李曼
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：广东药科大学更多>>
- 发文基金：北京市科委基金“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
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- 体外肝毒性评价细胞模型的研究进展
- 大约三分之二的进入Ⅲ期临床的药物因其肝毒性而不得不终止开发,药物性肝损伤也是导致药物上市后撤回的主要因素,而导致肝毒性药物进入临床实验的一个重要原因,在于临床前肝毒性评价模型。用于药物安全性评价的模型包括在体实验动物模型...
- 李曼董延生李泽君谢丽华樊星呼丹刘悦吴纯启廖明阳王茜莎王全军
- 关键词：肝细胞肝毒性体外模型
- 文献传递
- 体外肝毒性评价细胞模型的研究进展被引量：3
- 2015年
- 药物性肝损伤是导致药物临床实验失败和上市后撤回的主要因素,而导致肝毒性药物进入临床实验的一个重要原因,是临床前动物模型与人类的种属差异。因此,开发新的临床前药物安全评价模型显得至关重要,临床前药物安全性评价模型中以人类肝细胞的体外培养为最可靠、快速、经济的模型。本文综述了在新药研发早期安全性评价中,不同体外模型的优点和不足之处,以期为药物安全性评价模型的进一步发展提供参考。
- 李曼董延生李泽君谢丽华樊星呼丹刘悦吴纯启廖明阳王茜莎王全军
- 关键词：肝细胞肝毒性体外模型
- 对乙酰氨基酚对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞的毒性作用比较被引量：4
- 2016年
- 目的建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较对乙酰氨基酚（APAP）对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性作用。方法采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,通过过碘酸雪夫染色（PAS）和肝细胞双核结构进行鉴定;CCK 8法测定APAP对大鼠原代肝细胞及BRL-3A细胞毒性作用的IC50;光学显微镜透射电镜观察APAP对2种细胞的损伤情况;全自动生化分析仪测定细胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8项生化指标的变化。结果PAS糖原染色鉴定获取的大鼠原代肝细胞,双核结构,细胞存活率浮动在80%~95%;最佳接种密度为60 000/cm^2,在第3~5天为对数生长期;APAP作用于大鼠原代肝细胞24 h的IC50为18.03 mmol/L,95%置信区间为（17.28~18.81）mmol/L,作用于BRL-3A的IC_（50）为20.05 mmol/L,95%置信区间为（18.99~21.17）mmol/L;透射电镜结果显示,在30 mmol/L APAP作用下,2种细胞细胞器肿胀,核膜破裂,细胞膜边界模糊不清;与对照组比较,大鼠原代肝细胞分泌的天冬氨酸氨基转移酶（AST）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）随着APAP浓度增加产生显著变化,而BRL-3A细胞几乎所有的酶学指标变化均差异不显著。结论与永生化细胞BRL-3A比较,大鼠原代肝细胞更能体现药物的肝脏毒性作用,但其体外培养存活时间较短;BRL-3A细胞缺少肝脏重要酶类,增加细胞内肝脏酶类是提升其作为肝脏毒性筛选模型的更好手段之一。
- 李曼吴纯启许赫雷谢丽华韩刚王全军王茜莎
- 关键词：大鼠原代肝细胞原代培养对乙酰氨基酚肝毒性
- 2D、3D培养的大鼠原代肝细胞和BRL-3A细胞在药物肝毒性评价中的比较研究
- 目的：建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系，比较对乙酰氨基酚作用于2D培养的大鼠原代肝细胞、3D培养的大鼠原代肝细胞和BRL-3A细胞的毒性特点。 方法：采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞，并通过PAS糖原染色和肝细...
- 李曼
- 关键词：原代肝细胞动物模型
- 扑热息痛致BRL-3A细胞和大鼠原代肝细胞损伤作用比较研究
- 目的:建立大鼠原代肝细胞提取鉴定体系,比较扑热息痛对大鼠原代肝细胞和永生化细胞BRL-3A的毒性。方法:采用胶原酶原位两步灌流法提取大鼠原代肝细胞,并通过PAS糖原染色进行鉴定;CCK8法测定扑热息痛(APAP)对大鼠原...
- 李曼吴纯启王茜莎王全军
- 关键词：大鼠原代肝细胞原代培养扑热息痛肝毒性
- 文献传递
- 何首乌乙醇提取液对LPS诱导大鼠肝脏CYP450酶的影响被引量：15
- 2016年
- 目的基于脂多糖(LPS)诱导大鼠肝脏损伤建立何首乌肝毒性模型,探究何首乌乙醇提取液(AEP)对大鼠细胞色素P450(CYP450)酶主要亚型活性及蛋白表达的影响。方法雄性SD大鼠100只,随机分为6组:对照组、LPS组、对乙酰氨基酚(APAP)组、(LPS+APAP)组、AEP组和(LPS+AEP)组。尾iv 4 mg/kg LPS,2 h后,按组别分别ig 625 mg/kg APAP和6 g/kg AEP,每天1次,连续给药7 d,每天观察大鼠体质量变化。在建模过程中,取第2、14小时和5、8天4个不同时间点,分别对各组别动物麻醉后取血,检测肝功能生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性;解剖,记录肝脏质量;苏木精-伊红(HE)染色进行组织病理学检查;试剂盒法测定肝细胞中细胞色素CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1活性的变化;提取肝脏蛋白,应用Western blotting法检测CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1蛋白表达情况。结果与对照组比较,第2和14小时,LPS组、(LPS+APAP)组和(LPS+AEP)组ALT、AST和ALP活性显著升高;组织病理学检查发现,肝细胞灶状坏死,伴炎细胞浸润;给药后第8天,LPS组组织病理学检查正常,但(LPS+AEP)组可见显著肝细胞变性,局部慢性炎性灶。第8天,AEP组大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1的活性明显降低;Western blotting法检测发现,AEP能显著降低大鼠肝脏CYP1A2蛋白的表达,而对CYP2E1和CYP3A1蛋白表达没有显著影响。结论经LPS诱导,AEP对SD大鼠产生明显的肝脏毒性,毒性的发生及LPS诱发的免疫作用与抑制CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1的活性和抑制CYP1A2蛋白表达有关。
- 谢丽华樊星吴纯启井潇李曼董延生韩刚王全军王茜莎
- 关键词：细胞色素P450
- 肝癌干细胞自我更新信号转导及作为潜在治疗靶点的研究进展被引量：1
- 2016年
- 肝细胞癌复发率高、易转移和化疗耐药等严重影响患者生存率。临床研究发现,这很大程度上归咎于肝癌干细胞(CSC)或肿瘤起始细胞的存在或残留。本文将重点围绕肝CSC特点,主要临床表征,自我更新信号通路Wnt/β联蛋白、信号转导和转录激活物3、NANOG、膜联蛋白A3/Jun激酶和四跨膜蛋白L6家族成员5/CD44讨论,并针对信号通路中潜在靶点的药物治疗进行分析,以期为寻找选择性靶向肝CSC自我更新信号的药物提供依据。
- 许赫雷吴纯启董延生李曼谢丽华王全军王茜莎
- 关键词：肝细胞癌肝肿瘤干细胞信号转导
