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大鼠巨噬细胞α7-乙酰胆碱受体介导的抗炎通路对内毒素所致炎症反应的作用及机制被引量：1: 2015年; 目的：探讨大鼠巨噬细胞α7-乙酰胆碱受体（α7-AChR ）介导的胆碱能抗炎通路在内毒素所致炎症反应中的作用及机制。方法采用密度梯度离心的方法原代分离培养大鼠巨噬细胞，经流式细胞仪对细胞纯度进行鉴定。采用荧光共聚焦显微镜和蛋白质免疫印迹试验（ Western blot ）鉴定大鼠巨噬细胞α7-AChR的表达特征。烟碱预处理原代分离培养的大鼠巨噬细胞后给予内毒素脂多糖（LPS）刺激，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定上清液中肿瘤坏死因子（TNF）-α的浓度变化。 Western blot检测原代培养巨噬细胞中p-NF-κB蛋白表达。采用方差分析比较不同浓度烟碱下TNF-α的水平差异。结果荧光共聚焦显微镜下观察到原代分离培养大鼠巨噬细胞膜上存在α7-AChR。给予烟碱预处理能显著降低LPS刺激后巨噬细胞培养上清中TNF-α浓度，在烟碱浓度为0、1、10、100μmol／L 时， TNF-α的浓度分别为（2123±86）、（1486±80）、（1316±83）和（1090±77） pg／mL，随着烟碱浓度的增加，TNF-α释放量减少（t＝16．33、20．18和26．83，P＜0．05）。同时，不同浓度的烟碱预处理后，巨噬细胞内的p-NF-κB水平明显下降。结论激活大鼠巨噬细胞α7-AChR可以抑制内毒素诱导的炎症因子TNF-α的释放，其作用机制为通过NF-κB信号通路抑制炎症反应。; 周舟陈小梅李富强唐翠兰; 关键词：巨噬细胞内毒素类烟碱

α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝脏炎症的影响研究被引量：4: 2016年; 目的探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7n AChR)基因敲除对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏炎症的影响。方法 2014年6月—2015年5月,选取40只SPF级雄性6周龄C57BL/6J小鼠和40只SPF级雄性6周龄α7n AChR基因敲除小鼠,采用随机数字表法分为C57普通饲料组、C57高脂高糖组、基因敲除普通饲料组、基因敲除高脂高糖组,每组20只。C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予普通饲料喂养,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予高脂饲料喂养同时饮用20%果糖饮用水,喂养24周,建立NASH小鼠模型;小鼠饲养期间定期称量体质量,并且尾静脉取血检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平。21周时C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠给予400μg/kg烟碱腹腔注射;C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组小鼠给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,均1次/d,共3周。24周后处死小鼠,眼球取血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清炎性细胞因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,观察小鼠肝脏外观变化及肝脏湿重,肝脏病理切片染色观察炎症程度和脂肪变性情况。结果第12、15、18、21、24周时,C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高(P<0.05);第12、15、18、21、24周时,基因敲除高脂高糖组小鼠体质量较C57高脂高糖组升高(P<0.05)。C57高脂高糖组、基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST、TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57普通饲料组、基因敲除普通饲料组升高(P<0.05);基因敲除高脂高糖组小鼠第8、16、24周时血清ALT、AST水平,第16、24周时血清TG、TC水平,第24周时血清IL-6、TNF-α水平、肝脏湿重较C57高脂高糖组升高(P<0.05)。病理切片苏木素-伊红(HE)、油红染色结果显示:; 李富强吴小翠徐丽娜陈小梅唐翠兰; 关键词：非酒精性脂肪性肝炎基因敲除技术 Α7烟碱型乙酰胆碱受体细胞因子类炎症

非酒精性脂肪性肝病的诊断学进展被引量：5: 2016年; 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一组和肥胖、代谢综合征密切相关的疾病，主要以弥漫性肝细胞大泡性脂肪性变为主的病理改变。NAFLD在发达国家发病率达50％。近年来，我国NAFLD的发病率亦呈逐年上升趋势。NAFLD分为单纯性脂肪肝（NAFL）和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。; 吴小翠李富强唐翠兰; 关键词：非酒精性脂肪性肝病诊断学非酒精性脂肪性肝炎 NAFLD 单纯性脂肪肝病理改变

α7nAChR基因敲除小鼠的饲养繁育及基因型鉴定被引量：1: 2015年; 目的:繁殖和鉴定烟碱型乙酰胆碱受体α7基因敲除小鼠。方法:将引进的α7n AChR基因敲除杂合子小鼠进行饲养并繁殖,提取子代小鼠尾部DNA,用PCR方法检测子代小鼠基因型;采用Western blot检测α7n AChR蛋白质的表达,进一步证实PCR鉴定方法的可靠性。结果:获得子代(α7n AChR+/+),子代小鼠纯合率为30%。结论:α7n AChR基因敲除小鼠的繁育和鉴定均获得成功,为进一步研究α7n AChR缺失对非酒精性脂肪性肝炎的影响提供了理想的动物模型。; 李富强吴小翠陈小梅唐翠兰; 关键词：基因敲除小鼠非酒精性脂肪性肝炎

α7nAChR基因敲除对NASH炎症反应的作用及其机制: 目的:在前期研究的基础上购买基因敲除杂合子小鼠,繁殖并且鉴定其子代小鼠的基因型;通过建立 α 7 烟碱型乙酰胆碱能受体（alpha7 nicotinic acetylcholine recepto,α 7nAChR）基因...; 李富强; 关键词：KUPFFER细胞 NASH 烟碱基因敲除; 文献传递

尼古丁减轻高脂高果糖诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠的肝脏炎症被引量：2: 2016年; 目的:探讨活化胆碱能抗炎通路对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)模型小鼠肝脏炎症的抑制作用及其分子机制。方法:60只雄性6周龄的无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6J小鼠被随机分为4组:正常饮食小鼠生理盐水注射组、正常饮食小鼠尼古丁注射组、NASH模型小鼠生理盐水注射组和NASH模型小鼠尼古丁注射组,分别给予普通饮食及高脂饮食加高果糖饮水,喂养17周后建立NASH小鼠模型,然后予各组小鼠生理盐水或尼古丁腹腔注射,每天1次,注射量为400μg/kg,注射3周。3周后处死动物进行肝组织病理检查,取小鼠血清行酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),同时原代分离培养肝巨噬细胞,使用Western blot和荧光共聚焦显微镜检测α7尼古丁型乙酰胆碱能受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptors,α7n AChR)、Toll样受体-4(Toll-like receptors-4,TLR-4)和磷酸化核转录因子-κB(nuclear factorκB of phosphorylation,p-NF-κB)的蛋白水平。结果:成功建立了NASH小鼠模型。给予小鼠尼古丁治疗后,小鼠肝组织病理结果显示,小鼠肝脏炎症和脂肪变性明显减轻;ELISA结果显示,小鼠血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平下降;Western blot和荧光共聚焦显微镜结果显示,尼古丁治疗组小鼠α7n AChR蛋白水平上调,p-NF-κB水平下调。结论:活化胆碱能抗炎通路可以通过抑制NF-κB通路减轻NASH小鼠的肝脏炎症。; 陈小梅李富强严速吴小翠唐翠兰; 关键词：尼古丁炎症介导素类小鼠

活化胆碱能抗炎通路对非酒精性脂肪性肝炎炎症反应的抑制作用及其机制被引量：14: 2015年; 目的探讨活化胆碱能抗炎通路对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）炎症反应的抑制作用及其机制. 方法建立高脂高糖饮食诱导的NASH小鼠模型,在正常小鼠和NASH小鼠给予烟碱活化胆碱能抗炎通路,通过肝脏病理切片和细胞因子水平观察肝脏炎症情况;体外培养肝脏巨噬细胞系Raw264.7细胞,给予脂多糖处理后加入不同浓度的烟碱,观察细胞上清液中细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）α的水平,通过Western blot观察烟碱对信号通路NF-κB和IκB的影响.多组间比较采用单因素方差分析. 结果通过肝脏病理检查和肝功能生物化学指标检测确定造模成功.NASH小鼠给予烟碱激活胆碱能抗炎通路后,肝组织炎症程度下降;血清中TNFα水平,烟碱治疗组[（21.95±0.8）pg/ml]较等渗盐水组[（38.07±1.7） pg/ml]显著下降（P＜0.05）.Raw264.7细胞给予脂多糖处理后加入不同浓度的烟碱后检测上清液中TNFα水平,发现加入5 mmol/L以上浓度烟碱后能明显降低脂多糖引起的TNFα增高（P＜0.05）.内毒素刺激后RAw264.7细胞内p-NF-κB水平增加,I-κB水平降低,表明NF-κB通路激活,不同剂量的烟碱能明显下调p-NF-κB水平,升高I-κB水平,并表现出剂量依赖. 结论活化胆碱能抗炎通路对NASH炎症反应有抑制作用,其作用机制可能为通过NF-κB信号通路抑制炎症反应.; 周舟陈小梅李富强唐翠兰; 关键词：枯否细胞胆碱能激动剂肝炎脂肪性非酒精性

PEG—IFNa-2a联合ETV治疗慢性乙型肝炎的META分析被引量：1: 2016年; 目的通过Meta分析评价聚乙二醇干扰素（PEG—IFNa-2a）和恩替卡韦（ETV）对中NHBeAg阳性慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者的疗效。方法计算机检索MEDLlNE和3个主要的中文数据库。由两名评价员对纳入的有关PEG—IFNa-2a联合ETV，ETV和PEG-IFNa-2a治疗中国HBeAg阳性CHB患者的随机对照试验独立进行评价。结果9个随机对照试验符合最终的纳入条件。Meta分析结果显示：在中国HBeAg阳性CHB患者中，PEG-IFNa-2a联合ETV组的丙氨酸转氨酶（ALT）复常率、HBVDNA阴转率、HBeAg血清转换率、HBeAg血浆清除率明显优于ETV组和PEG-IFNa-2a组，差异有统计学意义（P〈0．05），但总体的HBeAg血清转换率和HBeAg血浆清除率较低。结论PEG-IFNa-2a联合ETV组对中国HBeAg阳性cHB患者疗效较ETV组、PEG-IFNa-2a组显著，可作为治疗中国HBeAg阳性CHB的优先选择。; 吴小翠李富强徐丽娜唐翠兰; 关键词：聚乙二醇干扰素 META分析 HBEAG阳性慢性乙型病毒性肝炎

HBV感染者中医证型与扶正化瘀法、补肾健脾法治疗研究: 唐翠兰倪伟周舟陈小梅吴小翠茹清静李富强; 项目主要技术内容：HBV携带者尽管无明显症状和体征，但部分发生了慢性肝炎、肝硬化等；因此，对本病进行早期积极的治疗具有十分重要的意义。西医对慢性HBV携带者没有特效药物，建议做肝组织学检查，但开展肝活检的难度较大。该研究...; 关键词：; 关键词：肝纤维化治疗肝组织学检查中药防治

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李富强

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