何娜娜
- 作品数:10 被引量:5H指数:2
- 供职机构:扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- CRISPR/Cas9介导CPED1基因敲除载体活性的验证被引量:2
- 2017年
- 试验旨在利用CRISPR/Cas9技术分别在鸡成纤维细胞DF-1和鸡胚胎干细胞(Em-bryomic stem cell,ESCs)上介导CPED1基因敲除,以期为后续研究CPED1基因功能提供技术依据。克隆CPED1基因全长;构建cas9/g RNA载体并转染DF-1和ESCs,经流式分选阳性细胞,采用T7E1酶切法选择活性最佳的敲除载体并分析其敲除效率;同时,对DF-1中的脱靶效率进行检测。结果成功克隆鸡CPED1基因,并构建3个cas9/g RNA载体;T7E1酶切结果表明cas9/g RNA1载体在DF-1阳性细胞中的敲除活性(37%)最佳,该载体也可定点敲除ESCs中的CPED1基因,敲除活性为25%,且在DF-1细胞中未发生脱靶。表明CRISPR/Cas9可有效介导鸡CPED1基因在DF-1和ESCs上敲除。
- 王飞何娜娜王颖洁纪艳芹张亚妮李碧春
- HSD3B2通过甾类激素合成通路调控鸡雄性生殖细胞形成
- 1引言精原干细胞可以替代胚胎干细胞进行基因治疗和遗传操作而不涉及伦理道德,目前被广泛的应用和研究,但是对精原干细胞形成过程中具体的调控方式却少有研究。本研究旨在探索甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用,为构建...
- 张晨王曼何娜娜汪怡临赵瑞丰余昕健金晶左其生张亚妮李碧春
- 关键词:雄性生殖细胞分化
- miRNA-31通过靶向Stra8调控鸡SSC减数分裂
- Stra8是在哺乳动物生殖细胞中有丝分裂转变为减数分裂时表达的特异性基因,在哺乳动物和鸟类的减数分裂发生中起关键作用.因此,cSSCs(鸡精原干细胞)中Stra8通路的研究可以更深入地了解鸟-类精子发生.miRNA也是S...
- 王颖洁左其生张文慧何娜娜孙长花张亚妮李碧春
- 关键词:精原干细胞减数分裂
- 鸡胚胎干细胞向精原干细胞分化过程中关键lncRNA的筛选
- 本文旨在探索鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)向精原干细胞(Spermatogonia stem cell,SSC)分化过程中关键lncRNA 及靶基因,并探究其作用机制,为ESC 体外向SS...
- 李东纪艳芹王颖洁王飞路镇宇何娜娜靳锴汪怡临程少泽王曼张文慧张晨赵瑞丰张亚妮李碧春
- 关键词:胚胎干细胞原始生殖细胞精原干细胞靶基因
- 如皋黄鸡功能未知基因C1EIP表达载体的构建及其抗小鼠血清制备被引量:1
- 2017年
- 为了深入研究鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向雄性生殖细胞分化过程,基于RNA-Seq基础,筛选出功能未知且差异极其显著的关键基因C1EIP,PCR克隆得到其编码区全长序列409bp,构建其真核表达载体pcDNA3.0-C1EIP和pEGFP-C1EIP,实现C1EIP在真核细胞内的定位表达,并以PEI包裹pcDNA3.0-C1EIP后免疫小鼠制备抗血清。间接免疫荧光检测抗血清效价为1∶10,RT-PCR和Western blot证实C1EIP真核表达载体成功表达且抗血清效果良好,为C1EIP基因在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的功能研究奠定了基础。
- 李东王飞纪艳芹汪怡临王曼张晨王颖洁何娜娜靳锴路镇宇程少泽张亚妮李碧春
- 关键词:如皋黄鸡真核表达抗血清
- Nanos2调控鸡ESCs 向雄性生殖细胞分化的研究
- 本研究旨在探究Nanos2对雄性生殖细胞分化生成过程中的生物学功能,为完善鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞诱导分化体系研究提供依据.qRT-PCR检测成体公母鸡不同组织中N...
- 张文慧王颖洁李东何娜娜王曼金晶左其生张亚妮李碧春
- 关键词:鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞细胞分化
- HSD3B2通过甾类激素合成通路调控ESCs向雄性生殖细胞分化
- 本研究旨在探索睾酮所在的甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为构建鸡雄性生殖细胞分化调控网络提供理论依据.本实验利用睾酮对鸡胚胎干细胞(ESCs)进行诱导实验;再通过对睾酮所在甾类激素合成信号通路中关键...
- 张晨王曼何娜娜汪怡临赵瑞丰余昕健金晶左其生张亚妮李碧春
- 关键词:胚胎干细胞雄性生殖细胞细胞分化
- WNT信号通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的调控作用研究
- 本文旨在从基因水平上探究WNT信号通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制,为完善ESCs体外向雄性生殖细胞诱导分化体系提供依据.本研究通过构建靶向WNT信号通路上的关键基因Wnt5a的慢病毒干扰载体和过表达载体用于体内...
- 何娜娜王飞汪怡临张晨王颖洁李东左其生张亚妮李碧春
- 关键词:雄性生殖细胞细胞分化WNT信号通路
- HSD3B2通过甾类激素合成通路调控鸡ESCs 向雄性生殖细胞分化
- 精原干细胞可以替代胚胎干细胞进行基因治疗和遗传操作而不涉及伦理道德,目前被广泛的应用和研究,但是对精原干细胞形成过程中具体的调控方式却少有研究.
目的:本研究旨在探索甾类激素合成通路在鸡雄性生殖细胞分化过程中的...
- 张晨王曼何娜娜汪怡临赵瑞丰余昕健金晶左其生张亚妮李碧春
- 关键词:鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞细胞分化甾类激素