徐志坚
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 供职机构：上饶师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家级大学生创新创业训练计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- PEG-6000模拟干旱胁迫对广丰药薯试管苗生理特性的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:对PEG-6000处理广丰药薯试管苗的生理特性进行研究,为广丰药薯的大田移栽提供理论基础。方法:采用分光光度计的方法,测定PEG-6000处理下广丰药薯试管苗的总叶绿素、可溶总糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量以及SOD、CAT和POD的活性。结果:在PEG-6000模拟干旱胁迫中,随干旱胁迫的加重和胁迫时间的延长,广丰药薯试管苗的总叶绿素含量持续下降,可溶性总糖、脯氨酸和MDA含量显著增加,可溶性蛋白含量以及CAT、POD和SOD活性则呈先升后降的趋势。结论:本研究揭示了广丰药薯试管苗在PEG-6000模拟干旱胁迫下生理指标的变化,表明广丰药薯具有一定的耐旱性。
- 俞晓凤徐志坚章省琴吕思杰付有章洪森荣尹明华
- 关键词：试管苗生理特性
- 江西山药茎尖包埋玻璃化法超低温保存及其遗传稳定性检测被引量：8
- 2016年
- 采用植物组织培养法对广丰药薯茎尖的包埋玻璃化法超低温保存程序进行优化,并采用扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记法和流式细胞术对其冻后再生苗的遗传稳定性进行检测,同时将超低温程序应用到江西山药其他地方品种,旨在为薯蓣属植物种质资源的长期保存奠定理论基础。结果表明,广丰药薯茎尖预培养的较佳时间为5 d,较佳的蔗糖浓度为0.75 mol·L^-1;装载的较佳时间为40 min;脱水的较佳温度为0℃,较佳时间为60 min;冻后黑暗培养7 d可以显著提高其成活率。用AFLP分子标记法和流式细胞术对茎尖冻后再生植株的遗传稳定性进行检测,没有发现异常条带和染色体倍性变化,气孔观察也未发现叶下表皮气孔参数的显著变异。将这种超低温保存程序用于江西山药其他基因型,成活率约为40%-85%。该研究建立的包埋玻璃化法超低温保存程序能保证江西山药的遗传稳定性,可为建立江西山药种质资源超低温保存库提供一定的技术支撑。
- 尹明华徐志坚章省琴吕思杰曾艳红付有章夏瑾华洪森荣
- 关键词：茎尖超低温保存
- 江西山药种质资源遗传多样性及其组培苗遗传稳定性的RAPD检测被引量：13
- 2016年
- 目的对来自江西的11份山药种质资源进行遗传多样性分析,并对其组培苗的遗传稳定性进行检测。方法采用RAPD-PCR技术。结果试验筛选出20条引物,共扩增出238个条带,其中234个为多态性带,平均每个引物扩增出多态性带11.7条,多态性条带比率为98.32%,材料间遗传相似系数为0.575 6~0.970 6,平均相似系数为0.723 1。根据UPGMA聚类分析结果,可在0.634 8的遗传相似系数上,将11份山药种质资源聚成5大类群(类群I^V)。其中第I类群只包含黄独;第II类群只包含瑞昌山药;第III类群包括南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药和铁棍山药,说明南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药与来源于河南焦作市温县的铁棍山药亲缘关系较近;第IV类包括南城山药、南城淮山药2、广丰药薯;第V类只包括泰和竹篙薯。这个结果表明江西山药种质资源遗传多样性还是比较丰富的。同时,江西山药带芽茎段连续继代6次后的组培苗(处理组)及其微型块茎实生苗(对照组)的RAPD分析结果也表明,11份山药品种均扩出126~179条可辨认的条带,每个品种的处理组和对照组均出现了5~18条变异条带数,表明江西山药各个品种带芽茎段连续继代6次后的组培苗存在着一定的体细胞无性系变异,但它们与微型块茎萌发实生苗的遗传相似系数还是比较高,说明它们的遗传性状还是比较稳定的,并未影响到其基因型。结论本实验结果可为江西山药引种育种、资源改良、品种鉴定、种质保存及其种苗培育提供可靠依据。
- 尹明华徐志坚黄玮何霖森刘根华洪森荣
- 关键词：种质资源组培苗RAPD检测
- 广丰千金薯离体快繁及其气孔观察、染色体倍数FCM分析和DNA变异ISSR检测被引量：2
- 2016年
- 目的：对广丰千金薯的离体快繁进行研究,并对其移栽驯化苗和盆栽苗的气孔、染色体倍数和DNA变异进行观察比较、FCM分析和ISSR检测,旨在为广丰千金薯种苗规模化生产提供技术基础。方法：采用植物组织培养的方法,建立和优化广丰千金薯离体快繁技术体系,并用透明胶带粘取法观察和比较移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数,用FCM分析移栽驯化苗和盆栽苗的染色体倍数,用ISSR检测分子标记检测移栽驯化苗和盆栽苗的DNA变异。结果：广丰千金薯离体快繁技术体系为：选取带芽的稍木质化茎段,经70%酒精消毒1 min、无菌水冲洗3次、0.1%氯化汞消毒12 min、无菌水冲洗3次,然后接种到MS＋KT 1 mg/L＋NAA 0.2 mg/L固体培养基上置于温度为（25±2）℃、光照强度为1 500～2 000 Lx、光照时间为14 h/d的条件下培养。待到新芽长至2～3 cm,便将其切下接种于MS＋KT 2 mg/L＋NAA 0.5 mg/L液体培养基中继续置于上述培养条件下培养。培养90 d左右便可形成完整植株。移栽时将封口膜打开,依旧置于上述培养条件下培养2～3 d,然后取出完整植株洗净培养基后放入盛有浅层MS基本培养液的容器中进行室内移栽驯化,待到新芽从植株上长出,即可取出驯化苗移植于户外盛有沙土（1∶1,40%甲醛消毒）的盆中,每天早晚各浇水1次,成活率达100%。气孔观察、FCM分析和ISSR检测结果显示,移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数和染色体倍数无显著性差异,两者的ISSR扩增谱带也无特异性条带产生。结论：建立和优化了广丰千金薯离体快繁技术体系,再生植株没有发生遗传性变异,可以保证其遗传稳定性。
- 尹明华徐志坚章省琴吕思杰曾艳红夏瑾华洪森荣
- 关键词：离体快繁
- 广丰药薯试管苗离体快繁技术的研究被引量：2
- 2015年
- 目的：对广丰药薯离体快繁技术进行研究,为广丰药薯试管苗的脱毒和种质保存提供方法学参考。方法：采用植物组织培养和单因子试验的方法,研究广丰药薯组织培养的基本程序,并利用流式细胞术检测广丰药薯试管苗与盆栽苗的DNA含量。结果：广丰药薯带芽茎段消毒的较佳程序是70%酒精灭菌20~30 s后无菌水冲洗3次,再用0.1%氯化汞灭菌10~12 min后无菌水冲洗3次;广丰药薯消毒的较佳外植体是稍木质化较成熟的带芽茎段;广丰药薯带芽茎段芽增殖较佳的培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L;广丰药薯带芽茎段生根较佳的培养基为MS＋NAA 0.5 mg/L;广丰药薯试管苗较佳的培养方式为液体培养;广丰药薯试管苗移栽的较佳基质为稻田粘土与细砂（1∶2）混匀物或珍珠岩与蛭石（1∶2）混匀物;广丰药薯试管苗的DNA含量与盆栽苗相比无显著性差异。结论：该研究建立了广丰药薯带芽茎段的离体快繁技术体系,其试管苗的流式细胞术检测结果也表明了广丰药薯试管苗的遗传稳定性,为广丰药薯试管苗的规模化生产提供了技术基础和理论依据。
- 尹明华徐志坚章省琴吕思杰曾艳红付有章洪森荣
- 关键词：试管苗离体快繁流式细胞术
