余湘萍
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室更多>>
- 发文基金：污染控制与资源化研究国家重点实验室开放基金海洋公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究被引量：5
- 2015年
- 通过简并PCR、TAIL-PCR、SiteFinding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因（包括启动子）序列,将其cDNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS（2,2-azinobis-（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid））为底物测定温度和pH对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60％,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶rLac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·mL-1;酶学性质研究发现,rLac的最适作用温度和pH值分别为55℃和3.0,且在pH 4～10及20 ～ 40℃有较好的稳定性;rLac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.
- 郑邦晓余湘萍叶秀云林娟杨捷
- 关键词：漆酶克隆异源表达酶学性质脱色
