采用三聚磷酸钠和三偏磷酸钠法制备磷酸化绞股蓝皂苷(pGP),然后运用体外细胞培养法比较研究绞股蓝皂苷(GP)和pGP抗DHAV感染鸭胚肝细胞(DEH)的作用。通过MTT法测定了GP和pGP在DEH上的安全质量浓度,并采用先加药物后接种病毒、先接种病毒后加药物和药物与病毒同时感作3种加药方式观察了GP和pGP对DHAV(duck hepatitis A virus)感染DEH的影响。为了进一步验证药物的抗病毒效果,采用实时荧光定量PCR方法比较分析了最有效药物浓度的GP和pGP对DHAV在DEH上的吸附、复制和释放的影响。结果显示:GP和pGP在一定质量浓度下均能促进DEH的生长;GP和pOP都具有较好的体外抗DHAV的作用,且在先加药后加毒和先加毒后加药作用方式下,pGP的抗DHAV的作用效果优于GP;在先加药后加病毒作用方式时,GP和pGP均能有效抑制DHAV的吸附;在先加病毒后加药作用方式时,GP和pGP对病毒吸附鸭胚肝细胞没有明显的作用,但能有效抑制DHAV的复制和释放,且pGP的抑制效果优于GP。结果表明:磷酸化修饰显著提高了GP的抗DHAV作用,pGP有希望被开发成一种新型抗DHAV药物。
为了检测中药黄酮成分对鸭病毒性肝炎(DVH)的治疗效果,将208羽雏鸭随机分为4组:空白对照、病毒对照、化药对照及黄酮成分复方组;除空白对照组外,其余各组雏鸭6日龄时肌肉注射0.2 m L鸭肝炎病毒(DHV)悬液,然而化药对照组和黄酮成分复方组分别饮服相应药物进行治疗,空白对照组和病毒对照组饮服等量稀释剂,连用5 d,观察各组雏鸭存活情况,并测定各组血浆和肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及丙二醛(MDA)等氧化损伤评价指标,以评价黄酮成分复方对DVH的治疗作用。结果显示,黄酮成分复方的添加显著提高了被感染雏鸭的存活率,相对于病毒对照组,黄酮成分复方组的雏鸭存活率提高了31.99%;降低了由DHV引起的氧化损伤,使血浆和肝组织内氧化损伤指标回归到接近正常水平;DHV感染引起的氧化损伤指标的变化在肝组织中出现的时间早于血浆。表明该黄酮成分复方具有较好的抗DVH作用,其疗效可能与其抗氧化损伤有关。