虎义平 作品数:7 被引量:28 H指数:3 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
利用模糊数学评定杏仁油提取方法的研究 被引量:16 2008年 分别用索氏提取法、超声波辅助提取法从杏仁中提取杏仁油。首先从石油醚、正己烷、乙酸乙酯中3种溶剂选择出较好的提取溶剂,然后对不同的超声波温度、时间、料液比等提取条件提取杏仁油设计正交试验,测定其理化指标,对每个理化指标评判得分,最后对杏仁油进行综合模糊评定。结果表明:不同的温度、时间、料液比对提取率及油的理化指标均有不同程度的影响,推荐最佳工艺为:以正己烷作为提取溶剂,超声波温度为40℃,处理时间30 min,料液比为1∶6。 虎义平 张清安 钟盛华关键词:杏仁油 超声波 多肽MC10介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合体作为靶向Her-2受体基因载体的研究 被引量:4 2009年 目的:多肽MC10(MARAKEGGGC)介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合物载体作为新型靶向性非病毒基因载体的研究。方法:低分子量的聚乙烯亚胺(PEI)通过羰二咪唑(1,1'-carbonyl-diimidazole,CDI)偶联β-环糊精(β-CyD)合成聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将MC10偶联到PEI-β-CyD上,制成新型转基因载体材料MC10-PEI-β-CyD。用核磁共振氢谱(1H-NMR)对载体的结构进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,透射电镜观察其浓缩质粒DNA后形成的微粒粒径。MTT法检测聚合物的毒性,用SKOV-3、A549和MCF-7细胞株进行体外转基因实验,确定MC10-PEI-β-CyD具有基因携带能力及靶向选择性。结果:成功地合成了MC10-PEI-β-CyD,且MC10-PEI-β-CyD在N/P为5时,能够有效浓缩质粒DNA,形成粒径约为(170±35)nm的微粒。结论:MC10-PEI-β-CyD具有低毒和高转基因效率,对Her-2受体的肿瘤细胞具有很好的靶向性。 刘君 虎义平 姜启英 陈丹 余海 王青青 汤谷平关键词:聚乙烯亚胺 转染 肽类 TAT短肽修饰的聚乙烯亚胺-β-环糊精基因载体 被引量:5 2009年 目的:将HIV-1的转录反式激活蛋白(trans-activator of transcription protein,TAT)中的片段短肽(RKKRRQRRR)偶联于聚乙烯亚胺-β-环糊精(polyethylenimine-β-cyclodextrin,PEI-β-CyD)聚合物,构建出低毒性、高转染率的新型基因载体。方法:β-环糊精(β-CyD)和低分子量树枝状聚乙烯亚胺(PEI600)通过羰基二咪唑(1,1’-carbonyldiim idazole,CDI)聚合形成骨架结构,通过琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将TAT短肽偶联于PEI-β-CyD,构成新的聚合物TAT-PEI-β-CyD。采用1H-NMR和FT-IR对聚合物进行化学结构表征;凝胶电泳阻滞实验、粒径测定和透射电镜观察TAT-PEI-β-CyD对DNA的浓缩能力,以及浓缩质粒DNA后颗粒形态和粒径大小;MTT法测定载体在A293和B16细胞上的毒性,并对A293和B16细胞进行体外细胞转染实验,以PEI25kDa作为对照。结果:1H-NMR和FT-IR结果显示,TAT短肽已成功偶联到PEI-β-CyD。凝胶电泳阻滞试验显示,TAT-PEI-β-CyD在N/P为4∶1时可以完全阻滞DNA的迁移。粒径测定结果和透射电镜图像表明,TAT-PEI-β-CyD/pDNA(N/P=30∶1)复合物粒径在100nm左右。细胞毒性实验表明,在B16和A293两种不同细胞中,聚合物毒性低于PEI25kDa。体外转染结果表明,在N/P为30∶1时,聚合物在A293、B16和B16BL6细胞中的基因转染效率最高;TAT短肽的偶联能提高PEI-β-CyD在B16、B16BL6细胞上的基因转染效率。结论:实验成功构建了TAT短肽修饰的PEI-β-CyD新型基因载体。该载体毒性低,基因转染效率高。 来利华 姜启英 陈丹 虎义平 余海 王青青 汤谷平关键词:聚乙烯亚胺 基因产物 TAT 以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体 被引量:2 2009年 目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率。方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD。核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验。结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA。在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160μg/ml时,细胞存活率仍高于80%。在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍。结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体。 虎义平 姜启英 陈丹 赵丹军 陆晓 余海 王青青 周峻 胡秀荣 汤谷平关键词:聚乙烯亚胺 肽类 成纤维细胞生长因子 香菇多糖键合低分子量的聚乙烯亚胺作为新型非病毒基因载体的研究 被引量:3 2009年 目的:构建以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺的新型转基因载体,研究其在肿瘤细胞中的基因转染。方法:从香菇中提取香菇多糖作为载体骨架,1,1'-二羰基咪唑(CDI)作为交联剂,键合低分子量的聚乙烯亚胺(PEI1.2kDa)形成香菇多糖-聚乙烯亚胺(LNT-PEI)聚合载体材料。将叶酸(folicacid,FA)偶联到LNT-PEI上,形成具有肿瘤细胞靶向性的组装式基因载体LNT-PEI-FA。用核磁共振氢谱(1H-NMR)、傅里叶转换红外光谱(FT-IR)和热重分析(TGA)等对载体材料进行化学表征,以确定其结构。用凝胶电泳阻滞实验观察LNT-PEI-FA对质粒DNA的结合能力,MTT法检测聚合物的毒性,用TEM对LNT-PEI-FA/DNA复合物的粒径大小、形状等进行检测。在A293和B16细胞株上进行转染实验。结果:凝胶阻滞电泳结果显示,LNT-PEI-FA与DNA在W/W为1.8∶1时可以完全缩合DNA,在相同浓度下LNT-PEI-FA的毒性明显低于PEI25kDa;体外转染实验显示,在A293和B16细胞株上具有很高的转染效率,荧光素酶表达值分别为1×1010和1×107。结论:以香菇多糖为骨架材料键合低分子量聚乙烯亚胺形成的转基因载体是一种有潜在研究价值的新型非病毒转基因载体。 姜启英 陆晓 虎义平 陈丹 赵丹军 周峻 余海 王青青 汤谷平关键词:香菇多糖 聚乙烯亚胺 基因转移技术 构建络合四氯化铂的PEG-PEI基因载体 被引量:1 2009年 目的:构建一种能有效抑制肿瘤,且具有一定转染效率的基因载体。方法:在二氯甲烷溶液中将PEG与PEI600偶联,加入四氯化铂的乙醇溶液进行配位反应,生成PEG-PEI-Pt复合物。通过XRD、UV-VIS和FT-IR对配位化合物进行结构表征。凝胶电泳阻滞实验测定PEG-PEI-Pt复合物对DNA的浓缩能力,MTT法测定其在Hela、B16、A293和COS-7细胞上的毒性,体外细胞转染实验测定其在A293和B16细胞上的转染率。结果:XRD、UV-VIS和FT-IR测定结果表明PEI600与PEG的偶联和四氯化铂的配位成功。凝胶电泳组织实验表明PEG-PEI-Pt复合物在与DNA的质量比为0.4∶1时完全阻滞DNA的迁移;MTT结果表明四氯化铂的配位增加了复合物的毒性;体外转染结果表明该复合物的转染率比PEI600高。结论:实验成功构建了络合四氯化铂的PEG-PEI基因新载体。 赵璐 陈欢 陈丹 虎义平 余海 王青青 汤谷平 胡秀荣关键词:聚乙烯亚胺 转染 质粒 基因疗法 多肽在药物靶向运送及疾病治疗中的研究进展 被引量:1 2008年 作为非病毒转基因载体骨架组件,功能性多肽在构建转基因载体、载体的核转运和靶向运送等方面发挥着重要作用。本文综述了多肽在药物靶向运送和疾病治疗中的研究进展。 虎义平 刘君 汤谷平关键词:多肽 非病毒载体 药物疗法