张乐超
- 作品数：15 被引量：71H指数：6
- 供职机构：河北农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省应用基础研究计划国家肉羊产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 山羊DCT基因启动子活性区及其转录因子调控探究被引量：5
- 2018年
- 旨在探究山羊DCT基因启动子活性区及相关转录因子对该基因的调控作用,为山羊DCT基因的表达调控提供理论依据。通过对山羊DCT基因5′侧翼区序列及第一外显子区序列进行生物信息学分析,并与人和小鼠DCT基因启动子序列进行比对,同时结合在线启动子预测结果,采用快速克隆的方法构建5个5′系列缺失序列的启动子报告基因载体,以此为基础构建3′缺失序列的6个报告基因载体,并构建SOX10、MITF和OTX2转录因子结合位点点突变的6个报告基因载体,以瞬时转染的方法转染A375细胞,双荧光素酶检测试剂盒检测缺失片段和点突变片段的启动子活性。结果表明,成功构建了山羊DCT基因11个不同长度的启动子报告基因载体,-990^+232bp的P3片段荧光素酶活性极显著高于其他片段(P<0.01),基于P3构建的3′系列缺失片段中-881^-154bp的P8片段荧光素酶活性极显著高于其他片段(P<0.01)。转录因子SOX10结合位点突变的载体荧光素酶活性极显著降低(P<0.01),MITF和OTX2结合位点突变的载体荧光素酶活性极显著增强(P<0.01)。山羊DCT基因启动子核心调控区位于-881^-154bp区域,转录因子SOX10对山羊DCT基因发挥正调控作用,而转录因子MITF和OTX2对山羊DCT基因的调控作用尚需深入研究。
- 刘春杨张乐超王麒周荣艳李兰会李祥龙
- 关键词：山羊启动子MITF
- 山羊DCT基因启动子区甲基化水平、SNP与毛色特征关系研究被引量：5
- 2019年
- 旨在探究DCT基因启动子区甲基化水平和SNP突变对山羊毛色的影响,为探索DCT基因调控山羊毛色变化的机理提供理论依据。本研究以山羊为试验动物,对DCT基因启动子区进行CpG岛预测,设计引物对预测的2个CpG岛富集区域进行亚硫酸氢盐甲基化测序,使用甲基化水平分析软件BISMA统计甲基化位点,比较唐山奶山羊(白色)和南江黄羊(黑色品系)两种不同毛色山羊群体DCT基因启动子区甲基化水平差异。克隆DCT基因核心启动子区,筛选不同毛色山羊群体的SNPs,使用JASPAR和Nsite预测SNPs位点突变前后转录因子的改变,并检测比较突变前后DCT基因启动子活性变化。结果,成功克隆了山羊DCT基因启动子区甲基化序列及核心启动子区(g.-1045～-318)。在g.-348～-150区域和g.+222～+502区域分别发现6个和23个甲基化位点,其中g.+312、g.+352和g.+400位点与g.+389和g.+404位点白色山羊甲基化水平分别显著和极显著高于黑色山羊(P<0.05和P<0.01),并且g.+222～+502区域白色山羊甲基化平均水平极显著高于黑色山羊(P<0.01)。在DCT基因核心启动子区的g.-804T> G、g.-705C> T和g.-679G> A,3个SNPs位点的基因型构成在白色山羊和3个有色山羊群体中存在差异,g.-804T> G突变导致该区域的SOX10转录因子结合位点缺失,DCT基因启动子活性显著下降(P<0.05)。结果显示,白色山羊DCT基因g.+222～+502区域的高甲基化水平,g.-804、g.-714和g.-679 3个位点的突变,尤其是g.-804T> G造成SOX10转录因子结合位点的缺失,突变的G型DCT基因启动子活性显著降低。因此,DCT基因启动子区SNP突变和高甲基化水平可能抑制了基因的表达从而形成山羊白色被毛。
- 杜小龙王麒张乐超葛琳涵刘小辉王涵李兰会李祥龙
- 关键词：甲基化SNP
- 河北地方品种和五种商品蛋鸡蛋品质分析被引量：7
- 2017年
- 为了分析研究河北地方品种和五种商品蛋鸡蛋品质,试验测定了300日龄坝上长尾鸡、伊莎蛋鸡、海兰褐蛋鸡、海赛克斯鸡、京红蛋鸡、罗曼蛋鸡、慢羽和快羽太行鸡蛋各27枚,及400日龄坝上长尾鸡、快羽和慢羽太行鸡蛋各20枚的蛋品质。结果表明:在蛋形和蛋壳品质方面太行鸡好于其他商品蛋鸡,并且快羽太行鸡要优于慢羽太行鸡;在鸡蛋构成及品质方面,快慢羽太行鸡蛋的蛋重较小,但其他指标好于其他商品蛋鸡;快羽太行鸡的蛋黄重比慢羽太行鸡蛋大,但蛋重小。300~400日龄期间,太行鸡的蛋重、蛋黄重、蛋白重、蛋黄颜色均显著增加(P<0.05),蛋壳颜色a值降低;坝上长尾鸡的蛋黄重和蛋黄率相应增加,而蛋白重、蛋白率和蛋黄颜色降低,蛋壳颜色a值增加。
- 张乐超刘春杨张秀玲刘小辉李丽莎魏颜辉李兰会李祥龙
- 关键词：蛋品质商品蛋鸡快慢羽
- 快慢羽鸡的翼羽长度与相关基因表达分析
- 2022年
- PRLR和SPEF2基因重复是鸡快慢羽表型的分子基础,为探究羽型的分子调控机制,本试验量测了19和21胚龄(E)的快慢羽坝上长尾鸡和太行鸡主翼羽和覆主翼羽长度,采用RT-qPCR检测鸡胚翅羽PRLR、SPEF2、BMP2和FST的表达变化。结果显示19E时坝上长尾慢羽鸡主翼羽比覆主翼羽长1.35 mm(P<0.05),慢羽表型不明显;而此时太行慢羽鸡主翼羽长于覆主翼羽0.42 mm(P>0.05),慢羽表型明显。PRLR和SPEF2在2个品种慢羽鸡的表达均显著高于快羽鸡(P<0.05),分别在1.4和2.0倍以上;SPEF2在21E坝上长尾快慢羽鸡表达均显著高于19E(P<0.05)。BMP2表达在坝上长尾慢羽鸡中显著高于快羽鸡(P<0.05),而在不同胚龄太行快慢羽鸡中则无显著差异(P>0.05);FST在19E坝上长尾慢羽鸡中表达量最低(P<0.05),而太行鸡19E的慢羽鸡表达量最高(P<0.05)。综上,太行鸡在19E已表现慢羽表型,而坝上长尾鸡的慢羽表型在21E才呈现;推测PRLR和SPEF2在慢羽翅羽毛囊中的高表达,以及BMP2和FST在太行鸡和坝上长尾鸡翅羽毛囊中的差异表达,参与慢羽表型的形成。本试验的研究发现为阐明鸡羽型形成的分子调控提供理论依据。
- 白少川张乐超杜小龙郭艳丽王涛高启萌王德贺李兰会
- 关键词：羽型基因表达
- 鸡ev21占位区和未占位区重复序列结构与羽速表型关系研究被引量：6
- 2017年
- 本试验旨在探讨鸡羽速基因型Hae Ⅲ酶切鉴定方法的分子基础。以羽型明确的6个品系(太行鸡、坝上长尾鸡、大午粉鸡、海兰灰鸡、海兰褐鸡、海兰灰祖代四系鸡)313份鸡基因组为模板,利用Hae Ⅲ酶切的RFLP试验进行羽速验证,并对ev21占位区(OS)和非占位区(US)共有序列以及OS区特有序列进行酶切试验。结果表明:1)Blast分析发现1 450bp为鸡ev21的US区域片段。海兰灰及其祖代四系和大午粉祖代的羽速基因型与HaeⅢ酶切结果完全一致,但太行慢羽公鸡、慢羽母鸡、坝上长尾慢羽公鸡和海兰褐慢羽鸡的一致率分别为40.0%、27.6%、28.6%和0.0%;2)太行鸡和坝上长尾鸡ev21的OS和US区共有序列538bp酶切鉴定结果与表型一致率达到92%以上,其他品系(除海兰褐快羽公鸡为0.0%)均为100.0%;3)鸡ev21的OS区特异序列1 440bp的扩增阳性率在太行慢羽公鸡、慢羽母鸡和快羽公鸡中的阳性率分别为94.1%、65.5%和0.0%,在海兰灰祖代鸡中分别为100.0%和0.0%,并且1 440片段不能被Hae Ⅲ切开。综合分析6个品系ev21的OS和US区结构特征,认为US区Hae Ⅲ酶切位点变异不能作为慢羽和内源病毒ev21的鉴定依据,而OS区的ev21插入与1 440bp序列Hae Ⅲ酶切位点的A→G突变和八碱基重复是紧密连锁的。
- 张乐超王晗张秀玲刘春杨王麒周荣艳李祥龙李兰会
- 关键词：羽速HAE
- 羊用11种植物性非常规饲料营养价值评定被引量：10
- 2019年
- 试验旨在对植物性非常规饲料的营养价值进行评定,为非常规饲料在羊上的应用及开发提供参考。选择3只12月龄、平均体重(35±1.0)kg的小尾寒羊母羊,采用单因素试验设计,用11种非常规饲料:桑树叶、杨树叶、桃树叶、白酒糟、稻壳粉、玉米芯粉、豆腐渣、菊花粕、玉米胚芽粕、玉米皮粉和小麦糠各替代30%基础日粮进行消化代谢试验和气体代谢试验,检测每种饲料原料的常规营养成分以及实测甲烷能,并通过套算法计算其表观消化能、代谢能和可消化粗蛋白值。结果表明:11种非常规饲料代谢能值为2.21~11.83 MJ/kg,由高到低分别为玉米胚芽粕、菊花粕、豆腐渣、桃树叶、小麦糠、桑树叶、白酒糟、玉米芯、玉米皮、杨树叶、稻壳粉;可消化粗蛋白为19.86~170.45 g/kg,由高到低分别为豆腐渣、白酒糟、桑树叶、桃树叶、菊花粕、玉米胚芽粕、小麦糠、玉米皮、杨树叶、稻壳粉、玉米芯。综上,本试验测定的11种植物性非常规粗饲料均可作为羊的饲料资源,其中玉米胚芽粕、豆腐渣、菊花粕、桑树叶和桃树叶等营养价值相对较高。
- 王泳宋杰何海迎张乐超张英杰刘月琴段春辉
- 关键词：代谢能套算法
- 不同日龄和羽型太行鸡卵巢繁殖调控基因的表达分析被引量：2
- 2019年
- 旨在mRNA水平上研究催乳素受体(PRLR)、促卵泡激素受体(FSHR)、雌激素受体2 (ESR2)、多巴胺受体2(DRD2)和血管活性肠肽(VIP)5个繁殖调控基因在5个不同日龄的太行鸡卵巢中的表达变化,为太行慢羽鸡的高产蛋性能提供依据。应用RT-qPCR方法检测快慢羽太行鸡卵巢组织中5个基因的mRNA相对表达量,2^(-ΔΔCt)表示的相对表达量进行羽型和日龄的差异分析,2^(-ΔCt)表示的相对表达量进行基因间相关性分析。结果显示,52(育雏末期)～300d(产蛋高峰期)太行鸡PRLR表达持续升高,慢羽鸡表达均高于快羽鸡,且在250d产蛋高峰期慢羽鸡表达显著高于快羽鸡((1.20±0.23)vs(0.58±0.16),P<0.05);但0d表达最高并显著高于其他日龄(P<0.05),且快羽鸡表达显著高于慢羽((2.76±0.00)vs(0.70±0.54),P<0.05);FSHR表达量随日龄逐渐降低,但慢羽鸡表达均高于快羽鸡,且在0,52d显著高于快羽鸡((23.97±1.28)和(12.93±4.37)vs (18.00±0.00)和(6.00±2.15),P<0.05);DRD2表达呈现波动降低,0d慢羽鸡表达显著高于快羽鸡((51.86±9.42)vs(15.88±0.00),P<0.05);5个日龄ESR2表达慢羽鸡均高于快羽鸡,且在250d产蛋高峰期慢羽鸡显著高于快羽鸡((2.71±0.75)vs(1.11±0.40),P<0.05);VIP表达在139(开产期)～300d(产蛋高峰期)逐渐升高,产蛋高峰慢羽鸡表达高于快羽鸡但差异不显著(P>0.05)。PRLR和FSHR对卵巢卵泡发育发挥关键作用,与慢羽太行鸡的高产蛋水平密切相关;DRD2、ESR2和VIP在太行鸡发育和产蛋过程中表达波动变化,对PRLR和FSHR的表达存在调控作用影响太行鸡的产蛋性能。
- 张乐超王晗张秀玲王麒王麒周荣艳李兰会
- 关键词：羽型日龄卵巢RT-QPCR
- 水貂DCT基因5′ UTR克隆分析与启动子活性探究
- 2019年
- 旨在克隆获得水貂DCT基因5′UTR序列并分析其结构特征,预测转录调控元件并检测启动子活性,为探究DCT基因在调控水貂毛皮颜色形成中的作用提供理论依据。本研究利用PCR扩增黑貂、白貂和咖啡貂DCT基因5′UTR,构建咖啡貂DCT基因5′UTR的pGL3-1～pGL3-7和黑貂pGL3-4～pGL3-6缺失片段的荧光素酶报告基因重组质粒,检测各片段的启动子活性;利用亚硫酸氢盐法检测3种毛色水貂DCT基因启动子区CpG岛甲基化水平。结果,克隆获得水貂DCT基因长8 203 bp的5′UTR序列,发现g.7133-7336为长204 bp的转座元件,与其高相似度的100条序列中,一条为蜕皮动物总门线虫纲的索巴利吸虫,其他均来自犬形亚目。P3和P4片段具有显著的启动子活性(P<0.05);咖啡貂的CpG岛甲基化水平显著高于黑貂和白貂(P<0.05);咖啡貂CC单倍型启动子活性显著低于黑貂的TT单倍型片段(P<0.05)。结果表明,水貂DCT基因5′UTR长204 bp的犬形亚目特异短散在元件Can-SINEs由蜕皮动物门的索巴利吸虫侵入动物基因组形成;基因上游32 bp元件和近端域共同作用发挥启动子活性,而GC-box和CpG岛结构沉默水貂DCT基因启动;g.-684和g.-621位点的T> C突变形成的CC单倍型导致咖啡貂DCT基因的高甲基化与低启动子活性,从而抑制真黑素合成,产生咖啡色被毛特征。
- 李兰会杜小龙王麒王麒张乐超张乐超李雪梅
- 关键词：水貂DCT启动子CPG岛
- 鸡内源白血病病毒ev21与慢羽非连锁分析和LTR区启动子活性分析被引量：7
- 2017年
- 旨在分析鸡内源ev21病毒与慢羽的连锁关系及其结构特征和启动子活性,为建立无内源ev21病毒的慢羽种鸡提供检测方法,并对ev21的启动转录活性进行探索。长片段PCR扩增获得鸡内源ev21病毒基因序列,检测太行鸡、坝上长尾鸡、海兰褐、海兰灰及其祖代五个品系259份样本的病毒携带情况。利用NCBI数据库Blast比对分析并PCR获得病毒基因全长。构建ev21基因5′和3′LTR区的pGL3-basic重组质粒转染A375细胞检测其启动子活性。结果显示:获得完整ev21病毒基因组全长7 524bp,发现其反向插入在鸡Z染色体g.10681671-10681672之间,长片段7 590bp PCR检测发现ev21与海兰灰慢羽鸡完全连锁,但与太行鸡、坝上长尾鸡和海兰褐慢羽并不完全连锁,尤其海兰褐快羽公鸡ev21全部阳性。ev21基因5′LTR区具有高强度的启动子活性(P<0.01),3′LTR区活性高于阴性对照,但差异不显著(P>0.05)。综上,内源ev21病毒与鸡慢羽性状并不完全连锁,7 590bp长片段PCR为内源ev21病毒的筛查提供检测方法,ev21基因5′LTR区具有强启动子活性。
- 王麒王晗张秀玲刘春杨张乐超李兰会李祥龙
- 关键词：慢羽LTR启动子活性
- 饲喂PRL抑制剂对燕山绒山羊毛囊发育的影响
- 2021年
- 旨在研究绒山羊毛囊生长期饲喂催乳素(PRL)抑制剂对毛囊发育的影响。本研究选择3月龄体重相近((23.01±4.82)kg)、健康良好的燕山绒山羊公羊20只,随机分为两组,每组10只,分别为对照组和试验组,试验组饲喂PRL抑制剂(0.06 mg·kg^(-1)),试验期90 d。试验结束时采集羊绒纤维、血液和皮肤样品,分析饲喂PRL抑制剂对山羊绒长度、细度、血液指标、毛囊性状及皮肤组织PRL、MTNR 1a和RORαmRNA表达水平的影响。结果表明,饲喂PRL抑制剂显著提高了绒山羊初级毛囊数量、次级毛囊数量和S/P值(P<0.05),并显著提高了活性初级毛囊占比和活性次级毛囊占比(P<0.05),对山羊绒伸直长度和细度无显著影响(P>0.05)。饲喂PRL抑制剂3个月对绒山羊血清中PRL、MT、IGF-1、COR、GH、T 4和T 3均无显著影响(P>0.05),但显著降低了皮肤中PRL和MTNR 1a mRNA表达水平(P<0.05),对RORαmRNA表达量无显著影响(P>0.05)。综上,在绒山羊毛囊生长期抑制PRL分泌可能是通过降低皮肤中PRL和MTNR 1a基因的表达来促进毛囊发育。
- 张乐超段春辉刘月琴张英杰
- 关键词：绒山羊PRL血液指标
