- 禽致病性大肠杆菌O2株跨膜输出蛋白基因组文库的构建与分析
- 2016年
- 为构建禽致病性大肠杆菌(APEC)跨膜输出蛋白基因组文库,本研究以APEC O2菌株基因组DNA为模板,采用基因随机片段PCR方法扩增,纯化约250 bp^500 bp的片段构建APEC O2菌株跨膜输出蛋白基因组文库。共获得约1.8×10~5个克隆容量的基因组文库,经氨苄/卡那/阿拉伯糖平板筛选到318个克隆。ORF及Signal P分析显示318个克隆插入片段均含有信号肽序列,其中,78个克隆预测为膜蛋白;启动子分析显示144个克隆含有完整启动子,除去29个能自主表达的克隆,推测其余115个克隆的启动子在实验培养条件下沉默,可能需要特殊条件诱导才能表达;GO功能分析克隆插入片段所对应全长基因的ORF显示,其参与的生物过程主要集中于定位、转运;从分子功能角度分析,其主要集中于催化和结合;从细胞组成角度分析,其主要集中于细胞膜、周间质、外膜等与外壳相关的结构中。本实验将为进一步研究APEC的致病性机理奠定基础。
- 李永霞谭双刘蕾赵俊皓刘金泽王明晓胡永浩余旭平
- 关键词：大肠杆菌基因文库克隆分析
- 鞭毛二级调控基因fliA或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用
- 本发明公开了鞭毛二级调控基因fliA或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用。本发明研究发现，将沙门氏菌或大肠杆菌的鞭毛二级调控基因fliA在大肠杆菌中进行过表达，能够致死大肠杆菌，也即该鞭毛二级调控基因fliA表达的...
- 余旭平王明晓余子豪刘金泽李统战张远星李倩文刘蕾刘云惠相国李永霞
- 文献传递
- 鞭毛主调控基因flhDC或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用
- 本发明公开了鞭毛主调控基因flhDC或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用。本发明研究发现，将沙门氏菌或大肠杆菌的鞭毛主调控基因flhDC在大肠杆菌中进行过表达，能够致死大肠杆菌，也即该鞭毛主调控基因flhDC表达的...
- 余旭平王明晓余子豪刘金泽李统战张远星李倩文刘蕾刘云惠相国李永霞
- 文献传递
- 一种lacZ报告基因T载体的构建及其在沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达活性测定中的应用被引量：4
- 2017年
- 为研究5'-非翻译区(UTR)对沙门氏菌鞭毛主调控基因flhDC表达的影响,本研究以鼠伤寒沙门氏菌542(STM542)基因组DNA为模板,扩增含不同长度5'-UTR的flhDC全长基因(共5种),并将其克隆至含阿拉伯糖启动子的质粒PBAD33中。通过测定含阿拉伯糖的半固体平板上包含不同长度flhDC基因的重组大肠杆菌菌落的直径,初步评估不同5'-UTR调控序列对flhDC基因表达的影响。为精确测定不同调控序列的活性差异,本实验室进一步构建了以lacZ为报告基因的T载体,并将扩增的对应于前4种flhDC基因调控序列片段克隆于构建的T载体,通过测定其β-半乳糖苷酶活性获得相应调控序列的活性参数。结果显示,在阿拉伯糖诱导下,对应于1572bp的flhDC基因片段的调控序列活性最低,对应于1201bp的flhDC基因片段的调控序列活性最高,本实验为进一步研究flhDC基因的调控功能奠定基础。
- 刘蕾李永霞刘金泽王明晓余旭平
- 关键词：鞭毛T载体
- 鞭毛主调控基因flhDC或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用
- 本发明公开了鞭毛主调控基因flhDC或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用。本发明研究发现，将沙门氏菌或大肠杆菌的鞭毛主调控基因flhDC在大肠杆菌中进行过表达，能够致死大肠杆菌，也即该鞭毛主调控基因flhDC表达的...
- 余旭平王明晓余子豪刘金泽李统战张远星李倩文刘蕾刘云惠相国李永霞
- 一种启动子
- 本发明公开了一种启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明启动子来源于鼠伤寒沙门氏菌STM542，为鞭毛的主调控基因flhDC的启动子，该启动子能被用于在大肠杆菌等宿主细胞中启动外源基因的表达。
- 余旭平李永霞刘金泽刘蕾胡永浩王明晓
- 文献传递
- 鞭毛二级调控基因fliA或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用
- 本发明公开了鞭毛二级调控基因fliA或其表达产物作为靶点在抗菌药物开发中的应用。本发明研究发现，将沙门氏菌或大肠杆菌的鞭毛二级调控基因fliA在大肠杆菌中进行过表达，能够致死大肠杆菌，也即该鞭毛二级调控基因fliA表达的...
- 余旭平王明晓余子豪刘金泽李统战张远星李倩文刘蕾刘云惠相国李永霞
