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兰蓓
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供职机构:
南开大学生命科学学院
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相关领域:
化学工程
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合作作者
杨寅
南开大学生命科学学院
张翠竹
南开大学生命科学学院
万雅娟
南开大学生命科学学院
王雨
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稳定表达EGFP-LC3蛋白的HeLa细胞系的构建
2015年
自噬是指细胞自身将细胞质蛋白或细胞器经溶酶体降解的一种过程.微管相关蛋白1轻链3(LC3)是自噬的标志蛋白,利用荧光显微镜观察EGFP-LC3荧光蛋白是否聚集成点状是检测自噬的方法之一.首先构建了表达EGFP-LC3蛋白的真核表达质粒,其具有荧光和药物筛选双标签.转染到HeLa细胞中,利用药物初步筛选后,再稀释到96孔板中筛选出有荧光的单细胞克隆,得到稳定表达EGFP-LC3蛋白的HeLa单克隆细胞系.该细胞系在饥饿诱导条件下EGFP-LC3蛋白可聚集成点状,验证了该细胞系能够用于指示自噬,为今后自噬研究奠定了基础.
兰蓓
万雅娟
王雨
杨寅
张翠竹
关键词:
HELA细胞
稳定细胞系
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