谭晓文
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：天津中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- G蛋白耦联受体二聚体药理学研究进展
- 2015年
- G蛋白耦联受体(GPCR)作为几乎遍布人类每一细胞的功能受体,具有多种生理和病理学功能。GPCR通过激活细胞内的不同的G蛋白亚基,从而激活不同的胞内通路,产生不同生物学效应。近年来,越来越多的研究表明这些受体通过二聚体的形式参与调节生理活动,对信号识别及转导有重要作用,进而为生理变化及疾病治疗提供了新的靶点。现随着生物技术和分子生物学的发展,GPCR二聚体研究已取得了很大的进展。就GPCR所形成的同源、异源二聚体对生理及病理重要作用作一简述。
- 张翕婷董鹏志谭晓文王莹朱彦
- 关键词：G蛋白耦联受体二聚化信号转导
- 以ADP受体P2Y12为靶标的中药抗栓活性无标记细胞表型筛选被引量：1
- 2017年
- [目的]建立二磷酸腺苷(ADP)受体P2Y12的无标记方法以高通量、低毒性地筛选中药抗血小板/血栓活性物质。[方法]应用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒p CMV-h P2Y12-C-His转染入HEK293细胞,采用遗传霉素(G418)筛选获得稳定转染的h P2Y12-C-His-HEK293细胞系,以实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western Blot)的方法,分别从转录和翻译水平验证P2Y12-His的表达,采用Lable-free Enspire多功能读板机检测激动剂ADP的激动作用,以及抑制剂替卡格雷的抑制作用,以确定筛选体系的可靠性,并利用该体系筛选中药活性组分及单体共30种。[结果]经PEI转染和G418筛选获得了P2Y12-His-HEK293稳转细胞株。q RT-PCR和Western Blot结果表明P2Y12-His m RNA和蛋白表达量均显著性增加。Lable-free Enspire多功能读板机检测实验表明P2Y12受体激动剂ADP,抑制剂替卡格雷,有显著的激动及抑制作用,且具有明显的量效关系。中药组分及单体筛选结果表明,有7种组分或单体对P2Y12受体具有良好的抑制作用。[结论]本实验成功建立了ADP受体P2Y12Lable-free Enspire多功能读板机的无标记高通量筛选。
- 谭晓文董鹏志宁召臣朱彦
- 关键词：无标记高通量
