张小龙
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 自噬对锌指转录因子1及高糖诱导的肾小管EMT的影响
- 2024年
- 目的探讨自噬是否可以通过调控锌指转录因子1(Snail1)的降解而影响肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)过程。方法12只清洁级雄性SD大鼠,随机分为正常(NC)组、糖尿病(DM)组,予链脲佐菌素(STZ)53 mg/kg尾静脉注射复制大鼠Ⅰ型糖尿病模型;造模成功后第24周末处死NC和DM组大鼠,检测大鼠血糖、血尿素氮(BUN)和24 h尿白蛋白(24 hUAlb),Western blot检测肾组织自噬相关分子[自噬基因BECN 1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)、自噬降解底物蛋白1(p62)]、Snail1蛋白的表达水平;将大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常糖组(NG组)、高糖组(HG组)及高渗组(HM组),HG组培养的NRK-52E细胞在分为全蛋白组(Input组)和IP组[IP组又为阴性对照(IgG组)和实验组(Snail1/P62)];在高糖培养的NRK-52E细胞中分别使用自噬激动剂[雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂氯喹(CQ)]处理48 h,分为NG组、HG组、HG+RAP组及HG+CQ组,采用双标荧光腺病毒观察各组细胞的自噬流的情况,免疫荧光化学染色和免疫共沉淀观察Snail1与p62的蛋白相互作用,Western blot检测各组NRK-52E细胞中自噬相关分子、EMT、细胞外基质(ECM)指标表达变化;用二甲基亚砜(DMSO)、RAP、CQ处理NRK-52E细胞48 h,再联合放线菌酮(CHX)和蛋白酶抑制剂(MG-132)处理0、6及10 h,分为HG+DMSO/RAP组、HG+DMSO/CQ组,采用Western blot检测自噬对Snail1蛋白衰减的调控作用。结果与NC组相比,DM组大鼠血糖、BUN及24 hUAlb均增高(P<0.05);Western blot结果显示,与NC组比较,DM组大鼠肾组织及高糖培养的NRK-52E细胞中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达下调(P<0.05),p62、Snail1蛋白表达上调(P<0.05);双标腺病毒实验显示,在高糖刺激的NRK-52E中自噬流受阻,与HG组相比,HG+RAP组NRK-52E细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达增多,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)的蛋白表达减少(P<0.05),而HG+CQ组结果相反;免疫共沉淀实验发现Snail1与p62存�
- 安小敏李清璇王彤龙天华杨鹏卢雨微张小龙张小龙石明隽
- 关键词:糖尿病肾脏疾病自噬
- 探索基础医学硕士研究生创新能力的培养模式被引量:1
- 2016年
- 基础医学是医学体系中的重要基石,是医学体系搭建的基础。基础医学研究生是这一体系搭建的承载体,其发展的结果左右着医学体系的未来。但当前对基础医学研究生的培养,无论是在导师团队、平台建设、课程体系、培养方案等中均存在一些不足因素制约其发展。因此,为了提高我校基础医学研究生的创新能力培养,结合我校实际情况,我们从培养方案的修订、团队建设、科研平台的搭建、多学科合作的加强、院内外及国内外交流的加强及二级管理模式的实行等几个方面进行了有益的探索,旨在探寻适合该校的基础医学硕士研究生创新能力培养的培养模式,最终达到提高基础医学硕士研究生综合创新能力的目的 。
- 孟立科单婵张小龙吴家红
- 关键词:硕士研究生