾丸组织移植与冷冻保存对于动物种质资源的保存具有重要的意义，在拯救濒危物种上也具有重要的应用价值。该项技术可以保存睾丸组织细胞的完整性和内分泌功能。雄性睾丸中存在有精原干细胞，它是雄性生殖能力保存和恢复的保障。睾丸移植后...
- 张艺宝
- 关键词：兽医学睾丸组织器官移植冷冻保存
