李月涛
- 作品数:4 被引量:11H指数:1
- 供职机构:河南科技学院动物科学学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇间接竞争酶联免疫吸附测定试剂盒的研制及初步应用被引量:9
- 2019年
- 本试验旨在研制一种自主组装的间接竞争酶联免疫吸附测定(icELISA)试剂盒,用于饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测。在制备抗DON单克隆抗体的基础上,建立icELISA标准曲线,并对其检测方法进行优化,然后用于测定试剂盒各项性能,将测定结果与高效液相色谱(HPLC)法测定结果进行比较分析。结果显示:本试验研制的icELISA试剂盒对DON的最低检测浓度为1.147 ng/mL,检测范围为1.50~130.31 ng/mL,半抑制浓度(IC 50)为9.84 ng/mL。对小麦、玉米、猪料、鸡料4个样品进行添加回收试验,回收率在77.1%~113.2%,相对标准偏差(RSD)在4.2%~12.6%。并且,该试剂盒具有特异性高、稳定性良好、有效使用寿命长且样品基质干扰可以忽略不计等优点。利用该试剂盒测定20个盲样,其测定结果与HPLC法测定结果一致性良好。上述结果说明本试验研制的DON icELISA试剂盒各项性能符合相关技术要求,对DON检测具有准确可靠、方便快捷、高通量大等特点,可满足市场对DON的快速初筛需求。
- 韩丽张文举王自良李月涛姜金庆李任峰范国英张海棠牛琳琳吕俊美周叶
- 关键词:脱氧雪腐镰刀菌烯醇
- 小反刍兽疫病毒西藏株血凝素蛋白和融合蛋白兔多克隆抗体的制备与初步应用被引量:1
- 2022年
- 目的 对小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants Virus,PPRV)强毒株China/Tibet/Geg/07-30血凝素蛋白H和融合蛋白F的主要抗原表位区进行原核表达,并制备兔抗PPRV H和F蛋白多克隆抗体。方法 根据GenBank上公布的PPRV China/Tibet/Geg/07-30 (GenBank FJ905304.1)株H和F蛋白的基因序列构建重组质粒pET30a(+)-H和PGEX-4T-1-F,并将重组质粒转化至宿主菌E.coliBL21(DE3)感受态,IPTG诱导表达目的蛋白,经亲和层析纯化后与弗氏佐剂混合免疫新西兰大白兔,收集血清,制备多克隆抗体,利用间接免疫荧光(IFA)方法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体与抗原的结合能力。结果 分别对重组质粒进行酶切,pET30a(+)-H切出约1 653 bp的PPRV H基因,PGEX-4T-1-F切出约为1 245 bp的PPRV F基因,与预期一致。经IPTG诱导后重组蛋白以包涵体的形式表达,Western blot检测原核表达的两个目的蛋白均能与标签抗体发生反应,ELISA检测原核蛋白抗原能与相应多克隆抗体相结合,间接免疫荧光试验显示兔多克隆抗体能够识别表达PPRV H蛋白的重组狂犬病病毒(rSRV9-H)和表达PPRV F蛋白的重组狂犬病病毒(rSRV9-F)。结论 利用原核表达系统成功表达出具有抗原性的PPRV China/Tibet/Geg/07-30株F和H蛋白,并制备了高特异的兔多克隆抗体,为建立针对PPRV H、F蛋白抗原的鉴定及亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 王浩杰毕津豪冯娜赵永坤王玮琦王铁成李月涛闫飞虎杨松涛夏咸柱
- 关键词:小反刍兽疫小反刍兽疫病毒血凝素蛋白融合蛋白多克隆抗体
- 鸡生殖器官β-防御素研究进展被引量:1
- 2017年
- 家禽的抗菌肽主要以β-防御素为主,禽类β-防御素具有保护组织免受不可预见的致病微生物感染的功效.禽类的卵巢和输卵管是内分泌调节的独特器官,禽类β-防御素在卵巢和输卵管中受到卵巢分泌的促性腺激素和性腺激素的作用,所以禽类β-防御素在杀灭鸡生殖道内致病微生物,保护精子的作用方面具有一定的特殊性.综述了禽类β-防御素在鸡生殖道的作用,并对β-防御素在鸡生殖器官先天免疫系统中的表达机制以及对β-防御素有影响的物质进行了论述.
- 付义凯韩丽胡建和王三虎李月涛
- 关键词:生殖器官脂多糖
- 家禽DNA模式识别受体研究进展
- 2023年
- 天然免疫系统在检测外来入侵物质和激发特异性免疫系统中发挥至关重要的作用,机体利用DNA模式识别受体(PRRs)识别入侵的DNA病毒或细菌的病原分子相关模式配体(PAMPs),与下游接头蛋白连接,引发干扰素、促炎细胞因子和其他抗病毒细胞因子,以此来保护机体免受相应病原体的侵害。其中,病原体释放到细胞中DNA是最主要的PAMPs。随着对DNA PRRs研究不断的深入,DNA PRRs介导天然免疫的机制已逐渐明朗。文章结合哺乳动物DNA PRR相关研究重点对家禽DNA PRRs(cGAS、IFI16、AIM2、DDX41、TLR21等)介导抗DNA病毒天然免疫的机制进行探讨,对于研究和开发新型抗病毒和抗菌药物具有显著意义,此外,也有助于深入研究哺乳动物天然免疫系统的演化历程和发展过程。
- 王迁迁李月涛孙建和程玉强
- 关键词:天然免疫干扰素DNA病毒