于明明
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
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- 生理性孕酮撤退过程中小鼠子宫角组织蛋白激酶B、糖原合成激酶3β的表达观察被引量：1
- 2017年
- 目的观察生理性孕酮撤退小鼠子宫角组织中蛋白激酶B(Akt)及糖原合成激酶3β(GSK3β)的表达变化。方法 90只未交配健康成年雌性C57BL/6J小鼠,制作生理性孕酮撤退模型,分别在孕酮撤退0、8、12、16、20、24、32、40、48 h(48 h为小鼠生理性孕酮撤退周期)时处死10只小鼠,收集子宫角组织。采用real-time PCR法检测孕酮撤退各时点小鼠子宫角组织Akt、GSK3β mRNA,采用Western blotting法检测孕酮撤退各时点小鼠子宫角组织总蛋白激酶B(t-Akt)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)及3βp-Akt及磷酸化糖原合成激酶(p-GSK3β)。结果随孕酮撤退时间延长,Akt mRNA及蛋白相对表达量逐渐降低,孕酮撤退20 h时达到最低值,后随孕酮撤退时间逐渐延长,Akt mRNA及蛋白相对表达量逐渐升高。孕酮撤退8 h时GSK mRNA及蛋白相对表达量高于孕酮撤退0 h时(P<0.05);随孕酮撤退时间延长,GSK mRNA及蛋白相对表达量逐渐降低,孕酮撤退24 h时达到最低值,后随孕酮撤退时间逐渐延长,GSK mRNA及蛋白相对表达量逐渐增加。孕酮撤退20 h小鼠子宫角组织Akt、GSK3β mRNA表达量低于孕酮撤退后0、48 h(P均<0.05)。与孕酮撤退0 h比较,孕酮撤退20 h时小鼠子宫角组织p-Akt、p-GSK3β的相对表达量均降低(P均<0.05)。与孕酮撤退8 h比较,孕酮撤退20 h时小鼠子宫角组织p-GSK3β的相对表达量降低(P<0.05)。与孕酮撤退20 h比较,孕酮撤退48 h时小鼠子宫角组织p-Akt、p-GSK3β的相对表达量均升高(P均<0.05)。结论生理性孕酮撤退小鼠子宫角组织中存在Akt表达随时间下降后上调,GSK3β表达随时间上调后下降后再次上调。Akt/GSK-3β信号通路可能在鼠孕酮撤退过程中起重要作用。
- 时灿灿于明明张先平陈丽刚王乾兴
- 关键词：月经蛋白激酶B动物实验
- 孕酮回植激活Akt/GSK3β信号通路逆转月经发生
- 2017年
- 目的探讨在孕酮撤退月经模型小鼠月经发生的关键时期前,回植孕酮对蛋白激酶B/糖原合成激酶3β(Akt/GSK3β)信号通路的影响。方法 30只成熟去势雌性C57BL/6J小鼠在建成小鼠孕酮撤退月经模型的基础上,随机分为3组:孕酮撤退后12h组(12h组)、孕酮撤退后16h组(16h组),以及在孕酮撤退后12h回植孕酮皮埋管4h组(回植孕酮组),每组10只。通过qRT-PCR法检测子宫内膜组织中Akt、GSK3βmRNA表达,Western blotting和免疫组织化学检测总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)(Ser473)和p-GSK3β(Ser9)蛋白的表达。结果与12h组相比,回植孕酮组和16h组中Akt mRNA表达显著下降(P均<0.05),而回植孕酮组和16h组无显著性差异(P>0.05);12h组的GSK3βmRNA表达量显著高于回植孕酮组和16h组(P均<0.05)。与12h组相比,p-Akt、p-GSK3β蛋白在回植孕酮组表达量显著增高(P均<0.05);而16h组子宫内膜组织中p-Akt、p-GSK3β蛋白表达量亦显著低于12h组和回植孕酮组(P均<0.05)。免疫组化结果显示,p-Akt和p-GSK3β蛋白在小鼠子宫组织中表达分布呈现相似的模式,主要广泛散在表达于蜕膜化区域的基质细胞及腺上皮和腔上皮细胞中,在蜕膜化区域周边稍有集中分布呈带的趋势。结论在月经发生关键时期之前回植孕酮可能通过非转录机制快速激活Akt/GSK3β信号通路及其下游级联反应,从而逆转月经发生。
- 时灿灿于明明张先平陈丽刚王乾兴
- 关键词：蛋白激酶B
- 长期低剂量锰染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期阻滞和凋亡的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠生精细胞细胞周期及细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组和锰染毒组,每组8只。锰染毒组腹腔注射2、4和8 mg/kgMnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5次/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;Western Blot检测FOXO3A、P16、P21、CDK2、CDK4、CDK6、BIM和Caspase-9的表达;TU-NEL法检测生精细胞凋亡。结果随锰染毒剂量的增加,生精小管呈现生精细胞层数减少、生精细胞排列紊乱、数量减少等变化;随锰染毒剂量的增加,睾丸组织FOXO3A的表达逐渐上升;P16、P21表达量逐渐增加;CDK2、CDK4则逐渐降低,CDK6的表达未见明显改变;BIM、Caspase-9表达及生精细胞凋亡指数均随锰染毒剂量的增加逐渐增加。结论长期低剂量锰染毒可能通过诱导FOXO3A表达,引起子代大鼠生精细胞的细胞周期阻滞和细胞凋亡。
- 王乾兴于明明张先平
- 关键词：细胞周期睾丸
- 母鼠长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠睾丸中氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只随机分为对照组,低、中、高剂量组,每组8只。锰染毒组分别腹腔注射2、4和8 mg/kg MnCl_2·4H_2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,5 d/周,共8周。与正常雄性SD大鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8只12周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE染色观察睾丸生精小管结构;q RT-PCR、免疫组织化学、Western blot分别检测叉头蛋白转录因子O 3a(Fox O3a)、与Bcl-2相互作用的细胞死亡调节子(Bim)、半胱天冬酶9(Caspase-9)m RNA和蛋白的表达;TUNEL技术检测生精细胞凋亡。结果 (1)HE染色可见各锰染毒组睾丸生精小管呈现不同程度的形态学改变。随着锰染毒剂量的增加,生精细胞层数逐渐减少,各级生精细胞排列紊乱、数量减少或缺如,管腔内成熟的精子数目减少;(2)中、高剂量组精子密度、精子活动率降低,而精子畸形率上升(P<0.05);(3)各锰染毒组大鼠睾丸组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性随锰染毒剂量的增加而降低(P<0.05);而睾丸组织内丙二醛(MDA)含量和活性氧(ROS)水平随锰染毒剂量的增加逐渐升高(P<0.05);(4)在m RNA和蛋白水平,Fox O3a的表达随锰染毒剂量的增加逐渐上升(P<0.05);低剂量组Bim m RNA表达量未见变化,但在中、高剂量组则降低,而细胞死亡调节因子表达量则随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(5)Caspase-9 m RNA和蛋白表达量在各锰染毒组均升高,且随锰染毒剂量的增加逐渐增加(P<0.05);(6)各锰染毒组大鼠均可见生精细胞凋亡,其凋亡指数高于对照组,且随锰染毒剂量的增加而上升(P<0.05)。结论长期低剂量锰染毒可抑制子代大鼠睾丸内抗氧化酶活性或(和)增加MDA含量,提高睾丸组织ROS水平,促进Fox O3a和Bim表达,启�
- 王乾兴于明明张先平
- 长期氯化锰腹腔注射母鼠的子代雄鼠生精细胞凋亡变化及其机制探讨被引量：1
- 2018年
- 目的探讨母代大鼠长期氯化锰腹腔注射对子代雄性大鼠睾丸组织生精细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法取健康雌性SD大鼠32只随机分为观察1、2、3组和对照组,各8只,分别腹腔注射2、4、8 mg/kg的MnCl_2·4H_2O和等容生理盐水,1次/d,连续注射5 d后休息2 d,共8周。各组雌鼠与正常雄鼠交配受孕后,雌鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒,剂量不变,共染毒14周。从各组雌鼠的12周龄子代雄性大鼠中随机选取8只断头处死后取睾丸组织HE染色观察睾丸生精小管结构,TUNEL法测算生精细胞凋亡指数(AI),化学荧光法检测睾丸组织活性氧簇(ROS)水平,Western blotting法检测睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12和Caspase3蛋白。结果观察1、2、3组和对照组AI分别为9.05%±1.02%、15.87%±1.31%、19.59%±1.12%、5.72%±0.53%,各组AI相比,P均<0.05。观察1、2、3组和对照组雄性子鼠睾丸组织ROS水平(以荧光强度表示)分别为335.67±41.12、452.75±37.55、547.25±41.11、210.32±37.58,各组睾丸组织ROS水平相比,P均<0.05。观察1、2、3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05),观察2、3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于低剂量组(P均<0.05),观察3组雄性子鼠睾丸组织GRP78、CHOP、Caspase12、Caspase-3蛋白相对表达量均高于观察2组(P均<0.05)。结论长期氯化锰腹腔注射母鼠的子代雄鼠生精细胞凋亡水平较高。其机制可能是母鼠长期氯化锰染毒可以导致子代雄鼠睾丸组织ROS水平升高,激活内质网特异的CHOP/Caspase12信号通路,最终激活Caspase3。
- 王乾兴于明明李姣路健汤贤春张先平
- 关键词：氯化锰生精细胞
- 内质网应激诱导的细胞自噬与凋亡在小鼠月经发生中的意义及孕酮调控
- 目的： 探索内质网应激诱导的自噬相关信号通路PERK/eIF2α/ATF4及凋亡关键信号分子CHOP和Caspase12在小鼠月经模型子宫内膜中的表达及孕酮对其表达的调控作用。 方法： 将80只8~10周龄健康C5...
- 于明明
- 关键词：月经生理细胞自噬
- 文献传递
- 长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体状态和细胞凋亡的影响
- 2018年
- 目的探讨长期低剂量氯化锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体形态和凋亡的影响。方法健康雌性SD大鼠32只分为对照组、低、中、高剂量组。腹腔注射2、4和8mg/kg MnCl2·4H2O或生理盐水,1次/天,5天/周,共8周,并在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组8只12周龄子代大鼠断头处死后,观察睾丸生精小管结构和生精细胞线粒体形态、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、动力相关蛋白1(Drp1)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)表达和细胞凋亡情况。结果随锰染毒剂量增加,生精细胞层数逐渐减少,细胞排列紊乱、数量减少;中、高剂量组可见线粒体分离、肿胀等表现;中、高剂量组Opa1显著降低(P<0.05,P<0.01),Drp1、Caspase9则随锰染毒剂量增加而递增(P<0.05,P<0.01);锰染毒组生精细胞凋亡指数随锰染毒剂量增加而上升(P<0.05)。结论长期低剂量锰染毒可调节Opa1/Drp1基因表达而影响线粒体功能,导致子代大鼠生精细胞凋亡。
- 王乾兴褚慧于明明张先平
- 关键词：生精上皮细胞凋亡
