- 血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶2在肝细胞癌中过表达并介导肝癌细胞中糖原合成酶激酶-3β/β-连环蛋白信号传导
- 2020年
- 目的探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK2)在肝癌组织与正常肝脏组织中的表达差异以及介导肝细胞癌(HCC)细胞中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号传导的相关机制。方法收集配对的HCC及正常组织20对,采用实时荧光定量PCR技术检测SGK2 mRNA表达情况。应用蛋白质印迹法检测人肝癌细胞系Huh-7、SMMC-7721以及正常人肝细胞系L02中SGK2蛋白水平。应用SGK2 siRNA转染人肝癌细胞系SMMC-7721、Huh-7,然后使用蛋白质印迹方法检测上述转染成功细胞系中GSK-3β、β-catenin的蛋白质表达水平。计量资料以均值±标准差(±s)表示,统计学方法采用Student t检验。结果与配对正常肝组织中的表达水平相比,所有20个HCC样品中SGK2 mRNA表达上调。在两种人肝癌细胞系(Huh-7和SMMC-7721)中SGK2蛋白水平显著高于正常人肝细胞系(P<0.01)。在人HCC细胞系SMMC-7721和Huh-7中,SGK2表达下调抑制了未磷酸化GSK-3β表达。另外,在HCC细胞系中SGK2表达下调通过阻止β-catenin蛋白酶体降解来降低β-catenin的去磷酸化。结论SGK2在HCC中过表达并介导HCC细胞中GSK-3β/β-catenin信号传导。
- 刘俊英孔鑫李涵范桂丽刘洋梁祖兰王玲慧张钰赵媛范玉梅吴斌于彦章
- 关键词：糖原合成酶激酶-3Β-连环蛋白
- 乙型肝炎病毒下调抑制素表达促进肝癌细胞的增殖与存活
- 2023年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对抑制素(PHB)表达的影响及PHB在肝细胞癌(HCC)细胞增殖和存活中的作用。方法应用实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹法检测13对HBV感染肝脏和正常肝脏及HepG2.2.15和HepG2细胞的PHB表达情况。收集7例慢性乙型肝炎患者抗病毒(替诺福韦酯)治疗前后的肝组织,采用RT-PCR技术和蛋白质印迹法检测PHB的表达。收集转染了Pcmv6-AC-GFP-PHB和对照载体的HepG2.2.15细胞。通过流式细胞仪分析DNA的含量。应用细胞增殖测定法检测每个细胞组的增殖水平。将转染了Pcmv6-AC-GFP-PHB的HepG2.2.15细胞和对照载体在无血清培养基中培养6 d。采用基于荧光激活细胞分选(FACS)的Annexin-V/碘化丙啶双重染色在指定的时间点检测细胞凋亡。组间比较采用Student t检验。结果与正常肝组织相比,HBV感染肝组织PHB表达下调(P<0.01);与HepG2细胞相比,HepG2.2.15细胞PHB表达显著下降(P<0.01)。抗病毒(替诺福韦酯)治疗后的肝组织PHB表达水平较治疗前明显上调(P<0.01)。与对照载体相比,转染了Pcmv6-AC-GFP-PHB的HepG2.2.15细胞增殖速率明显低于对照载体,转染了Pcmv6-AC-GFP-PHB载体的HepG2.2.15细胞的凋亡率显著高于对照(P<0.01)。结论HBV下调PHB表达从而促进HCC细胞的增殖和存活。
- 刘俊英邵建营刘洋李涵孔鑫赵媛范玉梅吴斌赵明
- 关键词：乙型肝炎病毒抑制素肝细胞癌
- 121例人工肝治疗肝衰竭病例流行病学分析
- 2023年
- 目的:分析采取人工肝治疗的肝衰竭患者流行病学特点。方法:收集本院2019-2021年采取人工肝治疗的肝衰竭病例。对其一般资料、入院方式、入住科室、住院时间、临床分型、肝衰竭病因、人工肝治疗次数等进行统计分析。结果:121例人工肝治疗的肝衰竭患者平均年龄49.86±13.17岁,40-50岁年龄组占比最高(24.79%),男女之比3.17:1;肝衰竭的临床分型以慢加急性肝衰竭为主(71.07%),其次为慢性肝衰竭(12.40%)、急性肝衰竭(11.57%)和亚急性肝衰竭(4.96%),其中乙型病毒性肝炎为慢加急性肝衰竭的主要病因;平均住院时间为23.26±11.71 d,其中慢性肝衰竭患者平均住院时间最长为26.53±12.73 d;平均人工肝治疗次数4.21±3.00次,血浆置换治疗模式使用最多486次,其次为血浆灌流、血液滤过、双重血浆分子吸附和血浆透析滤过。结论:进行人工肝治疗的肝衰竭患者在性别和年龄上存在差异,临床分型上以慢加急性肝衰竭为主,乙型病毒性肝炎仍为主要病因。
- 李涵胡永建刘洋谭浩铅赵明刘俊英
- 关键词：肝衰竭人工肝血液净化病例资料流行病学
- 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因4在HepG2细胞凋亡中的作用及其机制
- 2019年
- 目的探讨在肝母细胞瘤HepG2细胞凋亡中乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因4(XTP4)的作用及其机制。方法在HepG2细胞中瞬时转染XTP4的表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-XTP4及XTP4基因的小干扰RNA及各自的阴性对照,48h后用蛋白质印迹法检测在HepG2细胞中XTP4的过表达和干扰表达情况;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡;蛋白质印迹法检测各组HepG2细胞中凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平,并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测HepG2细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。计量资料以均值±标准差表示,两组间比较采用独立样本t检验。结果在HepG2细胞中成功实现XTP4蛋白的过表达和干扰表达。与对照组相比,在HepG2细胞中过表达XTP4可以使凋亡细胞数显著减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P<0.05),P53蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达降低,Caspase-3活性下降(P<0.05);而在HepG2细胞中用干扰RNA抑制XTP4表达可以使凋亡细胞数显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05),P53蛋白表达增加(P<0.05),Caspase-3蛋白表达增加,Caspase-3活性上升(P<0.05)。结论在HepG2细胞凋亡中XTP4具有抑制作用,其抑制HepG2细胞凋亡的作用可能是通过调节Bcl-2/Bax比值实现,P53蛋白可能参与其中。
- 刘俊英李涵刘洋时朝辉梁祖兰王玲慧张钰赵媛范玉梅吴斌于彦章
- 关键词：细胞凋亡HEPG2细胞BCL-2/BAX
- 人工肝血液净化技术治疗肝衰竭患者的近期疗效及其影响因素
- 2023年
- 目的:探讨人工肝血液净化技术治疗肝衰竭患者的近期疗效及其影响因素。方法:回顾性分析2019年1月至2021年12月于周口市中心医院行人工肝血液净化技术治疗的113例肝衰竭患者的临床资料,评估人工肝血液净化技术治疗肝衰竭患者的近期疗效,并对影响疗效的相关因素进行单因素和多因素Logistic回归分析。结果:113例肝衰竭患者经人工肝血液净化治疗后,临床好转70例(61.95%),临床恶化43例(38.05%);临床好转者与临床恶化者的性别、病毒性肝炎、腹水、合并感染、人工肝血液净化技术治疗次数,以及凝血酶原活动度、血红蛋白、血钾水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);临床好转者与临床恶化者的年龄、入院途径、入住病房、肝衰竭分型、肝性脑病占比和血清总胆红素、白蛋白水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,年龄大、急性肝衰竭、血清总胆红素水平高、白蛋白水平低是人工肝血液净化技术治疗肝衰竭患者近期疗效差的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:年龄大、急性肝衰竭、血清总胆红素水平高、白蛋白水平低是人工肝血液净化技术治疗肝衰竭患者近期疗效差的独立危险因素。
- 李涵胡永建刘洋刘怡晗赵明刘俊英
- 关键词：人工肝血液净化技术肝衰竭近期疗效影响因素
- 多烯磷脂酰胆碱注射液联合注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗胆汁淤积性黄疸的疗效观察被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨多烯磷脂酰胆碱注射液联合注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗胆汁淤积性黄疸患者的疗效。方法:选取胆汁淤积性黄疸患者62例,随机数字表法分为观察组与对照组。对照组予以注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗,观察组在此基础上予以多烯磷脂酰胆碱注射液。统计两组治疗总有效率、不良反应发生率,并对比两组治疗前后肝功能指标水平。结果:观察组治疗总有效率高于对照组;观察组治疗后AST、TBil、ALT、DBil水平低于对照组;差异有统计学意义(P<0. 05);两组不良反应发生率比较无统计学差异(P>0. 05)。结论:对胆汁淤积性黄疸患者联合采用注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸、多烯磷脂酰胆碱注射液治疗,可显著改善患者肝功能,提高治疗效果,且安全性高,值得临床推广应用。
- 刘洋刘俊英李涵孔鑫邵建营
- 关键词：胆汁淤积性黄疸注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸多烯磷脂酰胆碱注射液
- 大鼠肝纤维化肝组织中抗衰老标志蛋白和抗增殖蛋白的表达研究
- 2014年
- 目的 研究猪血清所致肝纤维化大鼠肝组织中抗衰老标志蛋白（RGN）、抗增殖蛋白（PHB）表达及谷胱甘肽复方注射液（CGII）对其的干预. 方法 健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组、造模组.正常组予等渗盐水腹腔注射0.5 ml/只,造模组予腹腔注射无菌猪血清0.5ml/只,每周两次,连续8周,随机处死造模大鼠4只行病理学检查,验证造模成功后,停止注射猪血清,剩余造模组大鼠随机分为纤维化组和CGII干预组.CGII干预组大鼠给予浓度60 mg/mlCGII肌肉注射;正常组和纤维化组均予等单位体质量容积的等渗盐水肌肉注射,每日一次,连续6周.取大鼠肝组织行HE及Masson染色.RT-PCR和免疫组织化学检测肝组织中RGN、PHB mRNA及蛋白质表达. 计量资料采用单因素方差分析,两两比较采用LDS检验,病理学半定量结果采用秩和检验分析. 结果 纤维化组大鼠肝组织RGN、PHB mRNA相对表达量分别为75.99±12.8、64.54±12.35较正常组的182.09±17.84、192.20±17.12明显减低,F值分别为105.646、347.232,P值均＜0.001,差异均有统计学意义;RGN、PHB相对蛋白表达量分别为10.85±2.81、14.5±2.75较正常组的61.08±7.10、55.86±4.23表达均明显降低,F值分别为226.343、525.889,P值均＜ 0.001,差异均有统计学意义.CGII干预后大鼠肝纤维化程度较纤维化组明显减轻（P值均＜ 0.001）,肝组织RGN、PHB的mRNA和蛋白表达均较纤维化组明显增高,差异有统计学意义（P值均＜ 0.001）.结论 RGN及PHB在猪血清所致大鼠肝纤维化肝组织表达降低.
- 刘洋吴君梁跃东陆爽程明亮刘俊英
- 关键词：谷胱甘肽
- 香砂六君子汤加味联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎临床观察
- 2020年
- 目的:观察香砂六君子汤加味联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎(UC)的疗效及对复发率的影响。方法:86例随机分为两组各43例。两组均给予美沙拉嗪治疗,观察组加用香砂六君子汤加味治疗。结果:总有效率观察组高于对照组(P<0.05),腹泻、腹痛、黏液脓血便积分观察组低于对照组(P<0.05),血清TNF-α、IL-1β水平观察组低于对照组(P<0.05),复发率观察组低于对照组(P<0.05)。结论:香砂六君子汤加味联合美沙拉嗪治疗UC疗效较好。
- 刘洋
- 关键词：溃疡性结肠炎香砂六君子汤加味美沙拉嗪
- 复方木鸡颗粒联合替诺福韦治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者的临床研究
- 2019年
- 目的探讨复方木鸡颗粒联合替诺福韦治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者的临床效果,为临床治疗提供参考。方法选取周口市中心医院2016年2月—2018年4月收治的74例代偿期乙型肝炎肝硬化患者作为研究对象,随机分为观察组与对照组,各37例。对照组予以替诺福韦治疗,观察组予以复方木鸡颗粒联合替诺福韦治疗,均治疗6个月。疗程结束后统计两组不良反应发生率及治疗前后肝功能指标[谷氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)]、肝纤维化指标[Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)]水平。结果治疗后,观察组AST、TBil、ALT水平均低于本组治疗前和同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血清LN、PCⅢ、HA水平均低于本组治疗前和同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应总发生率为18.92%,与对照组的10.81%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对代偿期乙型肝炎肝硬化患者联合采用替诺福韦、复方木鸡颗粒治疗,可显著改善患者肝功能及肝纤维化,且安全性高。
- 刘洋
- 关键词：乙型肝炎肝硬化替诺福韦复方木鸡颗粒
- 谷胱甘肽复方注射液对免疫性肝纤维化大鼠肝组织钙调素表达的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨免疫性肝纤维化大鼠肝组织中抗衰老标志蛋白钙调素(RGN)的表达变化,并观察谷胱甘肽复方注射液(CGII)对其的影响。方法应用猪血清腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,适时给予CGII干预。取大鼠肝组织行HE及Masson染色。荧光定量PCR和免疫组化检测肝组织中RGNmRNA及蛋白质表达。计量资料采用单因素方差分析,两两比较采用LDS检验,病理学半定量结果采用秩和检验分析。结果纤维化组大鼠肝组织RGNmRNA相对表达量为82.23±15.21及蛋白表达相对表达量为12.52±3.23,较正常组RGNmRNA(176.39±11.35)及蛋白水平(59.23±9.13)明显降低(P值均<0.01);CGII干预后大鼠肝纤维化程度较纤维化组明显减轻,随着肝纤维化程度减轻,干预组RGNmRNA和蛋白相对表达量分别为168.78±21.31、46.42±4.71与纤维化组及自然恢复组比较表达均增加,差异有统计学意义(P值均<0.01);而自然恢复组大鼠肝组织RGN的mRNA和蛋白相对表达量分别为86.23±17.16、14.34±5.16,均高于模型组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论RGN在猪血清所致大鼠肝纤维化肝组织表达降低,而CGII干预后随着纤维化程度的减轻,RGN的表达增加,提示该蛋白可能在肝纤维化发生发展过程中起重要作用。
- 刘俊英刘洋李涵时朝辉梁祖兰王玲慧张钰赵媛范玉梅吴斌于彦章
- 关键词：免疫性肝纤维化钙调素
