左艳
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：陕西中医药大学更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Sirt3过表达载体的构建及表达
- 2016年
- 目的:在HEK293细胞中获得Sirt3全长基因,构建其高效真核表达载体。方法:提取人HEK293细胞总RNA,反转录合成c DNA,以特异性引物扩增Sirt3全长基因并克隆入pc DNA3.1载体,筛选阳性克隆进行序列测定后,鉴定其表达情况。结果:PCR扩增得到特异性的约1000 bp的片段,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致;将构建的pc DNA3.1-Sirt3质粒转入AGS和SGC-7901细胞,检测到Sirt3的m RNA和蛋白表达水平均提高。结论:构建获得Sirt3基因高效真核表达载体,将用于Sirt3的功能研究。
- 曲璇张芮李军左艳万文涛马晓军袁银娜韩洛川史海龙申亮亮
- 关键词：基因扩增真核表达载体
- Skp2过表达载体的构建及表达被引量：1
- 2016年
- 目的:在HEK293细胞中获得Skp2全长基因,构建其高效真核表达载体。方法:提取人HEK293细胞总RNA,反转录合成c DNA,以特异性引物扩增Skp2全长基因并克隆入p Babe载体,筛选阳性克隆进行序列测定后,鉴定其表达情况。结果:PCR扩增得到特异性的约1300 bp的片段,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致;将构建的p Babe-Skp2质粒转入HEK293细胞,与空质粒对照相比,Skp2的m RNA和蛋白表达水平均提高,并且p27蛋白水平降低。结论:构建获得Skp2基因高效真核表达载体,将用于Skp2的功能研究。
- 曲璇张芮李军左艳万文涛马晓军袁银娜韩洛川史海龙申亮亮
- 关键词：SKP2基因扩增真核表达载体
