- 大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体的构建与包装被引量：1
- 2015年
- 目的构建大鼠少突胶质细胞转录因子1(Olig1)的慢病毒表达载体,并进行鉴定和包装。方法采用聚合酶链反应(PCR),分别以大鼠pEGFP-N3-Olig1表达质粒和pDsRed-monomer-N1为模板,扩增获得大鼠Olig1片段和红色荧光蛋白(RFP)片段。将两者进行PCR拼接获得Olig1-RFP片段,并与pLenti6.3-MCS-DEST载体连接,构建获得pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体,并进行酶切鉴定、测序。然后,将其与包装质粒混合后共转染HEK293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒。结果通过酶切鉴定、测序,证明pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体构建成功,且能够被高效地包装为病毒颗粒。结论成功建立大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达系统,为进一步研究Olig1的生物学作用提供了实验基础。
- 席进陈月娟张楠张敬星胡建国吕合作
- 关键词：慢病毒表达载体聚合酶链反应
- 过继回输体外扩增的M2型巨噬细胞促进成年大鼠损伤脊髓损伤的修复
- 马善峰陈月娟张敬星胡建国吕合作
- 关键词：脊髓损伤
- 大鼠PSI-IH脊髓撞击损伤模型的制备被引量：7
- 2016年
- 目的采用PSI-IH脊髓打击器制备不同程度的大鼠脊髓损伤模型。方法取成年雌性SD大鼠15只,随机分为3组,每组5只。采用PSI-IH脊髓打击器建立不同打击力度(80kdyn,120kdyn和160kdyn)的脊髓损伤模型。采用开放场地实验(BBB评分),于术前1d、术后1d、3d、1周及之后的每周分别进行后肢的运动功能评分。在损伤8周后取损伤段脊髓标本,切片、苏木精-伊红染色观察其损伤程度。结果术前所有的动物BBB评分均达21分。术后1d和3d,均为0分。随后,各组动物的运动功能逐渐恢复,至4周后达到平台。80kdyn组评分最高,120kdyn组评分居中,160kdyn组评分最低。苏木精-伊红染色表明80kdyn组脊髓损伤面积比例最小,120kdyn组居中,160kdyn组最大,与各组的BBB评分结果呈反向关系。结论采用PSI-IH脊髓打击器可以成功制备不同程度的大鼠脊髓损伤模型。
- 陈月娟石玲玲谢秀梅张敬星胡建国吕合作
- 关键词：脊髓损伤行为学
- 过继回输体外扩增的M2型巨噬细胞促进成年大鼠损伤脊髓损伤的修复
- 背景:脊髓损伤后,局部活化的小胶质细胞和/或巨噬细胞可分为两个不同的亚群,即经典活化的具有促炎症作用的M1亚群和经替代途径活化的具有抗炎作用M2亚群。脊髓损伤后M1巨噬细胞在局部反应迅速且持续存在,而M2巨噬细胞的出现则...
- 马善峰陈月娟张敬星胡建国吕合作
- 关键词：脊髓损伤
- 文献传递
