丁玉霞
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划山东省科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)CYP19a基因克隆与表达特征分析被引量：4
- 2013年
- 利用简并引物扩增及RACE全长克隆技术,克隆得到绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)CYP19a基因cDNA全长序列。通过多序列比对,发现具有芳香化酶特定保守序列,包括一个I-螺旋区,一个Ozol肽区,一个亚铁血红素结合区域以及一个芳香化酶特异性结合区域。通过RT-PCR技术检测了其在绿鳍马面鲀成鱼各组织表达的情况,发现其CYP19a基因只在卵巢中有表达;同时也分析了其在不同卵巢发育期的表达情况,发现CYP19a在卵黄发生后期表达量达到最高值,卵巢退化吸收期表达量达到最低值。
- 张冬茜温海深钱迟美丽倪蒙步艳丁玉霞
- 关键词：绿鳍马面鲀基因克隆MRNA表达
- 海产花鲈IGFBP-1、2基因的克隆及表达分析被引量：7
- 2014年
- 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆得到花鲈的IGFBP-1和IGFBP-2基因cDNA全长序列,IGFBP-1全长1 779bp,编码248个氨基酸,IGFBP-2全长815bp,编码267个氨基酸。花鲈的IGFBP-1和IGFBP-2氨基酸序列同其他硬骨鱼类一样都包括C-端结构域、N-端结构域和多变的中央L-结构域。二者均存在18个保守的半胱氨酸残基以维持氨基酸二级结构的稳定,同时也都拥有N-端结构域的CGCCXXC-box和C-端结构域的CWCV-box,它们都是与IGF配体结合的重要结构。此外,IGFBP-2的C-端结构域还存在一个RGD结构,它能够与整合素相互作用,介导细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的黏附作用。利用荧光实时定量PCR技术对花鲈的脑、垂体、心脏、鳃、胃、盲肠、肠、头肾、肾脏、肝脏、性腺(雄)、脾脏和肌肉这13个组织的IGFBP-1和IGFBP-2mRNA的相对表达水平进行分析。结果显示,花鲈IGFBP-1mRNA表达量较为广泛,在肝脏中的转录水平最高,在肌肉和脾脏有较多的表达。花鲈IGFBP-2mRNA仅在肝脏中的表达水平最高,在肌肉中表达水平较高,其他组织表达量较低。
- 钱焜温海深迟美丽倪蒙张冬茜丁玉霞
- 关键词：荧光实时定量PCR
- 鱼类两种缓释催产激素载体临床性能的比较研究
- 2013年
- 采用组织切片技术和RT-PCR技术研究了海藻酸钠微球和壳聚糖微球作为缓释激素载体在临床上对金鱼基础生物学指标以及CYP19A、GH基因mRNA表达的影响,以检测两种缓释激素载体对鱼类生殖和生长的影响。研究结果表明:缓释材料埋植0、7、14、30、48d后,雌性和雄性金鱼处理组与对照组(埋植0.7%生理盐水组)比较,海藻酸钠微球埋植组和壳聚糖微球埋植组在基础生物学方面没有出现显著性差异;不同处理组中实验鱼性腺组织切片卵巢和精巢的发育均处于同一时期(按照Мейен分期原则);海藻酸钠微球埋植组和壳聚糖微球埋植组中,各次采样组的CYP19A基因表达均没有出现明显性差异;海藻酸钠微球埋植组GH基因各次取样时间均未出现显著性差异,雌性金鱼壳聚糖微粒埋植组GH基因的表达在0、7、14、30采样后显著上升(P<0.05),埋植48d差异消失,雄性金鱼壳聚糖埋植组未出现明显差异。综合显示:作为缓释载体,海藻酸钠微球在临床上的性能较壳聚糖微球更为稳定,而壳聚糖微球对雌性金鱼的GH基因mRNA表达的促进作用更为明显。
- 尹相菡温海深倪蒙步艳迟美丽钱焜张冬茜丁玉霞
- 关键词：金鱼GH基因
- 外源激素对花鲈(Lateolabrax japonicus)血清IGF-1含量及肝脏IGF-1和IGFBP-1 mRNA表达的影响被引量：3
- 2014年
- 对花鲈(Lateolabrax japonicas)成鱼腹腔注射促黄体激素释放激素类似物(LHRH-A3)和人体绒毛膜促性腺激素(HCG),利用放射性免疫激素测定方法(RIA)检测了花鲈血清中类胰岛素生长因子(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)在注射后6、12、24、48 h内的变化情况,同时还利用荧光实时定量PCR技术检测了花鲈肝脏中IGF-1和类胰岛素生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)mRNA的相对表达量的变化情况。结果表明,注射LHRH-A3的花鲈血清中IGF-1的含量在24 h后出现了明显的降低(P<0.05),而花鲈肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射6 h后较对照组明显升高(P<0.05),而肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量则呈现下降趋势。注射HCG的花鲈血清中IGF-1的含量在注射后12 h出现了明显降低(P<0.05),24 h后血清中IGF-1含量持续降低。肝脏中IGF-1 mRNA的相对表达量在注射后的24 h内均保持稳定,而在处理后的48 h出现了显著上升(P<0.05)。肝脏中IGFBP-1 mRNA的相对表达量在注射后12h检测到显著升高(P<0.05)。研究结果表明,LHRH-A3和HCG均可以通过直接或间接的刺激作用来触发花鲈IGF系统的应答反应,但是其中具体机制尚不明了。
- 钱焜温海深迟美丽倪蒙张冬茜丁玉霞
- 花鲈类胰岛素生长因子-1基因的全长cDNA分离与表达分析被引量：8
- 2014年
- 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增法(RACE)获得花鲈(Lateolabrax japonicus)类胰岛素生长因子-1(IGF-1)的cDNA全长序列,利用荧光实时定量PCR技术研究了花鲈IGF-1mRNA在成鱼各组织中的表达特征。结果显示,花鲈IGF-1cDNA全长序列为873bp,编码区序列为555bp,编码186个氨基酸,推测成熟氨基酸分为6个结构域,分别是信号肽区域,A、B、C、A、D区域和E肽。花鲈IGF-1氨基酸序列与其他海水鱼类的IGF-1相似度较高,与淡水鱼类相似度较低,与高等脊椎动物相似度更低,说明海水鱼类的IGF-1在进化过程中发生了较大的变化。组织表达分析显示,花鲈IGF-1mRNA在肝脏中表达量最高,在肠、盲肠、肌肉、脾脏中次之;在鳃、垂体、性腺、胃、肾脏、脑、头肾、心脏中表达量较低。本文为鱼类IGF基因功能研究奠定基础,为花鲈生长调控提供科学依据。
- 钱焜温海深迟美丽倪蒙张冬茜丁玉霞
- 关键词：荧光实时定量PCR
- 壳聚糖-LHRHA缓释制剂对鱼类生殖内分泌机能的影响
- 2013年
- 以壳聚糖为材料制备了新型的壳聚糖-促黄体激素释放激素类似物(Chitosan-LHRHA)缓释制剂。在缓释制剂埋植于实验鱼第0、2、6、14、21和30天后,采用放射免疫法、RT-PCR方法检测了实验鱼的基础生物学指标、血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量、芳香化酶(CYP19A)、雌激素受体(ERα)、生长激素(GH)基因mRNA的表达。结果表明:在缓释制剂埋植2～21d,壳聚糖-LHRHA缓释制剂埋植组中,实验鱼的各项生理指标显著的高于对照组和LHRHA埋植组(P<0.05)。说明壳聚糖-LHRHA缓释制剂在埋植21d内可以在实验鱼体内稳定释放,并通过正反馈途径调节鱼体血清中T和E2水平,调节鱼体生殖相关基因mRNA的表达。研究表明,壳聚糖-LHRHA缓释制剂对调节鱼类的生殖机能有良好的促进效果。
- 尹相菡温海深刘晨光倪蒙步艳迟美丽钱焜张冬茜丁玉霞
- 关键词：缓释制剂LHRHA壳聚糖性类固醇激素基因表达
- 鲆鲽鱼类繁殖和生长相关基因SNP和DNA甲基化研究
- 本研究以人工养殖的牙鲆和半滑舌鳎为对象,运用内分泌学和表观遗传学等手段,对牙鲆和半滑舌鳎繁殖、生长相关基因的多态性及Cp G位点的甲基化状态等进行研究,以期从生理学和表观遗传学等角度阐释鲆鲽鱼类繁殖与生长的机理,为鲆鲽鱼...
- 何峰温海深李吉方史宝马瑞芹丁玉霞赵君丽黄政举司玉凤李思平
- 关键词：繁殖SNPDNA甲基化
- 文献传递
- 小体鲟HSP70基因全长cDNA序列的分离及表达分析被引量：2
- 2012年
- 采用RT-PCR法首次从小体鲟(Acipenser ruthenus)肝脏RNA分离获得HSP70基因全长cDNA序列(HSP70cDNA)。生物信息学分析显示,小体鲟HSP70基因含有众多的蛋白激酶C磷酸化位点,Ser、Thr、Thy磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号转导与调控中发挥作用。经过BLAST比对,认为该序列与西伯利亚鲟(Acipenserbaerii)、斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)、斑马鱼(Danio rerio)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)、非洲爪蟾(Xenopus lae-vis)、中华鳖(Pelodiscus sinensis)、原鸡(Gallus gallus)、家鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)的同源性均在80%以上,表明HSP70具有高度的保守性。组织表达分析表明,HSP70mRNA在小体鲟肝脏、心、脾、脑、肾、肌肉、胃、肠、垂体、精巢和卵巢组织中均有表达,但表达量不同,心脏、脾和肝脏中表达量高,脑、垂体和性腺中表达较少,鳃中没有表达。小体鲟HSP70基因的表达分析为研究应激条件下鲟科HSP70基因的差异表达和抗逆机理提供了基础。
- 倪蒙温海深步艳迟美丽钱焜尹相菡张冬茜丁玉霞
- 关键词：小体鲟HSP70基因CDNA基因分离
