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李军

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：南方医科大学更多>>
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相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇原核表达
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇胞外区
  • 1篇N端

机构

  • 1篇南方医科大学

作者

  • 1篇富宁
  • 1篇赵文忠
  • 1篇江海燕
  • 1篇朱平
  • 1篇李军

传媒

  • 1篇细胞与分子免...

年份

  • 1篇2005
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人Toll样受体-9胞外区N端蛋白的表达及其抗体的制备
2005年
目的: 构建人Toll 样受体-9(hTLR-9)基因5′端序列的表达质粒,在大肠杆菌中表达,并以表达的hTLR-9-N免疫小鼠制备抗体.方法: 构建 hTLR-9 基因5′端(707～1 167 bp)的硫氧还蛋白(thioredoxin)融合表达质粒pET32a-hTLR-9-N.将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,在0.5 mmol/L IPTG诱导下表达.表达产物用SDS-PAGE 进行鉴定.以8 mol/L 尿素溶解的包涵体作为免疫原,免疫昆明种小鼠制备抗hTLR-9-N的抗体.结果:融合表达质粒pET32a-hTLR-9-N在E.coli BL21 (DE3)中以相对分子质量(Mr)为31 000的包涵体形式表达;Western blot分析证明hTLR-9-N在大肠杆菌中得到正确表达.表达的目的蛋白初步纯化后的纯度达90%以上;以hTLR-9-N为抗原制备的抗血清效价为1∶25 600; 该抗血清可以与转染后稳定表达全长hTLR-9的HEK293细胞产生结合反应.结论:成功地在大肠杆菌中表达hTLR-9 N末端蛋白,制备的抗hTLR-9-N抗体可特异性结合表达全长hTLR-9的真核细胞.
李军赵文忠江海燕朱平富宁
关键词：原核表达多克隆抗体
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