刘咏梅
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 变形假单胞菌精氨酸脱亚胺酶基因序列分析及其表达载体构建被引量：3
- 2008年
- 通过分子克隆手段获得了变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida CGMCC2039)精氨酸脱亚胺酶(arginine deiminase,简称ADI)基因序列,并将扩增的ADI基因片段插入表达载体pET28a中,构建了ADI的重组表达载体。核苷酸序列分析显示该基因开放阅读框为1254bp,编码417个氨基酸。Blast分析显示它与其他假单胞菌属菌种具有很高的同源性。SDS-PAGE结果显示出分子量大小为48.5kDa的明显的蛋白质特异性条带,并具有酶活。该载体的构建为该基因在大肠杆菌中的表达、纯化和抗肿瘤活性研究奠定了基础。
- 李振伟倪晔郑璞刘咏梅徐岩孙志浩
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶表达载体构建
- 假单胞菌发酵制备精氨酸脱亚胺酶被引量：5
- 2008年
- 采用假单胞菌(Pseudomonas sp.)发酵制备精氨酸脱亚胺酶,优化发酵培养基配方及培养条件,以葡萄糖为碳源,酵母膏和蛋白胨为氮源,30℃振荡培养20h时,发酵液中精氨酸脱亚胺酶的酶活力可达2.17u/ml。向HepG2肝癌细胞培养液中加入酶粗品0.5u/ml,对肿瘤细胞的生长抑制率为93.4%。
- 孟繁君刘咏梅孙志浩倪晔郑璞
- 关键词：假单胞菌精氨酸脱亚胺酶发酵肿瘤细胞抑制率
- 蝉拟青霉液体发酵条件优化被引量：4
- 2019年
- 采用液体发酵蝉拟青霉,对蝉拟青霉的发酵条件进行优化,以提高蝉拟青霉胞外多糖产量及生物量。摇瓶发酵条件下,在单因素基础上设计正交实验确定各因素的最佳组合。优化后得最佳发酵培养基:蔗糖8%,牛肉膏0.75%,酵母膏0.125%,MgSO_4·7H_2O 0.3%,KH_2PO_4 0.2%,麸皮0.5%。该条件下胞外多糖产量为5.96 g/L,生物量为42 g/L,较优化前提高了1倍。采用发酵罐进行扩大培养,对分批发酵时的初糖浓度进行了优化,并分析了补料分批发酵对发酵过程的影响。发酵罐培养时最适初糖浓度为5%,此时生物量最高为38 g/L,多糖含量最高为5.5 g/L;采用补料分批发酵时,多糖产量最高为5.89 g/L,生物量最高为40 g/L,效果优于分批发酵。
- 张学秋余晓斌刘咏梅
- 关键词：蝉拟青霉液体发酵胞外多糖
- 一株精氨酸脱亚胺酶产生菌的筛选及鉴定被引量：1
- 2010年
- 精氨酸脱亚胺酶由于具有成为精氨酸营养缺陷型肿瘤如肝细胞瘤,黑素瘤治疗药物的潜力而被国内外多个科研机构进行研究。本文报道本研究室于无锡锡惠公园土样中筛选得到一株产精氨酸脱亚胺酶的菌株901,并对其进行了形态,生理生化特征分析及16S rRNA基因分析,该菌被鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。
- 刘咏梅倪晔孙志浩
- 关键词：恶臭假单胞菌瓜氨酸
- 克鲁维酵母不对称还原制备苯磺酸倍他司汀重要手性中间体
- ＜正＞（S）-（4-氯苯基）-（吡啶-2-基）-甲醇（S-CPMA）是用于合成倍他司汀类药物的重要手性中间体。倍他司汀抗组胺药由于其高效低毒的特性而备受瞩目,用于治疗过敏性鼻炎等过敏性疾病,并对眩晕和不平衡的症状均能有效...
- 倪晔刘咏梅孙志浩
- 关键词：双水相体系倍他司汀
- 文献传递
- 二乙酰一肟-氨基硫脲比色法测定酶转化液中的L-瓜氨酸被引量：23
- 2007年
- 用二乙酰一肟-氨基硫脲比色法测定酶转化液中的L-瓜氨酸含量,并研究了测定波长、氨基硫脲用量、铁离子等因素的影响。线性范围为0.1～20mg/L(r=0.999),回收率99.8%。
- 钱嘉南孙志浩刘宇鹏孟繁君刘咏梅
- 关键词：氨基硫脲比色法
- 精氨酸脱亚胺酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化被引量：3
- 2011年
- 通过PCR扩增得到菌株编码ADI的arcA基因,并构建表达载体pET24a-ADI。将该载体导入大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达ADI基因的重组菌。对ADI诱导表达条件进行优化,结果发现宿主菌在A600达到1.0时加入0.2 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),在30℃诱导4 h酶活最高,为2.04 U/mL发酵液。经超声波破碎、HiPrep DEAE FF阴离子交换层析、SuperdexTM200凝胶过滤层析,可获得SDS-PAGE电泳纯重组精氨酸脱亚胺酶(rADI)。rADI相对分子质量大小为92 600,由两个相同亚基组成,纯化后的rADI比酶活达20.9 U/mg。
- 刘咏梅倪晔李娜李利峰孙志浩
- 关键词：精氨酸脱亚胺酶克隆纯化
