张海燕
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 登革2型病毒NGC株对小鼠髓源性DC TLR4、TLR7表达影响的研究
- 张海燕
- DEN2感染对小鼠髓源性树突状细胞膜表面分子TLR4、TLR7表达的影响
- 2017年
- 目的探讨登革病毒2型（DEN2）感染对小鼠髓源性树突状细胞表面分子TLR4、TLR7表达影响。方法BALB／C乳鼠脑内接种及C6／36细胞增殖病毒，RT．PCR鉴定病毒核酸；rmGM．CSF和rmIL-4联合诱导鼠源性DC；直接免疫荧光法观察DEN2感染DC；流式细胞术检测DC被DEN2感染后膜表面分子CD11C、CD86、I-A／I．E类分子表达的动态变化；RT—PCR动态检测DEN2感染DC后DEN2RNA、TLR4和TLR7mRNA水平表达的变化。结果IL_4和GM．CSF诱导小鼠骨髓来源DC的纯度可达到70％；DEN2能够感染小鼠骨髓来源DC；与阴性对照组相比，接种病毒组[1×104半数组织培养感染剂量（TCID50）]的DC膜表面分子CD86、I-A／I．E的百分率差异无统计学意义。与阴性对照组相比，接种病毒组（1×105 TCID50）的DCs膜表面分子CD86、I-A／I—E的百分率差异均有统计学意义．但各组百分率的变化并未随着时间的延长呈现出明显的上升或下降的趋势；随着病毒剂量的增加，DC膜表面分子CD86、I-A／I—E的百分率呈现出上升的趋势；与阴性对照组比较，RT．PCR证明各组病毒mRNA水平随着病毒剂量的增大而逐渐升高。与阴性对照组比较，RT—PCR检测各组被DEN2感染的DCTLR4、TLR7mRNA随着病毒剂量的增加，呈现下调的趋势。结论DEN2可促进DC的成熟；DEN2感染DC后，TLR4、TLR7mRNA水平随病毒mRNA水平的增加而降低，提示TLR4、TLR7与病毒感染密切相关，在DEN致病中发挥了一定的作用和功能。
- 张海燕左丽尹科曾雯
- 关键词：树突状细胞
- DEN2对鼠源性DCTLR7、MyD88、NF-κB的表达与细胞因子分泌的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察登革2型病毒(DEN2)感染鼠源性DC后TLR7、MyD88、NF-κB的表达及IFN-α、IP-10的分泌变化,探讨MyD88依赖型信号通路在DEN2感染中的作用。方法:rmGM-CSF和rmIL-4联合诱导C57BL/6小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC),常规方法增殖鉴定DEN2,利用DEN2(MOI=0.4)感染BMDC,直接免疫荧光检测DEN2吸附鼠源性BMDC;West-ern blot检测感染后不同时间TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达。双抗体夹心ELISA法检测感染后不同时间细胞培养上清IP-10、IFN-α的水平,RT-PCR检测相应时间点被感染DC内DEN2 NS5核酸水平。结果:rmGM-CSF和rmIL-4联合诱导C57BL/6小鼠BMDC,5天后获得纯度为70%的相对未成熟DC;与对照组相比DEN2感染BMDC后24小时TLR7、MyD88、NF-κB的表达升高;48小时TLR7表达低于正常对照组,但MyD88、NF-κB的表达高于正常对照组;72小时DEN2感染组TLR7、MyD88、NF-κB的表达均较前降低,且TLR7、MyD88的表达低于正常对照组。DEN2感染组细胞培养上清IFN-α、IP-10的水平明显高于正常对照组,IFN-α逐渐升高,72小时分泌量达最高,可分泌(933.94±29.02)ρg/ml;IP-10在48小时分泌达高峰,分泌量为(834.44±43.60)ρg/ml,结果具有统计学意义(P<0.05),且被感染DC内DEN2 NS5病毒核酸水平48小时达最高,72小时有所降低。结论:DEN2可影响小鼠BMDC TLR7、MyD88、NF-κB的表达,促进其分泌IFN-α、IP-10进而影响病毒复制。
- 曾雯左丽尹科张海燕
- 关键词：树突状细胞MYD88细胞因子
