高航飞
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛支原体内蒙古分离株脂蛋白vspY基因的克隆和序列分析被引量：3
- 2015年
- 旨在为进一步研究牛支原体内蒙古分离株（NM 2012）的vsp Y1、vsp Y2基因功能提供依据。根据已发表的牛支原体vsp Y1、vsp Y2基因序列设计引物,对NM 2012株的vsp Y1、vsp Y2基因进行克隆、测序,并与已发表的相关序列进行相似性比较;采用在线生物信息学分析工具对NM 2012株的vsp Y1、vsp Y2推导的氨基酸的相似性、保守结构域、跨膜结构、信号肽、脂蛋白、抗原表位进行预测。结果表明,牛支原体内蒙古分离株（NM 2012）的vsp Y1、vsp Y2基因大小分别为1 029 bp和804 bp,分别编码342和267个氨基酸组成的完整开放阅读框;vsp Y1与已发表的牛支原体vsp Y1基因相似性为99.4%~100%,其推导的氨基酸序列相似性为98.6%~99.7%,vsp Y2与已发表的牛支原体vsp Y2基因相似性为100%。根据生物信息学软件分析结果推测,vsp Y1蛋白是潜在的毒力因子。
- 宫利娜郝瑞峰王业华张岩高航飞李琛海日汗李平安吴太平关平原
- 关键词：牛支原体VSPVSP分子克隆
- 牛支原体NM2012株致病性研究被引量：3
- 2016年
- [背景]牛支原体是牛呼吸道疾病综合征的重要病因之一,可以引起牛的多种呼吸道疾病,给养殖业带来巨大的经济损失。接种疫苗是预防牛支原体感染的最有效的手段。[目的]通过人工感染牛体试验,了解牛支原体NM2012株的致病性,为后续疫苗研究提供生产用菌种。[方法]将牛支原体NM2012株第6代、第12代、第20代菌株分别经人工气管注射感染2周龄犊牛,攻毒后连续观察27 d,记录攻毒后犊牛的临床症状,在感染后第14天,从各攻毒组分别选取3头犊牛、空白对照组选取2头犊牛进行扑杀,第27天将剩余实验犊牛处死,观察肉眼病理变化和组织学病理变化。[结果]3个代次的NM2012菌株均对犊牛具有致病性,可引起比较典型的牛支原体肺炎症状和病理变化。[结论]NM2012株6-20代仍然具有对牛的致病性,可以作为今后疫苗研究的潜在菌种。
- 高航飞李建牛同州涂明亮李雪峰纪燕赵永春申之义
- 关键词：牛支原体犊牛
- 牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：11
- 2017年
- 本研究旨在建立一种快速检测牛支原体(Mycoplasma bovis)的实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中收录的牛支原体OPPD/F基因序列(登录号:AF130119),利用Primer 5.0软件设计特异性引物与TaqMan探针,以重组质粒作为绝对定量模板,构建检测牛支原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。结果显示该检测方法线性关系良好,标准曲线的相关系数R2=0.994,扩增效率E=1.280。荧光定量PCR法检测的敏感性是常规PCR的10倍;特异性良好,检测9种相关细菌和病毒均为阴性;重复性好,组内及组间样本检测Ct值均小于2%。牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法较之于常规PCR方法有快速、特异性强、敏感性高、稳定性好的优点。
- 李建高航飞安维雪牛同州赵永春遇培之满都拉图乌力吉那仁王建国申之义
- 关键词：牛支原体荧光定量PCR
- 布鲁菌S2疫苗株的核酸探针检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- 为了鉴别布鲁菌疫苗免疫和自然感染,建立鉴别布鲁菌S2疫苗株与其他菌株的斑点杂交法。针对布鲁菌基因序列保守区S2疫苗株与其他菌株的差异设计探针,同时根据差异部分设计引物进行PCR扩增;PCR产物经过回收、纯化、变性后固定在NC膜上,与探针杂交、显色。结果显示,PCR引物能够对S2疫苗株扩增出约330bp的核酸片段,对其他布鲁菌扩增出约360bp的核酸片段;探针只能和S2疫苗株的PCR产物杂交,最低检测到10pg DNA,能够在10h内鉴别出布鲁菌S2疫苗株。
- 张岩李建宫利娜高航飞李旭东安维雪申之义
- 关键词：布鲁菌斑点杂交
