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小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析: 2013年; 目的制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具。方法根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkd1抗原(mPkd1-N)。纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Westernblot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性。结果成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np。通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性。结论成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkd1-Np多克隆抗体。; 刘海超李渊李奥陈远孙春阳丁镇伟吴冠青; 关键词：PKD1基因多克隆抗体常染色体显性遗传多囊肾病

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孙春阳