钟毅 作品数:11 被引量:24 H指数:2 供职机构: 中山大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
申克孢子丝菌的扫描电镜观察 被引量:2 2012年 目的观察耐伊曲康唑申克孢子丝菌的超微结构特征,为申克孢子丝菌的临床鉴定提供基础资料。方法使用玻片法培养申克孢子丝菌,处理后在电镜下观察、拍照及测量。结果孢子丝菌标本图像清晰立体,可见假轴状分生孢子梗,分生孢子通常为孤立、直立生长,圆锥顶端相对,沿着菌丝轴增殖扩散,形成群集的细齿状的分生孢子链,分生孢子链较长,可弯曲。分生孢子为卵形,细长,约2.0μm×3.5μm大小,透明,表面不光滑,有不规则凹陷。结论该方法准确、可靠,可为申克孢子丝菌临床鉴定提供理论依据。 黄怀球 袁立燕 张静 钟毅 赵静 张晓辉 薛汝增 李美荣 陈荣章 李文娟关键词:申克孢子丝菌 扫描电镜 申克孢子丝菌翻译控制肿瘤蛋白的结构分析与功能预测 被引量:1 2012年 【目的】从cDNA文库中识别申克孢子丝菌翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的基因并分析预测其结构功能和应用前景。【方法】利用NCBI和ExPASy网站中的各种基因和蛋白的序列结构信息分析工具,结合DNAstar和VectorNTI suite生物信息学分析软件包,从申克孢子丝菌全长cDNA质粒文库中识别TCTP的基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白结构特征和功能。【结果】TCTP基因全长621 bp,编码区具有207个氨基酸。在GenBank同源序列中,其与蓝菌属真菌(Grosmannia clavigera)TCTP氨基酸序列一致性达到78%。理论预测分子质量为64581.4 ku。无质体和线粒体定位序列。预测结果显示编码蛋白含有1个跨膜区、7个亲水性部位和5个主要B细胞表位。与蓝菌属真菌及球毛壳霉(C.globosum)的TCTP进化关系最近。【结论】应用生物信息方法筛选出申克孢子丝菌TCTP的cDNA全长序列并预测其结构与功能、潜在抗原表位,为进一步实验研究该蛋白生物学特性提供了依据。 黄怀球 钟毅 赵静 张静 孙九峰 张晓辉 袁立燕关键词:申克孢子丝菌 生物信息学 广州市185株甲真菌病病原菌构成分析 被引量:12 2010年 目的:了解广州市甲真菌病病原菌的构成分布情况。方法:对2008年3月至2009年10月我科实验室185例甲屑培养阳性的病例及其病原菌构成比例进行回顾性分析。结果:185株菌中酵母菌占61.5%,其中光滑念珠菌最多见(19.0%),次为近平滑念珠菌(15.1%);皮肤癣菌占35.2%,主要以红色毛癣菌为主(17.8%),须癣毛癣菌次之(16.2%);非皮肤癣菌霉菌占4.8%,以黑曲霉为主(3.3%)。结论:本研究显示广州市甲真菌病病原菌中主要致病菌为酵母菌,其次为皮肤癣菌。 张晓辉 黄怀球 冯佩英 张静 李美荣 陈剑 尹颂超 钟毅 陈荣章 赖维关键词:甲真菌病 病原菌 Wistar大鼠带形囊尾蚴的鉴定和重度感染的病理分析 2011年 目的鉴定动物实验中Wistar大鼠所感染寄生虫的种属和分析其感染特征。方法解剖检查正常条件下饲养的大鼠肝脏表面的囊泡,取囊中的虫体头节以10%甲醛及KOH溶液处理后光学显微镜下进行寄生虫的形态学鉴定;并对所感染部位的肝组织进行病理学检查。结果大鼠生长状况良好,无明显异常体征,寄生的虫体鉴定为带形囊尾蚴;本次所解剖检查的Wistar大鼠对该虫的感染率高达85.7%,感染部位均为肝脏,感染虫体数目为5~120个不等,可见带形囊尾蚴早期和成熟期两种形态;肝脏病理虫体周围有嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,未被虫体占位的肝小叶结构正常,未见肝脏纤维瘤样变。结论 Wistar大鼠在饲养中易反复感染带形囊尾蚴,并能耐受重度感染,作为动物模型,一方面应严防该虫的感染对实验结果的干扰,另一方面可作为一个很好的免疫应答的干预模型应用于其他疾病的研究。 张晓辉 黄怀球 钟毅 冯佩英 张静 薛汝增 李美荣 陈荣章 赵静关键词:病理 Toll样受体2和4在抗孢子丝菌早期免疫阶段小鼠皮肤中的表达 被引量:1 2015年 目的探讨小鼠皮肤Toll样受体(TLR)2和TLR4在抗孢子丝菌早期免疫阶段的表达。方法实时荧光定量PCR检测BALB/c小鼠皮肤早期免疫阶段的TLR2和TLR4mRNA表达水平,同时通过免疫组化检测两者蛋白表达水平。结果孢子丝菌分生孢子接种小鼠皮肤后,TLR2mRNA转录水平在6h后逐渐升高至对照组的18.8倍,24h达高峰,为对照组的34倍;TLR4mRNA转录水平在6h内达高峰,为对照组的56.7倍,此后逐渐下降。免疫组化结果显示,孢子丝菌处理组小鼠皮肤角质形成细胞及巨噬细胞均可表达TLR2和TLR4蛋白,对照组不表达。血清中白细胞介素12及肿瘤坏死因子α在实验组和对照组的表达差异无统计学意义。结论TLR2和TLR4参与了小鼠皮肤角质形成细胞和巨噬细胞对孢子丝菌的识别,有助于免疫防御作用。 张静 黄丽林 张晓辉 钟毅 何泰龙 袁立燕 黄怀球关键词:TOLL样受体2 TOLL样受体4 白念珠菌与LDH抗体的交叉免疫研究 被引量:1 2012年 目的识别白念珠菌苹果酸脱氢酶(Candida albicans malate dehydrogenase,CaMDH)保守表位结构。方法本研究利用生物信息学方法,预测CaMDH的结构、功能和进化关系,并选取同源序列中与CaMDH序列一致性较低的日本血吸虫乳酸脱氢酶(Schistosoma japonicum lactate dehydrogenase,SjLDH)免疫血清与白念珠菌总蛋白进行交叉免疫反应。结果发现CaMDH与常见病原生物的同源序列一致性可达43%,其中与SjLDH一致性最低(18.2%)。CaMDH具有乳酸脱氢酶保守区域,7个主要的B细胞表位,其中3处与SjLDH表位相似。苹果酸脱氢酶活化点包含于NAD(P)结合部分中。白念珠菌总蛋白与SjLDH免疫血清交叉免疫反应阳性。结论交叉免疫反应阳性提示识别结合位点为LDH/MDH同源序列高度保守的表位结构,为进一步从高度保守的抗原决定簇中筛选真菌疫苗表位、诊断特异抗体、抗真菌药物治疗靶点提供了实验基础。 钟毅 黄怀球 赵静 袁立燕 张静 张晓辉 李美荣关键词:白念珠菌 苹果酸脱氢酶 交叉免疫 原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤1例并临床分析 被引量:3 2012年 原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤是临床少见的一种皮肤肿瘤。其临床特征为原发于老年人皮肤的红色结节或肿瘤,病理特征为CD30阳性大细胞的大量表达(>75%)。治疗采用减量CHOP方案,效果明显。 黄怀球 张静 钟毅 薛汝增 张晓辉 赵静 李美荣 袁立燕关键词:大细胞淋巴瘤 原发性 间变性 光滑念珠菌Cdc42基因生物信息分析 2013年 目的:分析和预测光滑念珠菌Cdc42基因及其编码蛋白的结构和特性。方法:利用NCBI、ExPASy和CBS网站中的各种信息分析工具,并结合Vector NTI suite 8.0生物信息学分析软件包,分析预测光滑念珠菌Cdc42基因并预测该基因编码蛋白结构的特征和功能。结果:Cdc42基因全长为576 bp,编码区具有191个氨基酸,在GenBank同源序列中,其与酵母Cdc42氨基酸序列一致性达到99%,且有Cdc42保守域。Cdc42蛋白相对分子量预测为21 420.83,理论等电点为6.31。预测Cdc42编码蛋白ɑ螺旋(H)、β折叠(E)、无规则卷(L)的比例分别是29.84%、28.70%、41.88%,1个GTP/ATP结合位点。Cdc42蛋白为疏水蛋白,无跨膜区,无信号肽。结论:成功预测Cdc42基因及编码蛋白生化及结构特征,为下一步对其进行克隆和表达奠定基础。 赵静 黄怀球 袁立燕 钟毅 张静 张晓辉关键词:光滑念珠菌 生物信息学 一株致面部感染的灰黄青霉的形态学观察 被引量:2 2012年 目的:明确一株致面部感染的灰黄青霉的形态学特征。方法:使用SDA培养基对灰黄青霉进行大培养,观察其菌落特征;使用玻片法对灰黄青霉进行小培养,制作扫描电镜样本后观察其微观形态特征。结果:此株灰黄青霉的菌落呈灰绿色至深褐色,接种后5天菌落直径为1~1.5 cm,表面可见大量的放射状皱纹,中心有脐状突起;质地呈绒状,带轻微絮状,在边缘面上的颗粒状通常更为突出;边缘可见淡黄色色素环;菌落反面呈乳黄色,质地平滑,表面可见放射状皱褶。扫描电镜显示分生孢子梗长,孢梗茎表面粗糙。帚状枝复杂,瓶梗呈瓶状,梗基顶端无膨大,分生孢子链较长,排列成圆柱状,可弯曲,分生孢子呈圆形或宽椭圆形,孢壁粗糙。结论:此株灰黄青霉的形态特征与野生株基本相符。 张静 黄怀球 袁立燕 薛汝增 张晓辉 钟毅 赵静 李美荣关键词:面部 形态学 白念珠菌伊曲康唑耐药性与乳酸脱氢酶抗体结合水平的关系研究 2012年 目的:探讨白念珠菌与乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)抗体的结合水平与伊曲康唑耐药性的关系。方法:实验用白念珠菌临床株共30株,包括伊曲康唑耐药株、中介株和敏感株各10株,采用P0013B放射免疫沉淀分析裂解液提取白念珠菌总蛋白,应用ELISA法与LDH抗体反应,检测并比较三组菌株与LDH抗体结合的水平。结果:ELISA检测耐药株与LDH抗体相对结合量为348.71±34.36,中介株与LDH抗体相对结合量为327.00±85.60,敏感株与LDH抗体相对结合量为443.43±35.64,三组差异有统计学意义(F=8.52,P=0.003)。结论:白念珠菌耐药株与LDH抗体相对结合量较敏感菌株低,提示白念珠菌与LDH抗体相对结合量下降可能与菌株耐药的发生有关。 钟毅 黄怀球 张静 张晓辉 赵静 李美荣关键词:白念珠菌 乳酸脱氢酶 苹果酸脱氢酶 耐药