焦雪
- 作品数：16 被引量：21H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 传染性造血器官坏死病病毒G基因全长cDNA克隆及重组表达研究
- 2017年
- 本研究旨在克隆G基因全长并与其他传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)株进行分析,为IHNV的预防检测提供依据。通过提取IHNV-G蛋白RNA并进行扩增,将其克隆到p MD-18T并与p Chlamy-4载体相连,重组到莱茵衣藻中并提取总蛋白,结果可得:扩增片段长度为1 500 bp,经SDS-PAGE电泳得到一条大约为58 k Da的蛋白条带,Westen Blot分析结果显示,重组莱茵衣藻所表达的蛋白可以与6×HIS标签抗体特异性结合;并且以重组表达的G蛋白为抗原,鼠抗IHNV血清为一抗,辣根过氧化物酶标记的驴抗鼠IgG为二抗,再次进行Westen Blot检验,其结果显示,经诱导后的G蛋白能与鼠抗IHNV血清反应,并在58 k Da处出现了一条明显的特异性条带,具有良好的反应原性。表明重组莱茵衣藻表达系统构建成功。
- 焦雪卢玉婷安俊花张翔宇张培军李月红
- 关键词：糖蛋白WESTERNBLOT
- 犬细小病毒VP2蛋白特点及病毒样颗粒疫苗制备研究进展被引量：1
- 2023年
- 犬细小病毒病危害犬的健康,传统疫苗不能有效保护犬免受病毒的侵扰,寻求新的疫苗是当前研究和关注的热点。VP2蛋白是犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的主要保护性抗原蛋白,在决定宿主范围和入侵过程中起重要作用。此外,VP2蛋白在N-端结构域和环结构域中含有几个重要的B细胞表位,可在CPV感染过程中诱导产生有效的中和抗体。因此,在开发CPV基因组亚单位疫苗中,VP2蛋白可作为候选抗原的首选。病毒样颗粒(VLPs)与天然病毒相似,但不具备天然病毒的复制功能引起机体发生感染,故近几年来利用不同的表达系统组装VP2蛋白一直是研究者们研究的重点。笔者着重对CPV VP2蛋白的特点及构象进行分析,通过特点分析得知CPV衣壳的主要成分中含有VP2,不但具有血凝活性,还与CPV的宿主范围和抗原性密切相关,因此,有活性的VP2蛋白在CPV基因工程亚单位疫苗的开发中极其重要。通过构象分析得知CPV VP2蛋白环状结构(Flexible loop)具有更大的灵活性,这可能是CPV感染宿主范围不断扩大的分子基础。同时笔者对VLPs疫苗的制备方法及优缺点进行讨论,以期为CPV疫苗的研究制备提供有利的参考和科学依据。
- 杨媛茹焦雪宋维林刘许峰汪惠庆李月红
- 关键词：VP2蛋白
- CODEHOP设计简并引物克隆花羔红点鲑肌钙蛋白及其生物信息分析
- 2017年
- 本实验通过无性生殖的方法得到了花羔红点鲑肌钙蛋白(Tnc)基因,并在使用生物信息学资源和生物软件的条件下,通过CODEHOP的方法对特定的氨基酸序列设计简并引物,并对得出的结果进行同源性分析同时构建其相对系统进化树。结果表明:通过CODEHOP的方法所设计出的引物简并度较其他方法得到的引物简并度低,DNA熔解温度(Tm值)修改较方便,产物具有较强的特异性;肌钙蛋白具有高度的保守性,将肌钙蛋白基因片断做结果比对,其编码的氨基酸序列与斑马鱼同源性可达96%,与大西洋鲑Salmo salar同源性为92%,白斑狗鱼Esoxlucius同源性为92%,虹鳟Oncorhynchus mykiss同源性为91%,斜带石斑鱼Epinepheluscoioides同源性为91%,斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus同源性为85%。
- 茆安婷焦雪巴翠玉李月红
- 关键词：花羔红点鲑CODEHOP
- 温和气单胞菌强弱毒株全基因测序及SNP、InDel、SV比较分析
- 本实验从患病鱼体中分离得到温和气单胞菌强毒A1株、弱毒A2株,鉴定后进行动物回归实验,分离提纯A1、A2株.并对A1、A2株进行全基因组测序,其碱基测序质量值基本为30以上,说明质量良好,并且检测AT、CG碱基比例分布平...
- 茆安婷李东焦雪李月红
- 关键词：温和气单胞菌强弱毒株SNPINDELSV
- 1株感染洛氏鱥呼肠孤病毒的分离与培养被引量：1
- 2018年
- 利用细胞培养技术从养殖发病洛氏鲅中分离出1株病毒，经人工感染试验、电镜观察、核酸基因组SDS-PAGE电泳、RT—PCR检测确认为呼肠孤病毒。人工感染发病的症状与自然发病症状相同；病毒感染可使鲤鱼上皮瘤细胞（EPC）产生典型细胞病变效应，收集细胞上清，负染后电镜下可观察到大小均一，直径约70nm，近球形，无囊膜结构的病毒粒子，初步判断为呼肠孤病毒；病毒基因组SDS-PAGE结果表明，病毒基因组由11个分段的RNA核酸片段组成，为典型的水生呼肠孤病毒核酸带型。病毒基因纽$10节段RT-PCR结果表明，有特异性条带，其与GenBank中登录的呼肠孤病毒S10节段（JN206665．1）序列同源性为91％，该分离株应为呼肠孤病毒，本研究首次在洛氏缄鱼内分离到呼肠孤病毒。
- 巴翠玉张培军赵福广张林波焦雪李月红
- 关键词：呼肠孤病毒
- 异育银鲫呼肠孤病毒的分离与鉴定被引量：1
- 2017年
- 【目的】发现异育银鲫Carassius auratus gibelio新病原,为其病害防控提供理论基础。【方法】从吉林省某养殖场采集异育银鲫出血病疑似病样,对其进行细菌分离及寄生虫观察、鲤疱疹病毒Ⅱ型的PCR检测和人工感染试验,然后用感染滤液接种鲤上皮瘤细胞(EPC),并对其进行电镜观察。对病毒基因组进行SDS-PAGE电泳分析、RT-PCR鉴定及序列测定。【结果】发病异育银鲫无细菌及寄生虫感染,鲤疱疹病毒Ⅱ型的PCR检测无特异性条带,将过滤后的患病鱼组织滤液感染健康异育银鲫,7 d内死亡率高达86.7%。盲传4代后出现明显的细胞病变。负染后电镜下可观察到病毒粒子,直径约70 nm,病毒颗粒近球形,无囊膜结构,初步判断为呼肠孤病毒(暂命名JL-4)。SDS-PAGE结果揭示,JL-4基因组由11条dsRNA组成,呈现水生呼肠孤病毒基因组典型特征。将RT-PCR扩增产物的序列进行聚类分析,结果显示,JL-4与呼肠孤病毒HZ08株S6序列相似性高达99%,证明该分离株为呼肠孤病毒。【结论】从患病异育银鲫中分离到1株呼肠孤病毒。
- 巴翠玉张培军赵福广杜晓燕焦雪李月红
- 关键词：异育银鲫呼肠孤病毒SDS-PAGE
- 2株温和气单胞菌SNP位点比较分析被引量：1
- 2017年
- 通过Illumina HiSeq 2500测序仪对2株温和气单胞菌A1、B2进行全基因组重测序,并与参考基因组(Aeromonas veronii B565,complete genome)序列进行比较,A1、B2与参考基因组之间共获得约100 018个SNP位点,与参考基因组平均比对率为74.46%。根据编码区SNPs分布与参考基因组间进行检测;通过COG和GO的功能注释,寻找A1、B2Diff基因的SNPs位点对2株温和气单胞菌进行注释分析,了解温和气单胞菌致病机制与基因组成,为今后温和气单胞菌的研究提供科学数据。
- 焦雪张培军冷东泽王建超巴翠玉李月红
- 关键词：温和气单胞菌SNPS
- 七彩鲑雌核发育及其倍性研究
- 2017年
- 利用紫外线照射对七彩鲑(Salvelinus fontinalis)精子进行灭活处理,使其遗传物质失活,作为同源精子诱导源,与七彩鲑卵子进行受精,采用冷休克方法诱导雌核发育。结果表明:同源精子可以诱导七彩鲑的雌核发育,紫外照射强度为72 m J/cm2;距离为8 cm;冷休克温度为20℃。七彩鲑减数分裂雌核发育倍性测定以鸡(Gallus sp.)红细胞DNA含量(2.5 pg/N)为标准、七彩鲑普通育苗子一代为参照,采用流式细胞术和微卫星标记技术对30尾七彩鲑减数分裂雌核发育鱼苗进行分析,证明了雌核发育鱼苗为雌核发育二倍体。
- 代静焦雪张培军冷东泽巴翠玉茆安婷李月红
- 关键词：雌核发育流式细胞术DNA含量微卫星标记
- 温和气单胞菌强弱毒株全基因组重测序及体外抑菌效应研究
- 温和气单胞菌在自然界中分布广泛,是人兽共患的机会性致病菌。当机体免疫力低下时,温和气单胞菌易从潜伏菌变为致病菌,并且使用大量的抗菌素易使菌株变为耐药菌。本研究从病死鱼中分离出2株温和气单胞菌,通过动物回归试验检测其毒株强...
- 焦雪
- 关键词：温和气单胞菌强弱毒株CRISPR
- 文献传递
- 3种气单胞菌耐药性及致病性的研究进展被引量：9
- 2016年
- 气单胞菌广泛分布于水生生态系统中,不仅存在淡水流域的河流、沿海等地,还存在于自来水中,隶属革兰阴性菌,既可以感染鱼类,也可以感染人畜,是一种人-鱼-兽共患的条件性致病菌。本文着重以鱼类感染嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、维氏气单胞菌所表现的临床症状为例,重点对这3种气单胞菌的形态特征及抗生素的耐药性、致病性进行讨论,以期为气单胞菌属的预防、治疗提供有利的参考和科学依据。
- 焦雪安俊花张翔宇张培军冷东泽王建超巴翠玉李月红
- 关键词：耐药性水生生态系统温和气单胞菌革兰阴性菌气单胞菌属
