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嵌合型TCR分子的表达与组装效率分析: 2016年; 目的通过对外源TCR分子结构域的定向改造,对嵌合型TCR双链分子的表达与组装情况进行研究,探讨其对TCR基因修饰T细胞(TCR-T)内外源TCR分子与内源TCR分子错配减少的贡献,为改善TCR基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定基础。方法将结构域未改造的野生型TCR分子、恒定区结构域经过改造的嵌合TCR(chim-TCR)分子及杂合TCR分子转染7402细胞,通过报告基因的表达分析TCR分子的表达情况,利用荧光共振能量转移(FRET)技术计算不同的TCR分子组合在细胞中的组装效率。结果 TCR分子经过结构域定向改造后,能够在细胞内有效地表达和组装。荧光共振能量转移(FRET)分析表明嵌合型TCR与野生型TCR分子之间形成的杂合分子FRET值明显小于嵌合型或野生型自身配对的FRET值。结论结构域定向改造的嵌合型TCRα、β链与野生型α、β双链能有效得到表达及组装,并且嵌合型TCRα、β链与野生型α、β链组装配对的效率显著降低,这为改善基因修饰的T细胞过继性免疫治疗奠定了基础。; 苏畅刘婷黄帼蓉陈楚如向静徐畅张文峰沈晗邵红伟

HRM法检测肿瘤细胞PTEN基因突变实验研究被引量：1: 2016年; 目的:探索高分辨率熔解曲线(HRM)法检测肿瘤细胞系PTEN基因突变中的应用。方法:采用HRM法初筛肿瘤细胞系PTEN的突变,测序验证HRM筛选结果,TA克隆测序进一步明确突变情况。结果:HRM初筛出Jurkat细胞PTEN基因存在突变,测序结果与HRM结果一致,TA克隆测序确定Jurkat细胞系PTEN基因为缺失突变。结论:HRM法可准确筛选肿瘤细胞系中PTEN基因突变,适于肿瘤细胞PTEN基因突变筛选。; 贺华王腾彭鑫苏畅邵红伟黄树林; 关键词：HRM 突变 PTEN TA克隆

恒定区结构域替换对TCR分子功能的影响: 目的：通过探讨T细胞抗原受体（T cell receptor。TCR）分子的β、α双链恒定区结构域分别被免疫球蛋白IgG的重链C1区和轻链恒定区结构域替换后，其激活下游信号分子、活化T细胞能力的变化情况来确定改造后的TC...; 苏畅; 关键词：免疫治疗生物学功能

葛根芩连汤含药血清及其主要代谢物对人肝癌Huh7细胞株P38MAPK信号通路的影响被引量：4: 2015年; 目的研究葛根芩连汤含药血清及其主要代谢物对Huh7肝癌细胞株P38MAPK信号通路的影响和相互关系。方法 MTT法确定含药血清组及各代谢物组给药浓度;荧光定量PCR法检测Huh7细胞P38MAPK信号通路中各基因mRNA转录水平;Western blot法检测Huh7细胞P38MAPK信号通路中各蛋白的表达情况。结果葛根芩连汤含药血清组对P38、JNK的表达有上调作用,对ERK的表达有下调作用;葛根素组对P38、JNK的表达有上调作用,对ERK的表达无影响;大豆苷组对P38的表达有上调作用,对JNK、ERK的表达无影响;大豆苷苷元组对P38的表达无影响,对JNK的表达有上调作用,对ERK的表达有下调作用(P<0.05)。结论葛根芩连汤与葛根素、大豆苷、大豆苷苷元对Huh7P38MAPK信号通路的影响不同,选取葛根芩连汤及其主要代谢物平行研究,更有利于对葛根芩连汤进行深入开发。; 陈骁贺华苏畅薄华本王辉黄树林; 关键词：葛根芩连汤 P38MAPK信号通路葛根素大豆苷

PBMC与HepG2细胞体外共培养时的相互作用研究被引量：2: 2015年; 淋巴细胞与肿瘤细胞之间存在着复杂的相互调控和抑制作用,作为细胞分泌的一种囊泡,外泌体(Exosome)能够发挥调控细胞生长和活性的作用。该研究将分离自健康人的外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)与肿瘤细胞Hep G2共培养,以检测两者的相互作用以及细胞因子和外泌体的分泌情况。结果表明在一定的范围内肿瘤细胞越多,刺激淋巴细胞分泌IFN-γ的水平越高;流式和激光共聚焦检测显示两者可直接吸附或者通过产生外泌体附着在对方表面;利用两者含有外泌体的培养上清进行交互处理,流式检测表明超过30%的PBMC被肿瘤细胞外泌体所吸附,活化的PBMC更易被肿瘤细胞外泌体吸附,而肿瘤细胞则较少被PBMC外泌体吸附;并且活化的淋巴细胞经肿瘤细胞外泌体处理后,活化程度显著降低,而肿瘤细胞受到淋巴细胞外泌体的影响则较小。这些结果表明淋巴细胞主要通过直接接触发挥作用,而肿瘤细胞则更多地通过外泌体发挥作用,这为更进一步的了解淋巴细胞和肿瘤细胞之间的相互作用机制,制定新的抗肿瘤策略奠定了基础。; 邵红伟苏畅李侃毅沈晗张文峰吴凤麟王辉薄华本黄树林; 关键词：外周血单核细胞肿瘤细胞外泌体

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苏畅