李睿
- 作品数:31 被引量:20H指数:3
- 供职机构:河南省农业科学院更多>>
- 发文基金:河南省现代农业产业技术体系项目国家自然科学基金青年科技基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- IPMA筛选猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体方法研究被引量:3
- 2019年
- 为了得到一种能够高通量检测细胞培养物的方法,并将其用于筛选特异性强、敏感度高的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体。用每孔能感染约100个细胞的病毒量接种单层覆盖96孔板的Marc-145细胞,12h后用含3%H2O2的甲醇固定细胞,以制备免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)反应板。以100μL/孔的量将融合后继续培养10d的杂交瘤细胞的培养上清加入至IPMA反应板,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG-HRP作为二抗,以3-氨基-9-乙基咔唑(AEC)作为显色底物,于倒置显微镜下进行观察。结果表明,共筛选出1D1、7G8等39份PRRSV单克隆抗体,这39份单抗能够使PRRSV中高致病毒株HN07-1和经典毒株BJ-4感染的Marc-145细胞被特异性染色,而对猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒感染的Marc-145细胞无交叉染色。因此,构建的IPMA方法能够敏感、准确地捕捉到PRRSV单克隆抗体。
- 杨艳艳乔松林李睿郭军庆李青梅滕蔓王丽赵东李学伍邓瑞广张改平
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体
- 一株抗PEDV S蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及一株抗PEDV S蛋白的单克隆抗体及其应用,所述单克隆抗体杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株MAb‑S,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202289。由杂交瘤细胞株MAb‑S分泌的单克隆抗...
- 李睿乔松林温颖卢清侠邢广旭陈鑫鑫郭振华赵东李学伍张改平
- 一种高尔基体重组和堆叠蛋白65真核表达载体及其构建方法和应用
- 本发明涉及一种高尔基体重组和堆叠蛋白65(GRASP65)真核表达载体及其构建方法和应用,通过构建GRASP65真核表达载体,在非洲绿猴肾上皮细胞系MARC‑145中转染GRASP65真核表达载体;以高致病性PRRSV(...
- 李睿赵爽爽乔松林陈鑫鑫郭军庆邢广旭赵东张改平
- 一种Mhp P46蛋白的获取方法和胶体金免疫层析试纸条
- 本发明涉及生物工程技术领域,特别是涉及一种Mhp P46蛋白的获取方法和胶体金免疫层析试纸条。Mhp P46蛋白的获取方法包括:将Mhp P46基因连接到pCAGGS中,得到pCAGGS‑P46重组质粒;将pCAGGS‑...
- 陈鑫鑫许世萱乔松林孙亚宁邢云瑞杨苏珍李睿郭军庆张改平
- 四溴苯三唑抑制猪流行性腹泻病毒体外感染的方法及应用
- 本发明涉及一种TBB抑制猪流行性腹泻病毒体外感染的方法及应用,所述TBB可用于制备抑制猪流行性腹泻病毒感染的抗病毒药物。本发明在Vero细胞感染PEDV过程中添加浓度为10μmol/L的TBB,与未加TBB处理组相比,添...
- 李睿卢清侠杨磊乔松林邢广旭陈鑫鑫郭振华赵东李学伍张改平
- 和厚朴酚抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒体外感染的方法及应用
- 本发明涉及和厚朴酚抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒体外感染的方法及应用,试验表明,和厚朴酚可用于制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物。本发明在MARC‑145细胞体外感染PRRSV过程中添加浓度为2.5、5、10μmol/...
- 李睿乔松林王垚陈鑫鑫卢清侠郭振华郭军庆邢广旭赵东张改平
- 一种提高猪繁殖与呼吸综合征病毒体外培养感染量的方法及其应用
- 本发明涉及提供一种提高猪繁殖与呼吸综合征病毒体外培养感染量的方法及其应用,在MARC‑145细胞或PAMs体外培养PRRSV过程中添加胰蛋白酶或弹性蛋白酶,所述胰蛋白酶的浓度为100μg/mL~200μg/mL;弹性蛋白...
- 李睿张改平侯婕乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒膜融合机制研究进展被引量:5
- 2021年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染疫病,对全球尤其是我国养猪业危害巨大。然而,目前对PRRS防控并未取得实质性成效,究其原因是PRRSV具有独特而且复杂的感染机制。作为一种具有囊膜的病毒,PRRSV感染宿主细胞必须经病毒囊膜与宿主靶细胞膜的融合(membrane fusion),这是由病毒膜融合蛋白(fusion protein)介导,宿主细胞受体、蛋白酶等诸多因素共同参与的复杂过程。干扰PRRSV膜融合将会有效阻止病毒的感染与传播。论文通过总结PRRSV膜融合机制最新研究进展,旨在为防控PRRS提供新的理论依据,同时为PRRSV新型药物开发、新型疫苗研制提供参考。
- 李睿乔松林张改平
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒膜融合蛋白酶
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵受体唾液酸黏附素的表达与纯化被引量:3
- 2016年
- 为了探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)假定受体唾液酸黏附素(sialoadhesin,Sn)的结构生物学信息及其在PRRSV入侵过程中所发挥的作用,利用昆虫表达系统(果蝇胚胎细胞,S2细胞)表达了猪源Sn v-set Ig-like结构域重组蛋白,并进行了Western blotting检测、质谱检测及镍柱纯化试验。结果表明,成功表达了目的重组蛋白,表达的重组蛋白序列与Sn v-set Ig-like结构域目的蛋白序列100%匹配,且获得的重组蛋白具有生物学活性,纯度高达99%。
- 侯婕李睿马红芳乔松林张改平
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 一种非洲猪瘟病毒核酸免提取三重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸免提取的非洲猪瘟病毒B646L、MGF505‑2R和CD2v三基因荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒,属于分子检测技术领域。本发明针对非洲猪瘟病毒的B646L、MGF505‑2R和CD2v基因分别设...
- 郭振华邢广旭陈鑫鑫王方雨李睿乔松林郭军庆张改平
- 文献传递