贾球锋
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：山西农业大学信息科学与工程学院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪肺炎支原体P97基因特异性噬菌体随机肽库的构建及鉴定
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是猪气喘病的主要病原,经Mhp感染的病猪易遭受其它病原体的侵袭,常因坏死性、化脓性细菌的继发感染而死亡。猪肺炎支原体表面有黏附因子, 通过与猪肺纤毛...
- 贾球锋张映
- 文献传递
- 禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量影响的研究被引量：2
- 2009年
- 本试验旨在研究禽胰多肽(APP)对肉鸡肝脏和小肠组织中APPR mRNA表达量的影响。试验以APP粗提液及层析APP制品为材料,选取90只1周龄艾维茵肉鸡随机分为5组,每组3个重复,每个重复6只鸡。Ⅰ设为对照组,Ⅱ、Ⅲ设为饲饮组,Ⅳ、Ⅴ设为注射组。在第7周末,屠宰取其肝脏、小肠组织,运用SYBR Geen Ⅰ实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对肝脏和小肠中APPR mRNA的表达进行相对定量分析。结果发现:注射组与饲饮组肝脏及小肠中APPR mRNA的表达水平与对照组相比均呈下降趋势,且注射组降低程度大于饲饮组降低程度;其中,注射组与饲饮组中均是层析APP制品比APP粗提液的下降较明显,提示在外加APP情况下可对APPR mRNA的表达呈现抑制作用。本研究结果为进一步探讨APP与其受体之间的关系,从而为阐明其生理功能和作用机制提供一定的理论依据。
- 李丽芳贾球锋张映聂向庭
- 关键词：禽胰多肽肉鸡实时荧光定量PCR
- 禽胰多肽对肉鸡肝脏和小肠组织中cAMP浓度的影响
- 2009年
- 为探讨禽胰多肽(APP)作用的信号传导机制,以Ca3(PO4)2沉淀法制备的APP粗提液及经Sephadex G-50脱盐后层析的APP制品为材料,用不同方式和不同浓度添加APP两种制品进行动物试验,选取90只1周龄艾维茵肉鸡随机分为5组,每组18只。Ⅰ组为对照组,Ⅱ组和Ⅲ组设为饲饮组,Ⅳ组和Ⅴ组为注射组,在第7周末,屠宰取其肝脏和小肠组织,采用放射免疫法(RIA)对其细胞中的环腺苷酸(cAMP)浓度进行测定。结果发现,人为添加或注射APP后,在肝脏组织中各试验组与对照组比较,cAMP浓度变化主要呈下降趋势,但差异不显著(P>0.05);小肠组织中注射组和饲饮APP粗提液组与对照组相比cAMP浓度均下降,并且APP粗提液组极显著降低(P<0.01);而饲饮层析APP制品组与对照组相比呈升高趋势。提示cAMP在APP发挥其功能的信息传递过程中起到了一定作用,APP还可能存在其他的信息转导途径。
- 李丽芳贾球锋张映聂向庭
- 关键词：禽胰多肽环腺苷酸放射免疫测定肉鸡
- NGF及其受体在雄鸡睾丸组织中的定位及表达被引量：1
- 2018年
- 分别取14,20,24,35周龄同批次放养土鸡的睾丸组织,一部分经液氮处理后提取总蛋白,通过Western blot技术检测其表达量;另取一部分通过免疫组织化学技术对目的蛋白进行定位分析,研究神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)及其受体NGFR(P75)在雄鸡睾丸组织中的定位及表达情况。结果表明,NGF及P75蛋白在各发育阶段的雄鸡睾丸组织内均有表达;随着日龄增加,表达部位有所变化,且NGF及P75的蛋白表达量随各发育阶段呈增加趋势。研究结果对于阐明NGF及其受体在禽类生殖发育中调节作用的分子机理有重要意义。
- 李丽芳贾球锋乔琳张晋李嘉威张瑞强
- 关键词：神经生长因子神经生长因子受体蛋白免疫印迹法
- 利用噬菌体展示技术构建Mhp168株Hsp70随机肽库
- 2020年
- [目的]构建Mhp168株Hsp70 C端基因的噬菌体展示随机肽库。[方法]扩增猪肺炎支原体168株热休克蛋白Hsp70 C端1803 bp的DNA序列。回收Hsp70 DNaseⅠ消化产物中80~150 bp的DNA片段与pC89载体连接。辅助噬菌体超感染转化重组噬粒的E.coli XL1-Blue细胞。检测肽库的多样性,测定库容。[结果]在噬菌体表面展示出Hsp70 C端基因的随机片段融合蛋白。随机肽库库容约为9.9×10^3,滴度约为1.5×10^13 PFU/ml。[结论]所构建的随机肽库可以满足Hsp70构象型抗原表位筛选。
- 贾球锋毛晓娜李丽芳张映
- 关键词：猪肺炎支原体噬菌体肽库
- 噬菌体展示技术被引量：7
- 2006年
- 噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。到目前为止,人们已开发出了单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等数种噬菌体展示系统。本文主要概述了噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体展示系统研究以及技术特点等,并跟踪了目前该领域的最新研究进展和发展前景。
- 贾球锋李丽芳张映
- 关键词：噬菌体展示
- 猪肺炎支原体P97基因特异性随机肽库的构建与初步筛选被引量：1
- 2011年
- 构建猪肺炎支原体(Mhp)P97基因特异性随机肽库,探索从中筛选Mhp抗原表位的可行性。PCR扩增获得Mhp P97基因的部分C-端序列,产物用DNaseⅠ消化后将回收的P97随机片段(50 bp^100bp)克隆到pC89pⅧ型噬菌粒载体中,转化XL1-blue感受态细胞,辅助噬菌体VCSM13超感染,获得MhpP97基因特异性噬菌体随机肽库。经过三轮亲和筛选,有效地富集了噬菌体阳性克隆。结果显示,所建肽库的容量约为1.8×104,滴度约为1.3×1012pfu/mL。随机挑取10个阳性克隆进行ELISA检测,结果显示除1号孔外均为阳性。
- 贾球锋李丽芳张映聂向庭
- 关键词：猪肺炎支原体随机肽库
- 猪肺炎支原体P97基因随机肽库的构建被引量：1
- 2008年
- 目的:构建能用于抗原表位筛选的猪肺炎支原体(Mhp)P97基因C-端序列噬菌体随机肽库。方法:以MhpZ株(强毒)基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得MhpP97基因的C-端部分序列,扩增产物用DNaseⅠ消化并回收50bp^100bp的随机片段,将回收的随机片段插入pC89pⅧ型噬菌粒载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,使P97基因随机片段以融合蛋白的形式展示于噬菌体表面,从而成功构建了P97基因特异性噬菌体随机肽库。用PCR及DNA测序法鉴定所建文库的随机性和多样性,测定肽库的滴度并计算库容量。结果:所建肽库的容量约为1.8×104,滴度约为1.3×1012TU/mL,PCR检测及DNA测序结果显示插入片段具有随机性和多样性。结论:所建随机肽库具有较好的随机性和多样性,能够满足后续的抗原表位筛选,为进一步的深入研究奠定了基础。
- 贾球锋李丽芳张映聂向庭
- 关键词：猪肺炎支原体随机肽库
