张海洋
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
- 供职机构：大理学院基础医学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金云南省教育厅科学研究基金重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人核呼吸因子2基因真核表达载体的构建与鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的:构建人核呼吸因子2(NRF2-α和NRF2-β)的真核表达载体,并检测其在瞬时转染的人肝癌BEL-7402细胞株的表达水平。方法:根据NCBI数据库中NRF2-α和NRF2-β的基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增目的基因并构建带FLAG标签的真核表达载体,瞬时转染BEL-7402细胞后,分别使用半定量RT-PCR技术和Western blot技术检测其mRNA和蛋白质表达水平。结果:通过酶切鉴定和DNA序列分析,证实已成功构建了人NRF2-α和NRF2-β的真核表达载体,并能在瞬时转染的人肝癌BEL-7402细胞中实现基因的过表达。结论:成功构建了人NRF2-α和NRF2-β的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 张海洋冯慕华徐彤徐优余敏孙宝迪熊伟
- 关键词：真核表达载体
- 人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析被引量：5
- 2015年
- [目的]克隆人线粒体转录终止因子4（mitochondrial transcription termination factor 4,MTERF4）基因cDNA编码区,预测和分析其编码蛋白质的结构与功能。[方法]采用RT-PCR技术扩增人MTERF4基因cDNA的编码序列,采用生物信息学方法对人MTERF4蛋白进行分析。[结果]人MTERF4基因cDNA编码序列为1 146bp,编码一个由381氨基酸组成的亲水性蛋白质,分子量为45.78 k D,理论等电点为9.49。该蛋白N端1-42个氨基酸为前导肽序列,定位于细胞线粒体。其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含4个MTERF基序。三级结构预测结果与二级结构相符。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,人MTERF4蛋白与大鼠、小鼠的MTERF4蛋白具有高度同源性,在系统发育树上聚为一类。[结论]人MTERF4基因cDNA的克隆及编码蛋白质的生物信息学分析为进一步研究其生物学功能奠定了理论依据。
- 熊伟杨勇琴张海洋徐彤张晓娟余敏
- 关键词：CDNA克隆生物信息学
- 沱茶总黄酮的提取及含量测定
- 2015年
- 采用超声波乙醇法从云南沱茶中提取总黄酮类化合物,单因素实验分析乙醇浓度、提取时间和料液比3个因素对沱茶总黄酮得率的影响.结果表明,以乙醇浓度φ=70%、提取时间30 min,料液比(g/m L)1∶30为超声法最佳提取工艺,提取总黄酮得率为5.978 mg/g,平均回收率为99.83%,RSD=0.96%(n=3),旨在为进一步综合开发利用云南沱茶提供参考依据.
- 熊伟张晓娟杨飞杨勇琴张海洋
- 关键词：总黄酮沱茶超声提取比色法
- 人线粒体转录终止因子1(hMTERF1)蛋白的生物信息学分析被引量：13
- 2015年
- 为了预测和分析人线粒体转录终止因子1（human mitochondrial transcription termination factor 1,hMTERF1）蛋白的结构与功能。采用生物信息学的方法对hMTERF1进行系统的分析与研究,包括hMTERF1的理化性质、跨膜区和信号肽、亚细胞定位、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模。结果表明：hMTERF1蛋白分子量为45.78 kD,等电点为9.49,不具有信号肽和跨膜区。该蛋白定位于细胞线粒体,N端1-57个氨基酸为前导肽序列。其二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,包含6个MTERF基序,三级结构显示结果与二级结构预测结果相符。蛋白质多重序列比对和聚类分析显示,hMTERF1蛋白与黑猩猩、大鼠、小鼠等哺乳动物的MTERF1蛋白具有高度同源性,在系统发育树上聚为一簇。hMTERF1的生物信息学分析为进一步探索hMTERF1蛋白的功能提供参考资料和理论依据。
- 熊伟杨勇琴张海洋徐彤左绍远余敏
- 关键词：蛋白质生物信息学
- 哺乳动物细胞线粒体基因组的转录及调控机制研究进展被引量：7
- 2014年
- 目的:系统的归纳和总结近年来哺乳动物线粒体基因组转录及调控机制研究的进展,以期为哺乳动物和人类线粒体疾病及相关医学领域的研究提供参考依据。方法:从哺乳动物线粒体DNA(mtDNA)的结构和转录过程,转录基本元件和转录机制等方面,检索和整理近年来关于哺乳动物细胞线粒体基因组的转录及调控机制的文献并进行总结。结果:线粒体是哺乳动物细胞中普遍存在的具有独立基因组的半自主性细胞器,其主要功能是通过氧化磷酸化为细胞提供ATP,同时对于物质代谢、细胞周期调控、细胞分化和凋亡、细胞信号传递等生理过程发挥着重要作用。近年来对线粒体基因组的转录及其调控机制的研究已取得了一些突破和成果。结论:哺乳动物线粒体基因组的转录与调控机制的研究不仅有助于深入阐明和理解线粒体基因组的表达调控机制,而且也助于揭示临床线粒体病的发病机制。
- 熊伟张海洋杨红娟杜亚曼
- 关键词：线粒体DNA转录调控
