程雪莲
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 不同缺氧条件对小鼠骨髓基质细胞成分组成和细胞分化的影响
- 2015年
- 目的观察不同缺氧条件对小鼠骨髓基质细胞（BMSC）成分组成的影响。方法 Balb/c小鼠15只脱颈处死,取双侧股骨,分离BMSC接种于T25培养瓶中。将细胞随机分为对照组、缺氧1组、缺氧2组、氯化钴组。各组细胞分别以低密度（5×102/cm2）、中密度（1×104/cm2）、高密度（1.5×106/cm2）接种于培养基。对照组置于常氧条件（37℃、5%CO2、21%O2）培养,缺氧1组于2.5%~4%O2、5%CO2、91%~92.8%N2条件下培养,缺氧2组置于7%~8%O2、5%CO2、87%~88%N2条件下培养。氯化钴组在培养基中加入氯化钴100μΜ/L。各组细胞培养7 d后观察结果。光镜及透射电镜下观察BMSC细胞形态和超微结构变化,免疫组化法检测细胞中碱性磷酸酶（ALP）表达,RT-PCR法检测OCT4及内皮细胞相关基因（VEGF、FLT-1、FLK-1）表达。结果对照组以梭形成纤维样细胞为主,少有细胞融合现象;缺氧1、2组出现较多个体较大、扁平而宽阔的骰子样细胞;氯化钴组细胞呈圆形,个体较小。缺氧1组BMSC增殖率高于缺氧2组;中密度接种细胞增殖率最高;氯化钴组细胞增殖受到明显抑制。缺氧1、2组ALP染色阳性细胞多于对照组及氯化钴组,且缺氧1组高于缺氧2组（P均〈0.05）。缺氧1、2组OCT4基因表达受到抑制,仅对照组及氯化钴组OCT4基因表达阳性。VEGF在缺氧1、2组表达均为阴性,而在氯化钴组表达阳性;各组FLK-1基因表达均为阳性;FLT-1基因表达均为阴性。结论在2.5%~4%O2、1×104/cm2接种密度条件下,小鼠BMSC中一种分化程度较高、宽阔、扁平、ALP表达阳性的细胞比例进一步增高。
- 任红英赵钦军王彤程雪莲程涛
- 关键词：缺氧骨髓基质细胞细胞分化
- 干细胞拉曼光谱收集条件选择及间充质干细胞与胚胎干细胞拉曼光谱的比较
- 2017年
- 背景:拉曼光谱在检测细胞状态方面相比于传统技术具有快速、非介入、非标记等特点,因此在生物医学领域中的应用正日益受到关注,但是该技术应用于干细胞检测的条件还有待进一步优化。目的:探索激光波长与光栅刻度密度对于干细胞拉曼光谱分辨率与收集时间等参数的影响,明确可以用于干细胞分析的拉曼光谱收集条件。方法:首先比较532,638,785 nm 3个波长激光及600,1 200,1 800 gr/mm 3种光栅刻度密度条件对人间充质干细胞与人胚胎干细胞拉曼光谱的影响;之后比较这2个条件不同组合得到的拉曼光谱的光谱分辨率与收集时间,选择出最佳的组合条件;最后使用选出的最佳条件结合主成分分析方法比较胚胎干细胞与间充质干细胞拉曼光谱的差异以验证优化条件的适用性。结果与结论:(1)激光波长与光栅刻度密度均会不同程度影响干细胞拉曼光谱的峰强,进而影响特征性拉曼峰之间的比值;(2)785 nm波长激光与1 200 gr/mm光栅刻度密度条件组合是最适合收集条件;(3)对比分析胚胎干细胞与间充质干细胞的拉曼光谱图,提示胚胎干细胞具有更高的核酸含量,而间充质干细胞在一些蛋白和脂类含量上更为丰富。
- 陈明程雪莲段永娟胡晓
- 关键词：干细胞胚胎干细胞拉曼光谱光栅间充质干细胞胚胎干细胞主成分分析
