熊璎珞
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖南省高等学校科学研究项目长沙市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人β-actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备
- 2012年
- 为获得分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin蛋白,以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人β-actin蛋白McAb的杂交瘤细胞,命名为2B4。采用间接ELISA和Western blot方法对McAb的特异性、稳定性和适用范围进行鉴定。结果显示:蛋白的相对分子质量为43 kDa,可溶于8 mol/L尿素;杂交瘤细胞上清的抗体效价为1×105,腹水的抗体效价为1×107;间接ELISA结果表明,杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月后,分泌的抗体效价不变;37℃保存24 h后,抗体的效价开始下降。Western blot结果显示,单克隆抗体识别人、鼠、兔和鱼的β-actin蛋白,与其发生特异性反应。2B4分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫学试验,具有良好的应用价值。
- 吴俊文许凤熊璎珞鲁健邱义兰刘胜姿李烨刘如石
- 关键词：原核表达电洗脱单克隆抗体Β-ACTIN
