李莉芬
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低浓度氟化钠对人牙髓细胞的成骨/成牙本质分化的影响被引量：1
- 2024年
- 目的探讨低浓度氟化钠对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成骨/成牙本质分化的影响。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准。原代培养hDPCs,采用MTT法检测不同浓度氟化钠对hDPCs增殖的影响;选取合适浓度的氟化钠加入成骨/成牙本质分化诱导培养液中,对hDPCs进行体外诱导,通过茜素红染色检测hDPCs成骨/成牙本质分化能力的变化,RT⁃qPCR检测分化相关基因的mRNA表达;同时通过RT⁃qPCR和Western blot检测hDPCs成骨/成牙本质分化过程中内质网应激相关基因的表达。结果低浓度氟化钠(0.1 mmol/L)在体外可刺激hDPCs增殖,高浓度氟化钠(5~10 mmol/L)可抑制hDPCs增殖(P<0.05)。选取0.1 mmol/L氟化钠体外混合成骨/成牙本质分化诱导培养后hDPCs的茜素红染色增加,成骨/成牙本质分化相关基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)mRNA表达水平升高(P<0.05)。同时在此过程中RT⁃qPCR检测出mRNA水平hDPCs内质网应激相关基因:剪切x盒结合蛋白1(splicing x⁃box binding protein⁃1,sXBP1)、葡萄糖调节蛋白78(glucose⁃regulated protein 78,GRP78)以及活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)表达升高(P<0.05);Western blot检测出氟化钠混合成骨/成牙本质分化培养后细胞磷酸化真核起始因子⁃2α(phosphorylated eukary⁃otic initiation factor⁃2α,p⁃eIF2α)、磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated the RNA⁃activated protein kinase⁃like ER⁃resident kinase,p⁃PERK)和ATF4蛋白表达增加(P<0.05)。结论低剂量氟化钠促进人牙髓细胞的成骨/成牙本质分化并伴有内质网应激水平的升高。
- 李莉芬韩俊力江龙
- 关键词：人牙髓细胞氟化钠葡萄糖调节蛋白78
- 应用流式细胞术检测人牙髓细胞内活性氧的方法探讨被引量：2
- 2012年
- 目的:建立用流式细胞术检测人牙髓细胞内活性氧变化的方法。方法:采用改良组织块法培养人牙髓细胞,牙髓细胞经不同浓度H2O2处理30 min后,以终浓度分别为10、20μmol/L的2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorofluoresin diacetate,DCFH-DA)作为荧光探针,与牙髓细胞共同避光孵育20 min,使用流式细胞仪检测细胞内氧化性二氯荧光素(Dichlorofluorescein,DCF)的荧光强度。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:不同浓度探针装载率不同;不同浓度H2O2作用于细胞一定时间后,使用流式细胞术可检测到细胞内活性氧水平产生相应变化,且多次重复结果稳定。结论:选用终浓度为20μmol/L的DCFH-DA作为探针装载率较高,利用流式细胞仪检测人牙髓细胞内活性氧的产生是一种可靠、稳定、简便的方法。
- 伍甜甜杜嵘李莉芬朱亚琴
- 关键词：流式细胞术人牙髓细胞活性氧
- 二氯化钴诱导化学缺氧对人牙髓细胞增殖和迁移的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:研究二氯化钴(CoCl2)诱导化学缺氧对人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)增殖和迁移的影响。方法:改良组织块法体外培养获得的人DPCs,通过CoCl2化学模拟缺氧作用后,采用MTT法检测化学缺氧对人DPCs增殖的影响,Transwell法观察化学缺氧对人DPCs迁移能力的影响。结果:CoCl2诱导的化学缺氧可抑制人DPCs的增殖,并呈浓度依赖性;同时对DPCs的迁移有抑制作用。结论:CoCl2诱导化学缺氧能抑制DPCs的增殖和迁移。
- 李莉芬江龙彭伟伟朱亚琴
- 关键词：缺氧氯化钴牙髓细胞增殖迁移
- 人牙髓细胞复合不同孔径羟基磷灰石/磷酸三钙支架材料的生物学行为被引量：3
- 2010年
- 背景:有文献表明,通过组织工程的方法将人牙髓细胞复合羟基磷灰石/磷酸三钙多孔支架材料修复牙缺损具有可行性。然而究竟多大孔径的支架材料最有利于人牙髓细胞的生长及分化,至今尚无定论。目的:观察人牙髓细胞复合不同孔径羟基磷灰石/磷酸三钙支架材料后黏附、增殖和分化等生物学行为。方法:人牙髓细胞接种至3种不同孔径的羟基磷灰石/磷酸三钙材料上,采用荧光显微镜以及扫描电镜检测细胞在材料表面的黏附生长情况,然后通过细胞的黏附率实验与MTT比色法观察人牙髓细胞在材料表面的黏附与增殖特性。不同孔径的羟基磷灰石/磷酸三钙支架复合人牙髓细胞后分别用生长培养基和矿化诱导液培养,于接种后第4,7,10天检测碱性磷酸酶活性。结果与结论:人牙髓细胞在3种不同孔径支架材料表面和孔隙内均能顺利黏附并增殖。其中100～300μm组支架材料黏附率最高,MTT结果显示接种3d后300～500μm组能较好地促进细胞增殖。培养10d后,复合在100～300μm和300～500μm材料上的人牙髓细胞,其碱性磷酸酶活性显著高于500～700μm组。提示与500～700μm孔径相比,孔径为100～300μm和300～500μm的羟基磷灰石/磷酸三钙材料能更好地促进人牙髓细胞黏附、增殖和分化。
- 彭伟伟翟万银江龙李莉芬常江朱亚琴
- 关键词：人牙髓细胞孔径增殖分化
- 体外氧糖剥夺培养条件促进人牙髓细胞内质网应激的研究被引量：1
- 2022年
- 目的通过氧糖剥夺(oxygen⁃glucose deprivation,OGD)体外模拟细胞缺血缺氧,观察人牙髓细胞(hu⁃man dental pulp cells,hDPCs)内质网应激变化,为缺血缺氧条件调控hDPCs的机制研究提供依据。方法应用无糖DMEM培养液联合低氧培养(体积分数2%O2)构建hDPCs OGD模型,体外模拟hDPCs缺血缺氧,设置对照组和实验组。对照组:常规培养;实验组:OGD处理0、2、4、8 h。MTT检测hDPCs OGD处理0、2、4、8 h后细胞存活率;qRT⁃PCR检测hDPCs内质网应激关键分子:剪切X盒结合蛋白1(splicing x⁃box binding protein 1,sXBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,chop)mRNA水平,Western blot检测内质网应激关键蛋白:磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated RNA⁃activated protein kinase⁃like ER⁃resident kinase,p⁃perk)、磷酸化真核起始因子⁃2α(phosphorylated eukaryotic initia⁃tion factor⁃2α,p⁃eIF2α)表达水平。结果相较于OGD处理0 h,OGD培养hDPCs 2、4、8 h后,死亡细胞增多,细胞存活率显著下降(P<0.05)。与对照组相比,OGD处理4 h后,hDPCs内质网应激关键信号分子sXBP1、ATF4、CHOP mRNA表达水平升高;内质网应激关键蛋白p⁃perk、p⁃eIF2α表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论hDPCs OGD培养条件下内质网应激水平明显升高。
- 李莉芬朱亚琴江龙
- 关键词：人牙髓细胞氧糖剥夺内质网应激C/EBP同源蛋白
- 内质网应激在牙周膜细胞成骨分化中的表达被引量：1
- 2017年
- 目的 :观察人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)成骨分化过程中内质网应激水平的变化及其影响,以便更好地了解PDLCs成骨分化的机制。方法:原代培养人PDLCs,并体外诱导成骨,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色鉴定其成骨特性;PCR和Western印迹检测体外成骨诱导时PDLCs内质网应激关键分子的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:体外诱导成骨培养的PDLCs ALP染色及茜素红染色增强,矿盐沉积增加。同时,体外成骨诱导的PDLCs内质网应激关键分子剪切x盒结合蛋白1(splicing x-box binding protein-1,s XBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、葡萄糖调节蛋白质78(glucoseregulated protein 78,GRP78)m RNA表达水平升高。Western印迹检测显示,成骨诱导的PDLCs内质网应激关键分子磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(phosphorylated the RNA-activated protein kinase-like ER-resident kinase,p-PERK)、磷酸化真核起始因子2α(phosphorylated eukaryotic initiation factor-2α,p-e IF2α)表达增加。结论:牙周膜细胞成骨分化时内质网应激水平明显升高。
- 李莉芬文扬江龙朱亚琴
- 关键词：牙周膜细胞成骨分化内质网应激
- 衣霉素诱导牙髓细胞内质网应激模型的建立被引量：2
- 2018年
- 目的:用衣霉素诱导人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs),构建人DPCs内质网应激模型,为进一步探讨内质网应激介导人DPCs相关疾病的分子机制提供实验基础。方法:改良组织块法体外培养人DPCs;MTT法检测不同浓度衣霉素对人DPCs活性的影响;PCR检测人DPCs内质网应激关键分子的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着衣霉素浓度的增加,人DPCs存活率逐渐下降。衣霉素诱导后,人DPCs内质网应激关键分子剪切x盒结合蛋白1(splicing x-box binding protein-1,s XBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、葡萄糖调节蛋白质78(glucose-regulated protein 78,GRP78)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)m RNA表达水平升高。结论:衣霉素诱导人DPCs内质网应激发生,模型成功建立。
- 李莉芬文扬江龙朱亚琴
- 关键词：衣霉素牙髓细胞内质网应激
