- 携带1型BVDV-E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带1型BVDV‑E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆以及反向遗传方法，将CSFV‑C株基因组的Erns和E2基因的VR1区分别用...
- 方维焕王作欢李肖梁曹统
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- 携带1型BVDV-E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带1型BVDV‑E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆以及反向遗传方法，将CSFV‑C株基因组的Erns和E2基因的VR1区分别用...
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- 猪瘟弱毒标记疫苗候选株RecC-M1对猪的安全性研究
- 2022年
- 为探究猪瘟弱毒标记疫苗候选株RecC-M1(将牛病毒性腹泻病毒1型E^(rns)和猪瘟病毒基因2型流行株E2高变区分别置换弱毒疫苗C株对应区域构建而成)对猪的安全性,本实验以2.0×10^(5)FAID_(50)(50%荧光抗体感染剂量)高剂量的RecC-M1株经颈部肌肉注射接种12头35日龄猪瘟病毒(CSFV)抗体阴性仔猪,另设生理盐水对照组6头。接种后观察各组猪的临床症状,并于接种后不同时间(0、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、28 d和42 d)采血用于细胞计数;接种后7 d和42 d各取6头猪(包括第42 d对照组6头猪),剖杀后观察各组织剖检病变,并取各组织制作切片观察组织病变,采用qPCR检测病毒在各组猪各组织中的分布。根据qPCR结果,选择阳性组织样品(扁桃体、肾脏和淋巴结)的病理切片采用免疫组化法检测RecC-M1株在猪上述各组织中的分布。于接种后0~7 d、14 d、28 d和42 d分别采集各组猪的鼻拭子和肛拭子样品以及不同时间采集的血液,均采用qPCR检测各组猪的病毒血症及排毒;采用间接ELISA分别检测各组猪血清中分别针对BVDV及CSFV相应抗原的抗体水平。结果显示,RecC-M1组猪在42 d的观察期内均未出现临床症状,体温、白细胞数和淋巴细胞数与阴性对照组猪均无明显差异,且均在正常范围内;剖检及组织病变观察结果显示,接种后7 d和42 d猪的各组织均未见淤血或出血;扁桃体、淋巴结、脾、肾、膀胱、回盲瓣等CSFV嗜性组织均未见明显的病理学变化;各组织样品的qPCR结果显示,接种后7 d所有6头猪的肾脏和扁桃体样品和2头猪的淋巴结样品中均检出CSFV核酸,而接种后42 d所有猪的组织样品均为阴性;免疫组化结果显示,接种后7 d猪扁桃体和肾脏样品中CSFV抗原均呈阳性,接种后42 d猪的所有组织样品则均转为阴性;病毒血症和排毒的qPCR结果显示,接种后14 d内部分猪血液、鼻拭子和肛拭子样品中检出CSFV核酸,接种后28 d和42 d所�
- 叶超锋曹统王作欢陈荣王媛徐永昊许翰坤韩笑张鹏超蓝胜芝吴桃芬杨香林李肖梁方维焕
- 关键词：猪瘟
- 携带2型BVDV-E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带2型BVDV‑Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆及反向遗传方法，将BVDV2‑890#毒株的E<Sup>rns</Sup>基因和CSFV流行毒株Q...
- 方维焕曹统李肖梁王作欢
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- 猪瘟病毒基因2型流行毒株和疫苗C株抗血清与相应E2蛋白交叉免疫反应性分析被引量：2
- 2017年
- 为研究猪瘟病毒(CSFV)2.1基因亚型病毒株和疫苗C株E2蛋白与相应抗血清的免疫反应性差异,本研究在分析4株CSFV浙江流行株(QZ-14、JH-14、QZ-07和HZ-08)与疫苗C株E2变异程度的基础上,制备了流行病毒株和疫苗C株全病毒猪抗血清以及针对流行株E2的单克隆抗体(MAb)4F4,比较了它们与同源株和异源株重组杆状病毒表达的E2蛋白的亲和性。结果显示,4株浙江分离株中2株(QZ-14和JH-14)属于亚型2.1d,另2株(QZ-07和HZ-08)为亚型2.1b,它们与C株E2的核苷酸同源性在82%~84%;间接免疫荧光鉴定显示MAb 4F4能够识别4株流行株,但不与C株反应;接种流行株的动物均出现不同程度临床症状;ELISA分析显示疫苗C株血清与流行株E2蛋白的反应性约为C株E2蛋白的27%~49%,2株流行株感染血清与C株E2蛋白反应性约为流行株E2蛋白的34%~50%,免疫印迹分析显示类似结果。以上结果表明CSFV基因2型流行株与疫苗C株E2蛋白的差异显著影响其与相应抗血清的交叉免疫反应性,这一现象是否与C株猪瘟疫苗免疫保护效果下降有关还有待于进一步研究。
- 廖迅王作欢曹统谷元兴李肖梁方维焕
- 关键词：囊膜糖蛋白E2抗原性变异
- 携带2型BVDV-E<Sup>rns</Sup>基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种携带2型BVDV‑Erns基因的高繁殖力猪瘟弱毒标记疫苗的构建方法。本发明利用分子克隆及反向遗传方法，将BVDV2‑890#毒株的E<Sup>rns</Sup>基因和CSFV流行毒株Q...
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