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根癌农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化体系被引量：7: 2018年; 为建立以潮霉素为选择标记的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的玉米高效遗传转化体系,本研究利用携带p MDC141-CYP79A1(含GUS基因)质粒的农杆菌浸染玉米A188幼胚,共培养7d后通过GUS基因瞬时表达率,研究农杆菌的菌液浓度、热激时间和浸染时间等因素对玉米幼胚遗传转化效率的影响。研究结果表明:随着农杆菌的菌液浓度的增加、热激时间和浸染时间的延长,GUS表达效率均呈现先增后减的趋势;当农杆菌菌液的OD_(600)为0.8、热激预处理时间3min和浸染时间5min时,其GUS瞬时表达率均最高,分别为46.8%、46.4%和51.7%。并在最佳条件下将GUS基因转入到玉米幼胚,以潮霉素为选择标记,进行3次选择培养,将重新分化的抗性愈伤组织进一步分化成苗,获得56株潮霉素抗性植株,经PCR分子鉴定,获得22株阳性植株,初步建立根癌农杆菌介导的高效玉米幼胚遗传转化体系,为以抗潮霉素基因作为筛选标记的玉米遗传转化和基因功能验证提供技术基础,获得的抗潮霉素转化植株为玉米育种提供新材料。; 李金红付莉关晓溪关晓溪霍岩史振声; 关键词：玉米幼胚根癌农杆菌 GUS

高粱SbCYP79A1基因表达载体的构建及转化玉米研究: 2018年; 为研究SbCYP79A1基因功能及其转化玉米抗虫能力的研究,本试验根据NCBI公布的SbCYP79A1基因序列设计PCR引物,利用高粱品种BTX623克隆到同源性达到100%的SbCYP79A1基因全长cDNA序列,该序列开放阅读框包含1 887 bp,由629个氨基酸组成。构建SbCYP79A1基因植物超表达载体,PCR及测序结果均显示植物表达载体pMDC141-CYP79A1构建成功。将该表达载体导入农杆菌EHA105中,热激法转化到玉米A188幼胚,共培养7 d后,在幼胚检测到GUS基因瞬时表达,说明该农杆菌介导的玉米转化体系的转化效率具有可靠性;经选择培养获得54株转化植株,经PCR鉴定获得38株阳性植株,同时利用GUS基因对阳性植株的叶片和根部进行组织定位分析,均观测到较强的GUS基因表达,进一步验证了PCR检测结果。以上结果均证明高粱的SbCYP79A1基因已经整合到玉米基因组中,该研究结果为进一步获得玉米抗虫的新材料提供依据。; 李金红霍岩霍岩翁倩陶承光翁倩; 关键词：高粱基因玉米

建立玉米幼胚高效再生体系的研究被引量：2: 2017年; 为建立高效的玉米再生体系,以玉米幼胚为材料,研究了不同浓度的L-Pro、AgNO_3和2,4-D对愈伤组织诱导率的影响,同时还分析了不同浓度的玉米素和IBA对分化和生根的影响,结果表明,愈伤组织诱导率最佳的组合为基本培养基中添加L-Pro 700 mg/L、AgNO_30.1 mg/L和2、4-D 1.5 mg/L;在基本培养基中添加5 mg/L的玉米素可有效促进愈伤组织分化,再生芽和再生植株分化率分别达到97.96%和97.67%,在生根培养基中添加0.1 mg/L的IBA生根效果较好。; 李金红霍岩霍岩陶承光史振声; 关键词：玉米幼胚

一种玉米组织培养用镊子: 本实用新型公开了实验室器具技术领域的一种玉米组织培养用镊子，包括镊头，所述镊头的底部两端分别设置有左镊柄和右镊柄，所述左镊柄和右镊柄的底部均设置有镊尖，右侧所述手持槽的底部开设有容置槽，右侧所述手持槽的内腔底部设置有转轴...; 李金红翁倩陆晓春霍岩付莉刘阔; 文献传递

高粱抗虫基因CYP71E1表达载体的Gateway技术构建被引量：2: 2016年; [目的】探讨高梁HCN途径关键酶CYP71EI基因对玉米幼苗抗螟虫的影响，为培育抗玉米螟新品种奠定基础。[方法】以高梁自交系BTx623幼苗总RNA为模板，反转录成cDNA，利用聚合酶链式反应（PCR）扩增出1854bp的CYP71E1基因全长。利用基于位点特异性重组的Gateway技术，通过TOPO克隆将该基因克隆到入门克隆（vCRw8／GW／TOP00），在LR克隆酶作用下将入门克隆重组到表达载体（pMDC141）中。【结果】成功构建pMDC141-CYP71E1表达载体并将构建好的表达载体导人农杆菌EHA105，PCR和测序表明所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致。【结论】Gateway克隆技术与传统的克隆方法相比具有阳性克隆率高、快速、灵活等优点。; 霍岩李金红付莉; 关键词：高粱 GATEWAY

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霍岩