目的探讨氧化石墨烯(oxidation of graphene,GO)对大鼠角膜上皮细胞的毒性作用。方法体外培养Wistar雌鼠角膜上皮细胞分为正常对照组、GO干预组,正常对照组不做任何处理,GO干预组在培养时加入不同浓度(0.005μg·L^(-1)、0.010μg·L^(-1)、0.020μg·L^(-1)、0.050μg·L^(-1)、0.100μg·L^(-1))的GO。MTT法绘制角膜上皮细胞的生长曲线、检测细胞活性;流式细胞术检测细胞的状态分布;HE染色后显微镜下观察亚细胞结构;用DAPI/PI双染以及台盼兰染色的方法进一步验证经GO干预后的细胞状态。结果经GO干预后的角膜上皮细胞通过HE染色发现细胞内有GO的进入与残留,且细胞形态发生不规则改变,伪足部分出现纤维状结构;MTT结果显示随着GO浓度的增加,细胞活性由(81.55±1.31)%降低至(64.08±0.27)%,随着最低有效浓度的GO(0.005μg·L^(-1))干预时间的增加,细胞活性由(82.61±1.36)%降低至(47.92±1.06)%;流式细胞术显示细胞破碎、死亡的比例随着GO浓度的升高,由52.9%上升至92.8%,而凋亡细胞的比例未发生明显变化;DAPI/PI双染及台盼兰染色结果均显示经GO干预后细胞死亡数目的比例急剧升高(均为P<0.01)。结论 GO对大鼠角膜上皮细胞具有毒性作用,提示GO的生物安全性存在隐患。
