李艳梅
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 供职机构：东营职业学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛疱疹病毒Ⅰ型gB、gE基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 本试验用PCR方法扩增了牛疱疹病毒Ⅰ型(bovine herpesvirus-1,BHV-1)Bartha Nu/67株gB、gE基因片段,将其克隆到pGEM-T-easy载体。经转化、筛选、鉴定后将重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后,与经相同方法处理的杆状病毒转移载体pFastBacHTb连接,得到了重组质粒pFBHgB、pFBHgE。经酶切和测序鉴定后,将其转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,经抗性、蓝白斑筛选和PCR鉴定,得到了含gB、gE基因的重组穿梭载体。
- 吴春涛李艳梅
- 关键词：杆状病毒表达系统
- 牛疱疹病毒Ⅰ型gB基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 采用PCR方法从牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)Bartha Nu/67株扩增出完整的gB基因编码区,将其克隆到pGEM-T Easy载体。根据抗原性将gB基因分成3段,分别克隆到原核表达载体pET-32a中,构建了重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析。结果显示,目的蛋白均获得了高效表达,均以包涵体形式存在,纯化后目的蛋白的纯度在90%以上。Western-blot和ELISA分析表明,重组蛋白pET-gBⅢ的反应原性最好。以纯化的pET-gBⅢ为诊断抗原包被酶标板,建立了检测BHV-1抗体的间接ELISA方法。用该间接ELISA与法国IDEXX公司的IBR抗体检测试剂盒对临床样品进行平行检测,结果二者的总符合率为93.8%。表明建立的gBⅢELISA检测方法具有很好的特异性和敏感性。
- 吴春涛李艳梅唐少刚
- 关键词：GB基因原核表达间接ELISA
- 一种便于投料的生物化工反应罐
- 本实用新型涉及生物化工反应罐技术领域，尤其是一种便于投料的生物化工反应罐，包括罐体，所述罐体的顶端卡接有顶盖，所述罐体的上方一侧开设有第一进料口，所述罐体的底端一侧放置有底板，所述底板的顶端一侧安装有第二电机，所述第二电...
- 冯蕾李艳梅
- 文献传递
- 融合蛋白C3d提高新城疫灭活苗的免疫原性被引量：1
- 2008年
- 补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研究、利用鸡补体C3d奠定了基础。
- 李艳梅褚新星吴春涛聂玉霞肖连明
- 关键词：C3DMTT血凝抑制试验
- 一种生物化工原料混合装置
- 本实用新型涉及化工原料混合技术领域，尤其是一种生物化工原料混合装置，包括安装底座，安装底座的底部固定安装有第一电机，第一电机的输出轴贯穿安装底座的顶壁，且固定连接有转盘，转盘顶部的中心位置固定安装有支撑杆，支撑杆的顶端固...
- 冯蕾李艳梅
- 一种具有恒温功能的中草药加工熬煮装置
- 本实用新型公开了一种具有恒温功能的中草药加工熬煮装置，属于中草药加工技术领域，包括装置壳体，所述装置壳体的顶部外壁固定连接有转动电机，所述转动电机的输出轴一端固定连接有转动轴，所述转动轴的圆周底部固定连接若干均匀分布的固...
- 李艳梅
