王微娜
- 作品数:13 被引量:12H指数:2
- 供职机构:河南大学更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 海岛棉单萜合酶基因克隆及其受黄萎病诱导的表达分析被引量:6
- 2016年
- 【目的】克隆海岛棉品种新海15中单萜合成酶基因(Gb TPS),研究其受黄萎病诱导的表达情况,为进一步研究该基因在棉花抗黄萎病中的功能打下基础。【方法】克隆Gb TPS基因的开放阅读框(ORF)全长序列,对其蛋白序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR及病毒诱导的基因沉默对其抗病性进行分析。【结果】通过PCR扩增得到一个全长为1761 bp的ORF序列,命名为Gb TPS(Gen Bank登录号:KP247548)。生物信息学分析发现,该基因编码586个氨基酸,预测分子量为67.7 k D,等电点为5.79。系统进化树分析结果表明,Gb TPS属于Tps-g亚家族。Gb TPS基因经黄萎病菌诱导后,表达量在4~24 h内显著(P〈0.05)或极显著(P〈0.01)高于空白对照组。病毒诱导的基因沉默受黄萎病诱导后其病情指数为52.38,与对照组相比并无明显差异。【结论】Gb TPS基因仅在棉花抗黄萎病的早期发挥积极作用。
- 杨璨孙全王微娜耿帅鹏江怀仲蔡应繁
- 关键词:棉花黄萎病实时荧光定量PCR
- 茎瘤芥根和茎组织转录组比较分析被引量:3
- 2013年
- 茎瘤芥是十字花科芸薹属植物的变种.本研究在前期的转录组测序和数字基因表达谱(DGE)测序的基础上进一步对榨菜的根组织进行了测序和分析.通过高通量RNA-Seq测序我们获得了高质量的数字基因表达谱数据超过一千万条,其中有约71%能比对到参考基因序列上.我们将根组织的数字基因表达谱数据与榨菜瘤茎膨大过程中的3个时期的数字基因表达谱数据进行了比较,获得了共有的(3组差异表达基因的交集)差异表达基因共3594个,对这些差异表达基因的表达趋势可以分为8个簇.同时对这些差异基因进行代谢途径的功能注释,发现这些差异表达基因除了在光合作用相关的途径外,主要分布在细胞壁的合成、降解以及二级代谢如类黄酮代谢等途径方面.通过对榨菜根组织的转录组测序,我们筛选得到了部分榨菜根与茎的差异表达基因,这些基因可能与榨菜的瘤茎膨大有关.
- 孙全蔡应繁何晓红曾鑫江怀仲王微娜
- 关键词:茎瘤芥转录组测序差异表达分析
- 棉花GbDREB基因在抗黄萎病中的应用
- 本申请属于基因棉花抗性育种技术领域,具体涉及棉花<I>GbDREB</I>基因在棉花抗黄萎病中的应用的专利申请。所述<I>GbDREB</I>基因,该基因属于DREB类A4成员,属海岛棉中AP2家族成员;该基因在棉花的根...
- 蔡应繁刘鑫龙璐孙全王微娜张骁
- 文献传递
- 海岛棉GbNAC1在抗黄萎病中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及到海岛棉<I>GbNAC1</I>基因在抗黄萎病方面的应用专利申请。所述<I>GbNAC1</I>基因,GenBank ID:KP317496,与植物的黄萎病抗性相关。发明人发现在植物...
- 蔡应繁王微娜杨璨耿帅鹏孙全张骁宋纯鹏
- 文献传递
- 一个棉花锌结合蛋白质(ZnBP)基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2012年
- 为了解棉花锌结合蛋白的理化性质及结构特征,从已构建完成的棉花(湘棉18)腺体形成时期的cD-NA均一化文库中筛选出1个棉花锌结合蛋白质(Zinc binding protein,ZnBP)基因的全长cDNA序列。经过克隆、测序及序列分析,发现该片段包含1个完整开放阅读框,长654个碱基,编码217个氨基酸,蛋白质分子量为2.46×104,等电点为9.33。以湘棉18叶片DNA为模板,通过PCR扩增分离获得棉花ZnBP基因。经测序拼接,得到1 731 bp的棉花gDNA片段,编码区含有3个内含子。利用pET-28a(+)载体,开展了该基因的原核表达研究,在37℃、异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)终浓度1 mmol/L、诱导时间8 h和转速150 r/min条件下,实现最优表达;SDS-PAGE凝胶电泳及Western blotting检测分析结果表明,蛋白表达正确。
- 岳显可蔡应繁刘毅王微娜杨玲周翠平
- 关键词:棉花腺体原核表达BLOTTING
- 海岛棉GbNAC1在抗黄萎病中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及到海岛棉<I>GbNAC1</I>基因在抗黄萎病方面的应用专利申请。所述<I>GbNAC1</I>基因,GenBank ID:KP317496,与植物的黄萎病抗性相关。发明人发现在植物...
- 蔡应繁王微娜杨璨耿帅鹏孙全张骁宋纯鹏
- 茎瘤芥PHYA基因与茎瘤芥茎膨大关系的初步研究被引量:1
- 2013年
- 从茎瘤芥基因组中克隆了全长PHYA基因,构建了植物超表达载体,通过农杆菌GV3101转化茎瘤芥——永安小叶,得到PCR反应呈阳性的转基因株系。结果发现,在自然生长环境下,转基因植株发生了多种形态变异,如植株矮化、花期提前、叶片变大且色泽浓绿、转基因植株茎膨大延缓等。初步推断PHYA基因参与调控茎瘤芥植物茎膨大过程,过量表达PHYA基因可能会抑制茎膨大过程。
- 毕晶磊朱利泉孙全王微娜向浏欣何晓红江怀仲
- 关键词:茎瘤芥超表达
- 棉花细胞色素P450 CYP94C1基因在抗黄萎病中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及棉花细胞色素P450 <I>CYP94C1</I>基因在抗黄萎病中的应用专利申请。所述<I>GbCYP94C1</I>基因,与植物的黄萎病抗性相关。发明人发现在植物受到黄萎病菌侵染时,...
- 蔡应繁周克学龙璐王微娜孙全高巍张骁宋纯鹏
- 茎瘤芥BjMYB1两个转录本的克隆与遗传转化研究被引量:1
- 2016年
- 本研究根据茎瘤芥转录组测序筛选获得了一个MYB基因片段.通过RACE的方法,克隆得到了两条长度分别为975bp和864bp的全长序列,分析发现可能为茎瘤芥MYB基因的两种不同选择性拼接形式,并命名为BjMYB1-3和BjMYB1-4.对BjMYB1-3和BjMYB1-4做组织表达分析,发现这两个转录本在茎中特异表达.针对BjMYB1-3和BjMYB1-4的亚细胞定位分析,显示BjMYB1-4定位于细胞核,BjMYB1-3部分定位于细胞核.构建BjMYB1-3和BjMYB1-4的超表达载体转化拟南芥,结果显示相比于野生型拟南芥,BjMYB1-3超表达转基因株系生长状态更好,而BjMYB1-4超表达转基因株系没什么明显变化,说明BjMYB1-3在植株的生长发育过程中起着一定作用.
- 王微娜孙全江怀仲杨璨何晓红牟军蔡应繁
- 关键词:茎瘤芥MYB转录因子亚细胞定位
- 棉花细胞色素P450 CYP94C1基因在抗黄萎病中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及棉花细胞色素P450 <I>CYP94C1</I>基因在抗黄萎病中的应用专利申请。所述<I>GbCYP94C1</I>基因,与植物的黄萎病抗性相关。发明人发现在植物受到黄萎病菌侵染时,...
- 蔡应繁周克学龙璐王微娜孙全高巍张骁宋纯鹏
- 文献传递