陈玉忠
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 供职机构：蚌埠医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 积雪草酸通过ROS介导的细胞凋亡抑制胃癌细胞增殖并诱导保护性自噬被引量：3
- 2020年
- 目的研究积雪草酸对BGC-823和HGC-27人胃癌细胞增殖的抑制作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法BGC-823和HGC-27胃癌细胞中分别加入浓度为0,25,50,100μmol/L的积雪草酸处理12,24,48,72 h.MTT法检测细胞增殖的影响;流式检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测凋亡标志蛋白cleaved Caspase3、cleaved Caspase9、cleaved PARP、自噬标志蛋白LC3、P62以及线粒体和细胞质中细胞色素C的表达;ROS检测试剂盒检测ROS水平;GSH检测试剂盒检测GSH的含量.同时给与积雪草酸和ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸,采用MTT考察BGC-823和HGC-27胃癌细胞的生存率.同时给与积雪草酸和自噬抑制剂氯喹或3-甲基腺嘌呤考察自噬在积雪草酸抗BGC-823和HGC-27胃癌细胞增殖中的作用.结果MTT结果显示,积雪草酸(0,25,50,100μmol/L)作用于BGC-823和HGC-27胃癌细胞后,细胞生存率随时间和剂量依赖性地降低(P<0.05).流式结果显示,积雪草酸(0,25,50,100μmol/L)作用于BGC-823和HGC-27胃癌细胞后,细胞凋亡率明显增加(P<0.05).Western blot显示,积雪草酸(0,25,50,100μmol/L)处理BGC-823和HGC-27胃癌细胞后,cleaved Caspase3、cleaved Caspase9、cleaved PARP的表达显著上调(P<0.05).积雪草酸(0,25,50,100μmol/L)作用于BGC-823和HGC-27胃癌细胞后,细胞中的ROS水平增加(P<0.05),GSH水平降低(P<0.05).MTT结果显示,与单独积雪草酸处理相比,5 mmol/L ROS清除剂N-乙酰半胱联合50μmol/L积雪草酸处理BGC-823和HGC-27胃癌细胞生存率明显升高(P<0.05).Western blot显示,积雪草酸浓度依赖性地上调BGC-823和HGC-27胃癌细胞中LC3-Ⅱ的表达(P<0.05),并下调P62的表达(P<0.05).MTT结果显示,与单独积雪草酸处理相比,20μmol/L自噬抑制剂氯喹或25μmol/L 3-甲基腺嘌呤联合50μmol/L积雪草酸处理BGC-823和HGC-27胃癌细胞生存率明显降低(P<0.05).结论积雪草酸可通过ROS介导的细胞凋亡抑制胃癌细胞增殖并诱导保护性自噬.
- 杜军陈玉忠李雷王凯马家驰
- 关键词：积雪草酸ROS凋亡自噬增殖胃癌
- 白细胞介素-1受体2型与c-Fos相互作用促进结肠癌细胞增殖、侵袭和血管新生被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨白细胞介素-1受体2型(interleukin-1 receptor 2,IL1R2)与原癌基因c-Fos的相互作用,及其影响结肠癌细胞增殖、侵袭和血管新生的机制。方法:采用Westernblot法检测结肠癌组织及癌旁组织中IL1R2和c-Fos的表达。通过双重荧光素酶测定IL1R2和c-Fos之间的相互作用关系。通过RT-PCR法检测IL1R2不同转染组IL1R2和c-Fos的mRNA表达。通过CCK8和Transwell法检测人结肠癌细胞SW620的增殖和侵袭作用。使用ELISA法测定SW620培养上清液中VEGF、VEGFR2、HIF-1α和bFGF的表达水平。结果:结肠癌组织较癌旁组织IL1R2和c-Fos的表达升高(P<0.05)。双重荧光素酶测定结果证实了c-Fos是IL1R2的真正靶点。与对照组比较,IL1R2 mimic组IL1R2和c-Fos mRNA表达升高(P<0.05),而IL1R2 inhibitor组IL1R2和c-Fos mRNA表达降低(P<0.05);IL1R2 mimic组细胞增殖和侵袭升高(P<0.05),而IL1R2 inhibitor组细胞增殖和侵袭降低(P<0.05);IL1R2 mimic组VEGF、VEGFR2、HIF-1α和bFGF表达水平升高(P<0.05),而IL1R2 inhibitor组VEGF、VEGFR2、HIF-1α和bFGF表达水平降低(P<0.05)。结论:IL1R2与c-Fos的相互作用可以进一步影响结肠癌细胞的增殖、侵袭和血管新生。
- 李雷张晨嵩潘成武杜军陈玉忠马家驰
- 关键词：结肠癌细胞原癌基因C-FOS血管生成
- 二甲双胍联合奥沙利铂对结肠癌SW480细胞凋亡及细胞周期的影响被引量：3
- 2020年
- 目的探讨二甲双胍(metformin,Met)联合奥沙利铂(oxaliplatin,Oxa)对结肠癌SW480细胞凋亡及细胞周期的影响。方法用MTT法检测分别应用二甲双胍(0,5,10,20,40 mmol/L)、奥沙利铂(0,5,10,20,40μmol/L)对SW480细胞的增殖抑制作用。PI单染法检测分别应用二甲双胍(0,5,10,20,40 mmol/L)、奥沙利铂(0,5,10,20,40μmol/L)及二甲双胍(10 mmol/L)联合奥沙利铂(10μmol/L)对SW480细胞凋亡的影响。流式细胞术检测二甲双胍(10 mmol/L)、奥沙利铂(10μmol/L)及两者联合作用时SW480细胞周期的变化。Western blot法检测二甲双胍(10 mmol/L)、奥沙利铂(10μmol/L)及两者联合作用SW480细胞凋亡及细胞周期相关蛋白的表达。结果单独应用二甲双胍、奥沙利铂作用于SW480细胞后细胞的增殖随浓度增加而降低,二甲双胍联合奥沙利铂与单药作用相比细胞增殖抑制作用明显(P<0.05)。二甲双胍、奥沙利铂分别处理SW480细胞,细胞凋亡率随着给药浓度的增高而增加,联合用药组与单药组相比,细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。细胞周期检测显示与空白组及单药组相比,联合用药组SW480细胞在G0/G1期比例增加(P<0.05)。Western blot结果显示与空白组和单药组相比,联合用药组作用于SW480细胞后Cyclin D1及CDK4的表达降低,P21的表达增加(P<0.05)。促凋亡蛋白cleaved-caspase-3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合奥沙利铂可抑制结肠癌SW480细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与细胞周期的阻滞有关。
- 陈玉忠魏丽杜军韩冰清石磊李雷马家驰
- 关键词：二甲双胍奥沙利铂结肠癌SW480细胞凋亡细胞周期
- 紫草素对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体的表达和增殖及凋亡的影响被引量：9
- 2016年
- 目的探讨紫草素(shikonin,SK)对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达及其对细胞的增殖和凋亡的影响。方法用MTT法检测不同浓度SK(0,1,2,4,8μmol/L)处理MCF-7细胞24,48,72 h的增殖抑制作用;集落克隆形成实验观察低浓度SK(0,0.1,0.2,0.4μmol/L)对MCF-7细胞增殖的影响;DAPI染色观察SK处理24 h对MCF-7细胞凋亡的影响;流式细胞术(PI单染法)检测不同浓度SK(0,1,2,4,8μmol/L)作用MCF-7细胞24 h细胞凋亡比率;Western blot法检测SK对雌激素受体表达的影响。结果 SK作用于MCF-7后细胞存活率随浓度增加而降低(P<0.05)。0.1,0.2,0.4μmol/L SK作用MCF-7细胞后抑制集落克隆形成,0.1,0.2,0.4μmol/L SK组分别与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。DAPI荧光染色结果显示,随SK浓度(1,2,4,8μmol/L)增加,浓缩深染致密状的细胞核数目逐渐增加。不同浓度的SK(1,2,4,8μmol/L)作用于MCF-7细胞凋亡率分别为(7.0±1.27)%,(11.6±1.45)%,(15.1±1.36)%,(29.5±1.41)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。MCF-7细胞株中雌激素受体的表达随SK浓度的增加而降低;2,4μmol/L组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SK可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与雌激素受体表达降低有关。
- 陈玉忠韩福生许磊张智瑞潘琼刘浩金功圣
- 关键词：紫草素乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡雌激素受体
