刘华松
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：沈阳药科大学生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：辽宁省高校创新团队支持计划辽宁省大学生创新创业训练计划项目沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 透明颤菌血红蛋白基因在生黑葡萄糖酸杆菌中的克隆与表达
- 2016年
- 目的在生黑葡萄糖酸杆菌中克隆并表达透明颤菌血红蛋白基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)。方法构建重组质粒p UC19-vgb并电转化生黑葡萄糖酸杆菌。采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳和一氧化碳(carbon monoxide,CO)-示差光谱进行血红蛋白表达和生物活性测定。结果 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示有大量与目的蛋白大小相当(约15 ku)的蛋白表达。CO-示差光谱在420 nm处有一吸收峰,显示重组质粒p UC19-vgb成功转化入生黑葡萄糖酸杆菌,并表达具有生物活性的透明颤菌血红蛋白(Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)。结论成功构建vgb重组质粒,并实现在生黑葡萄糖酸杆菌中表达VHb。
- 陈羽徐威刘华松位星张世野
- 关键词：透明颤菌血红蛋白
- 1株产α-糖苷酶抑制剂放线菌的筛选与鉴定被引量：2
- 2017年
- 利用酶的催化特性从520株土壤分离放线菌中筛选对α-淀粉酶和α-蔗糖酶均具有抑制作用的产α-糖苷酶抑制剂菌株,并对其进行菌株归属鉴定。试验结果表明:从土壤分离放线菌中筛选到对α-淀粉酶酶活力抑制率在75%以上的菌株45株,从这45株放线菌中筛选到1株对α-蔗糖酶抑制率在40%以上的菌株。通过对其进行形态学观察、生理生化特性鉴别,并结合16S rRNA基因序列分析,初步判定该菌株为天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolo。
- 刘华松陈羽戴伟巧陈一鸣赵晓云徐威
- 关键词：Α-淀粉酶放线菌抑制剂
- 草分枝杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的克隆与表达
- 2016年
- 采用PCR技术从草分枝杆菌(Mycobacterium phlei)基因组中扩增出亮氨酰-t RNA合成酶基因leu RS,依次克隆入p MD19-T Simple克隆载体及p ET28a(+)表达载体,并在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达。表达产物用Ni^(2+)螯合的His Trap^(TM) HP亲和色谱纯化,测定纯化所得目的蛋白的酶活力。结果显示,经PCR扩增得到2.8 kb的DNA片段,重组质粒p ET28a(+)-leu RS经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确。SDS-PAGE显示,有与目的蛋白大小相当(相对分子质量约1.10×10~5)的蛋白质表达,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白的32.8%,纯化后的蛋白质纯度达93.8%,酶活力为13.2 u/ml。
- 仉蕊陈羽刘华松徐威
- 关键词：亮氨酰-TRNA合成酶草分枝杆菌纯化
