曹芳琦
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：上海市公安局更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：政治法律医药卫生电子电信更多>>
- “卡痛”中主要活性成分的GC/MS分析被引量：1
- 2020年
- 目的:通过GC/MS法定性检验"卡痛"中主要活性成分(O-去甲基曲马多、帽柱木碱、钩藤碱),同时通过GC/MS法定量检测了检材中的O-去甲基曲马多。方法:检材以SKF525A为内标,加碱后用乙酸乙酯提取,离心后取有机层,用GC/MS方法进行定性定量分析。结果:检材中O-去甲基曲马多浓度为24.5mg/ml,其线性关系良好(r^2=0.999 3),检测限为0.1μg/ml,回收率为99.6%~105.2%(n=5),日内和日间精密度均小于6.41%。结论:建立的GC/MS法测定"卡痛"中活性成分的定量分析方法简便、实用、准确。
- 刘缙肖锦龙蔡红新于雷何鹏翔张慧曹芳琦
- 关键词：法医毒物分析气相色谱质谱法
- SELEX技术筛选甲基苯丙胺适配子被引量：2
- 2014年
- 目的利用SELEX筛选甲基苯丙胺适配子,并初步鉴定获得甲基苯丙胺的适配子。方法体外合成全长为76 bp的随机ssDNA文库,以甲基苯丙胺完全抗原偶联到溴化氰活化琼脂糖上,作为固相靶分子对随机ssDNA文库进行SELEX筛选。利用SPR测定适配子和甲基苯丙胺的结合率和特异性,通过MFOLD分析软件对适配子进行二级结构预测和结合位点分析。结果经过10轮筛选后,甲基苯丙胺适配子的结合率由88.3 RU上升到113.7 RU,表明特异性适配子得到逐步富集。获得的适配子进行测序,得10个序列,二级结构均为茎-环结构,可能是适配子和甲基苯丙胺结合的结构基础。结论本研究使用SELEX技术筛选小分子毒品甲基苯丙胺适配子的方法,获得与甲基苯丙胺特异性结合的适配子序列,揭示了适配子与甲基苯丙胺结合的基本结构,为制备特异性甲基苯丙胺检测试剂盒奠定了基础。
- 陆鑫蔚胡小龙张玉荣孙美琪孙美琪曹芳琦黄琴蓉
- 关键词：甲基苯丙胺适配子SELEXSPR
- 特异性可卡因核酸适体测试条的研制被引量：2
- 2014年
- 目的筛选识别可卡因的特异性核酸适体,制备可卡因核酸适体测试条(盒)。方法通过SELEX技术筛选可卡因核酸适体,制备胶体金标记可卡因完全抗原(COC-BSA),制作可卡因层析测试条,并对方法特异性、灵敏度、准确性等性能指标进行考察和验证。结果甲基苯丙胺等64种药品和毒品采用本文研制的可卡因测试条检测,结果均为阴性,无交叉反应;检测可卡因最低浓度在5ng/mL,比胶体金单克隆抗体方法检测高5倍;将测试条密封45℃烘烤1个月后,检测结果与未烘烤过的测试条检测结果一致;与GC/MS检测结果对照,准确性为100%。结论本文研制的可卡因核酸适体检测试条,性能稳定,特异性良好,灵敏性和准确性均可达到实际检测的要求,在毒品、毒物的检测中具有广阔的应用前景。
- 曾立波胡小龙张玉荣丁国荣张润生朱凯梁晨曹芳琦
- 关键词：法医毒物分析核酸适体可卡因胶体金单克隆抗体
- 定量检测毒品的蛋白芯片的研发被引量：3
- 2012年
- 目的利用蛋白芯片技术建立一种快速、高通量的毒品定量检测方法。方法采用硝酸纤维膜作为蛋白芯片的基片,将多种毒品和蛋白偶联物抗原包被在芯片基片上后封闭,不同毒品的单克隆抗体与之结合,再用荧光染料Cy5标记的二抗孵育,样本中如果含有毒品成分,将会与包被的毒品偶联物竞争性地与毒品的抗体相结合,导致最终的荧光信号发生改变,荧光信号的变化与样品中的毒品的浓度相关。通过荧光芯片检测仪CCD可以进行定量分析,最终判断样本中毒品的含量。结果对506例样本进行定性定量检测,与GC-MS仪器比较后总相关性在88%以上,芯片的检测灵敏度比胶体金方法提高10倍,其检测的特异性达到99%。结论蛋白芯片是一种有效、准确的高通量检测毒品含量的方法。
- 曾立波陈连康胡小龙陈复华丁国荣张玉荣张润生梁晨曹芳琦
- 关键词：吗啡甲基苯丙胺蛋白芯片免疫检测
- 新型策划毒品4-甲基-N-乙基卡西酮的检测方法
- 将送检的可疑未知样品采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术进行检测,并结合美国禁毒署的谱库信息检索比对,确定样品中含有4-甲基-N-乙基卡西酮(又称4-MEC)的成分,属于合成卡西酮类新...
- 曹芳琦李茂盛郑水庆陈永生张润生糜忠良杨泽强刘文斌
- 关键词：FTIR
- 文献传递
- 胶体金标记单克隆抗体检测可卡因及其代谢物试剂盒
- 目的：采用胶体金免疫层析的原理,建立一种可以在现场快速检测可卡因及其代谢物苯甲酰爱康宁的方法.方法：将胶体金标记的抗可卡因单克隆抗体均匀浸涂在玻璃纤维膜上,用点膜仪将可卡因的完全抗原以及羊抗鼠多抗在硝酸纤维素膜上划线,分...
- 曾立波陈连康胡小龙张玉荣曹芳琦张润生梁晨王威
- 关键词：司法鉴定可卡因胶体金标记单克隆抗体
- 文献传递
- 巴比妥单克隆抗体制备及其免疫学特性鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的建立抗巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗巴比妥单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法将巴比妥分子环状丙二酰脲环上氨基引入活性羧基,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到完全抗原BAR-KLH和BAR-BSA,并用紫外分光光度计鉴定。用BAR-KLH免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立稳定分泌抗巴比妥单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备巴比妥单克隆抗体,饱和硫酸铵法、亲和层析法纯化,并进行免疫学特性鉴定。结果完全抗原偶联成功,其偶联率为30∶1;筛选出1株杂交瘤细胞命名为5C6,其产生的单抗效价为1∶6.4×104,属于IgG1/kappa,抗体亲和力常数为2.27×108L/moL。纯化后的巴比妥单克隆抗体用ELISA法检测其灵敏度为130ng/mL,并与其他7种镇静催眠类药物交叉反应率小于1%。结论本研究制备的杂交瘤细胞株5C6分泌的抗体具有高特异性和灵敏度。
- 胡刚陈连康胡小龙陈复华胡晶英曹芳琦曾立波
- 关键词：法医毒物分析巴比妥半抗原单克隆抗体免疫学特性
- 胶体金法吗啡-甲基苯丙胺二合一免疫层析试剂盒的研制
- 目的:建立一种快速、简便且同时检测吗啡和甲基苯丙胺的方法。方法:分别将胶体金标记的抗吗啡和甲基苯丙胺单克隆抗体均匀浸没在玻璃纤维膜上,用点膜仪将吗啡和甲基苯丙胺的完全抗原以及羊抗鼠多克隆抗体喷涂在硝酸纤维素膜上,分别作为...
- 曾立波陈连康胡小龙张玉荣张润生曹芳琦骆华
- 关键词：吗啡甲基苯丙胺胶体金
- 文献传递
- 高特异性三唑仑代谢物单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的建立分泌抗三唑仑代谢物α-羟基三唑仑单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的三唑仑代谢物单克隆抗体,为三唑仑及其代谢物免疫分析方法的开发奠定基础。方法在三唑仑分子的6位苯环对位上引入活性氨基基团,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)相偶联形成完全抗原。以三唑仑-KLH免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术建立稳定的分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。纯化后的单克隆抗体,分别用SDS-PAGE电泳法、间接ELISA法和胶体金免疫层析法对其纯度、效价及灵敏度和特异性进行测定。结果获得3株能稳定分泌三唑仑代谢物单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2G4,4B2和5H6。2G4和4B2抗体只与三唑仑代谢物α-羟基三唑仑有反应,灵敏度分别为500ng/mL和750ng/mL。与其他参试物无交叉反应。因5H6抗体为IgM,考虑到纯化难度和实际应用的限制,暂未做深入研究。结论本研究制备的2G4和4B2单克隆抗体仅识别三唑仑代谢物α-羟基三唑仑,具有高度特异性和灵敏度。
- 黄琴蓉陈连康胡小龙陈复华胡晶英曹芳琦曾立波
- 关键词：法医毒物分析三唑仑Α-羟基三唑仑单克隆抗体免疫学特性
