沈尧
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐药性肺腺癌A549细胞能量代谢的初步研究
- 研究目的： 1.阐明耐药性肺腺癌A549细胞的能量代谢状态和主要产能途径。 2.探究靶向上述产能途径对化疗药物抗肿瘤效果的影响。 研究方法： 1.建立肺腺癌耐药细胞系 1.1.利用顺铂浓度递增的方法，诱导亲本肺...
- 沈尧
- 关键词：肺腺癌肿瘤耐药糖酵解化疗药物抗肿瘤效果
- 谷氨酰胺对小细胞肺癌H446细胞增殖和生存的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察谷氨酰胺(Gln)对小细胞肺癌H446细胞增殖和生存的影响,并探究其机制。方法应用CCK-8试剂盒检测Gln(+)组和Gln(-)组H446细胞在0、24、48、72、96 h的增殖情况,筛选出最佳时间,采用Annexin V-FITC/PI双染法、Cell Titer-Glo?发光法和流式细胞仪分别检测这2组细胞的存活比例、三磷酸腺苷(ATP)和活性氧(ROS)水平;以Gln(-)组为对照组,实验组中加入草酰乙酸(OAA)或α-酮戊二酸二甲酯(DM-αKG),检测各组H446细胞的ATP水平、增殖和存活情况;以Gln(-)组为对照组,实验组中加入ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC),检测2组细胞的ROS水平、增殖、克隆和存活情况;在Gln(+)条件下,用0、2、5、10μmol/L谷氨酰胺酶抑制剂BPTES处理H446细胞,通过克隆实验筛选最佳作用浓度,在此浓度下检测Gln(+)组和Gln(+)+BPTES组细胞的ATP、ROS水平和增殖水平。最后,单独应用BPTES或ROS诱导剂过氧化氢(H2O2)和二者联合应用情况下检测细胞的存活比例。结果相比Gln(+)组,Gln(-)组H446细胞的增殖水平在24、48、72、96 h均降低(P<0.05),72 h降低最明显,取72 h为最佳时间;Gln(-)组细胞的存活比例和ATP水平低于Gln(+)组(P<0.05),ROS水平高于Gln(+)组;相比Gln(-)组,Gln(-)+OAA组和Gln(-)+DM-αKG组H446细胞的ATP和增殖未升高,而存活比例升高(P<0.05);相比Gln(-)组,Gln(-)+NAC组ROS水平降低,增殖、克隆水平和存活比例均升高(均P<0.05)。克隆实验结果显示10μmol/L BPTES为最佳浓度;相比Gln(+)组,Gln(+)+BPTES组细胞的ATP和增殖降低(均P<0.05),ROS水平升高;相比单独应用,BPTES+H2O2组H446细胞存活比例明显降低。结论 Gln缺乏可通过提高ROS水平抑制H446细胞的增殖和生存;BPTES和H2O2对H446细胞有联合杀伤作用。
- 徐鹏育李家印苗亚静高翠翠沈尧靳芳仇晓菲
- 关键词：谷氨酰胺腺苷三磷酸细胞增殖细胞存活
