徐摇光
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 供职机构：北京市农林科学院农业生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市农林科学院青年基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- DHA合成途径中关键酶基因在毕赤酵母中的表达研究
- 2015年
- DHA(二十二碳六烯酸)是人体所需的一种非常重要的多不饱和脂肪酸,主要存在于深海鱼类和海洋微藻类生物中。由于高等植物自身不能合成DHA,因此通过基因工程方法在作物(如玉米)中表达DHA,将会成为最健康的DHA来源,同时也能够减轻人类对海洋资源的破坏。从深海藻类中挑选了5个DHA合成途径中的关键酶基因,分别是Δ4脱饱和酶基因(D4)、Δ5脱饱和酶基因(D5)、Δ6脱饱和酶基因(D6)、C18延长酶基因(E18)和C20延长酶基因(E20)。密码子优化并合成这5个基因,为确定优化后的核苷酸序列是否能在真核生物中正确表达,以p PIC9K为基础载体连入目的基因转化到毕赤酵母GS115(His4+MUts)中进行表达分析。结果表明,这些基因在甲醇诱导96 h后蛋白表达量最大,Western Blot结果表明表达产物为目的蛋白。该结果为进一步培育能够自身合成DHA的作物奠定了基础。
- 李松岩徐摇光张晓东
- 关键词：DHA脂肪酸脱饱和酶毕赤酵母
- 植物化学诱导基因表达系统研究进展被引量：2
- 2013年
- 随着植物基因工程的发展,植物的化学诱导表达系统受到越来越多的重视。化学诱导表达系统通常包含两个元件,第一个元件多为一个嵌合的转录因子,可以特异性的结合到启动子上;第二个元件具有前面的转录因子的结合位点,从而控制目的基因的表达。本文综述了当前广泛应用的一元诱导基因表达系统,如四环素诱导表达系统,和二元诱导表达系统,包括:乙醇诱导、地塞米松诱导、β2雌激素诱导和热休克诱导等不同系统,总结了各化学诱导表达系统的最新研究进展及其潜在利用的可行性。
- 马延娜薛静徐摇光张晓东
- 关键词：化学诱导
- 利用微滴数字PCR方法快速分析转基因玉米中外源基因的拷贝数被引量：18
- 2016年
- 以玉米自交系501幼胚为受体材料,首先将来自球形节杆菌的EPSPS基因（G23V）按玉米密码子偏爱性进行优化与人工合成,并且将其克隆到表达载体pBAC9200中;然后利用农杆菌介导法将质粒载体转入玉米自交系501的幼胚中。经过愈伤诱导、草甘膦抗性筛选和分化培养最终获得14株转化再生植株。经PCR、RT-PCR检测表明,其中5株目的基因G23V-EPSPS稳定整合且在转录水平获得表达。随后,利用微滴数字PCR技术对外源基因拷贝数进行了检测分析,分析结果表明在5株阳性转基因植株中,外源基因G23V-EPSPS拷贝数分别为0.12、1.0、0.9、1.89和0.66,介于0~2之间。成功建立了草甘膦抗性基因G23V-EPSPS在玉米中的遗传转化体系,为以新型高抗草甘膦G23V-EPSPS基因作为转基因玉米筛选标记基因奠定了基础;而且以微滴数字PCR技术代替传统的Southern Blot简便快速的完成外源基因拷贝数的分析,为微滴数字PCR技术在转基因外源基因拷贝数检测上的广泛应用做了初步的探索。
- 姜志军江颖徐摇光张立全张晓东
- 关键词：转基因玉米抗草甘膦
