王晓芬
- 作品数:3 被引量:42H指数:1
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- 姜黄素激活转化生长因子-β_(1)/Smad2通路保护关节软骨细胞损伤的机制研究
- 2024年
- 目的 研究姜黄素对关节软骨细胞损伤的保护作用,以及对转化生长因子(TGF)-β_(1)/Smad2通路的影响。方法 选取6周龄SD雌性大鼠,脱颈椎处死后分离获取膝关节软骨细胞,甲苯胺蓝染色进行细胞鉴定。将细胞分为空白对照组、模型组以及姜黄素干预组(低、中、高剂量),其中模型组以及姜黄素干预组用5μg/L脂多糖预处理1 h,干预组(低、中、高剂量)加入含5、15、50μmol/L姜黄素的培养基,空白对照组、模型组加入不含姜黄素的培养基。培养24 h,采用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡情况,采用蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9)、软骨细胞外基质蛋白(Aggrecan、COLL2)以及TGF-β_(1)/Smad信号通路相关蛋白(TGF-β_(1)、Smad2/3、Smad7)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测TGF-β_(1)/Smad2信号通路基因表达情况。结果 模型组凋亡小体减少,细胞核固缩深染,姜黄素干预组随着浓度增加,凋亡小体较模型组呈逐渐降低趋势。5组细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9)表达水平差异有统计学意义(F=30.382,17.362,39.284,18.855;P均<0.05),其中姜黄素干预组Bax、caspase-3、caspase-9高于空白对照组,低于模型组,而干预组Bcl-2低于空白对照组,高于模型组;5组细胞软骨细胞外基质蛋白(Aggrecan、COLL2)表达水平差异有统计学意义(F=26.605,40.699;P均<0.05),其中姜黄素干预组Aggrecan、COLL2高于空白对照组,模型组低于空白对照组,细胞外基质蛋白以及凋亡蛋白表达水平呈剂量依赖(P<0.05)。5组细胞TGF-β_(1)/Smad信号蛋白、基因(TGF-β_(1)、Smad2/3、Smad7)表达水平差异有统计学意义(F=27.667,13.684,26.029,61.032,25.877,35.934;P均<0.05),其中姜黄素干预组TGF-β_(1)、Smad2/3高于空白对照组、模型组,而Smad7低于空白对照组、模型组,TGF-β_(1)/Smad信号通路蛋白、基因表达水平呈剂量依赖(P<0.05)。结论 姜黄素�
- 任卫丹王晓芬戴小燕
- 关键词:姜黄素软骨细胞
- 附子化学成分分析方法及药理作用的研究进展被引量:42
- 2010年
- 目的介绍近年来附子化学成分分析方法、药理作用的研究进展。方法查阅关于附子化学成分分析方法及药理作用文献,对其进行综合、分析与归纳。结果附子有效成分含量测定以UV、HPLC最为常用;附子具有正性肌力、抗心律失常、舒张血管、镇痛、抗衰老、抗肿瘤、调节免疫、毒性等多种药理作用。结论附子是一个药理活性强的药物,随着化学成分分析、药理等研究,有着非常广阔的前景。
- 王晓芬朱英
- 关键词:附子药理作用
- 小白菊内酯对食管癌细胞增殖 凋亡和能量代谢的影响
- 2023年
- 目的 探讨小白菊内酯对食管癌细胞增殖、凋亡和能量代谢的影响。方法 对人食管癌细胞Eca109转染肝激酶B1(LKB1)的短发夹RNA(shRNA)重组pLK0.1质粒(LKB1-shRNA)及阴性对照质粒(NC-shRNA),然后应用不同浓度的小白菊内酯处理Eca109细胞。使用细胞计数试剂(CCK-8)检测试剂盒测量细胞活力。使用Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双重染色分析细胞凋亡。使用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法检测LKB1、cleaved PARP、磷酸化腺苷酸(AMP)激活蛋白激酶-α(p-AMPK-α)和AMPK-α的蛋白表达。使用Screen Quest荧光法葡萄糖摄取检测试剂盒检测葡萄糖摄取。使用三磷酸腺苷(ATP)分析试剂盒测量细胞ATP水平。结果 与未处理的Eca109细胞相比,10μmol/L小白菊内酯孵育24 h后细胞中LKB1的表达水平升高(P<0.05)。小白菊内酯处理抑制了Eca109细胞的增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导了细胞凋亡(P<0.05)。小白菊内酯处理升高了LKB1、p-AMPK-α和cleaved PARP的蛋白相对表达量(P<0.05)。然而,沉默LKB1则逆转了小白菊内酯对细胞增殖、凋亡、葡萄糖摄取和ATP合成的影响(P<0.05)。结论 小白菊内酯通过激活LKB1-AMPK轴来抑制食管癌细胞增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导细胞凋亡。
- 王晓芬陈雪芬戴小燕
- 关键词:小白菊内酯葡萄糖摄取ATP合成