周宁娟
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠胰岛素抵抗哮喘模型的建立与评估
- 2018年
- 目的:探讨小鼠胰岛素抵抗哮喘模型的建立方法,并进行评估。方法:C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常对照组(HC)、哮喘组(NIRA)均给予普通饲料喂养;胰岛素抵抗组IRNA)、胰岛素抵抗+哮喘组(IRA)均给予高脂饲料(D12492)喂养。每周称重,第6-14周,每周检测各组小鼠空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗评价指数(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗程度;小鼠胰岛素抵抗模型建立成功后在其基础上诱导哮喘模型,NIRA组和IRA组小鼠给予卵清蛋白(OVA)致敏、激发;HC组和IRNA组小鼠给予生理盐水作为对照,末次激发24后,制作肺病理切片,计数肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类,检测血清和BALF中相关炎性因子的水平,比较各组小鼠胰岛素抵抗指数与哮喘评价指标,评估模型。结果:(1)第9周末,IRNA组、IRA组小鼠的HOMA-IR值均>2.5,表明胰岛素抵抗小鼠模型建立成功;(2)肺组织病理切片中,HC组、IRNA组小鼠肺组织无炎症改变,NIRA组、IRA组炎细胞浸润明显,尤以IRA组更甚。(3)与HC组比较,NIRA组(P<0.01)、IRA组(P<0.01)BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞比例明显增高;(4)血清中抗OVA特异性Ig E(P<0.01)和Ig G1(P<0.05)水平显著升高;(5)血清和BALF中IL-4(P<0.01)、IL-17(P<0.05)的水平明显升高,且IRA组(P<0.05)明显高于NIRA组;IFN-γ(P<0.05)的水平明显降低,且IRA组(P<0.05)明显低于NIRA组。结论:用高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠9周,可建立稳定的胰岛素抵抗模型,从第10周开始用OVA致敏、激发诱发哮喘,可成功建立稳定的胰岛素抵抗哮喘小鼠模型,为进一步研究胰岛素抵抗与哮喘相关机制奠定基础。
- 周宁娟徐海军金巧艳张娟李秋红吴海霞苏慧孙新
- 关键词：胰岛素抵抗哮喘动物模型
- 脂联素对低氧条件下大鼠肺微动脉内皮细胞NO生成的促进作用及其机制被引量：3
- 2017年
- 目的重组人球状脂联素(APN)促进低氧条件下大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)NO的生成,探讨其潜在的分子机制研究。方法原代培养SD大鼠PMVECs,传至第3代经免疫组化法鉴定细胞传至第3代鉴定细胞;PMVECs分4组,常氧组(210 ml/L O_2,37℃);低氧组(20 ml/L O_2);低氧+APN组(20 ml/L O_2+APN 1μg/ml),低氧+APN+L-NAME组(20 ml/L O_2,+APN 1μg/ml+L-NAME 1μg/ml)处理,各组细胞同时处理(加药)后,培养12 h收集上清,硝酸还原法测NO浓度,RTPCR测定eNOS mRNA的基因表达Western blot检测AMPK/p-AMPK、PI3K/p-PI3K、Akt/p-Akt、eNOS/p-eNOS蛋白表达。结果鉴定细胞为PMVECs。与常氧组比较,低氧组NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著下降(P<0.01);与低氧组比较,低氧+APN组低氧诱导的NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著增加(P<0.01);L-NAME可阻断NO的产生和eNOS mRNA的表达。各组AMPK、PI3K、Akt、eNOS总蛋白表达量无差异;与常氧组比较,低氧组中AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平下降(P<0.05);与低氧组比较,低氧+APN组AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平增加(P<0.05);与低氧+APN组比较,低氧+APN+L-NAME组AMPK、PI3K、Akt磷酸化表达水平没有变化(P>0.05);L-NAME可阻断eNOS磷酸化的表达(P<0.01)。结论低氧条件下APN可促进PMVECs生成NO,其可能机制是AMPK/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路的激活。
- 徐海军张存娟周宁娟苏慧孙新
- 关键词：脂联素信号通路一氧化氮
- 胰岛素抵抗对小鼠哮喘模型气道高反应性及肺部炎症的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨胰岛素抵抗对小鼠哮喘模型气道高反应性(AHR)及肺部炎症的影响。方法 3周龄C57BL/6J雄性小鼠60只随机分为4组:正常对照组(HC)、哮喘组(NIRA)、胰岛素抵抗组(IRNA)、胰岛素抵抗+哮喘组(IRA),每组15只。HC组、NIRA组均给予普通饲料喂养;IRNA组、IRA组均给予高脂饲料喂养,共喂养9周后,计算各组小鼠稳态模型胰岛素抵抗评价指数(HOMA-IR),评估胰岛素抵抗程度;在小鼠胰岛素抵抗模型建立成功后,NIRA组和IRA组小鼠给予卵清蛋白(OVA)致敏、激发,分别建立哮喘模型;HC组和IRNA组小鼠给予生理盐水作为对照。末次激发24 h内,依次雾化吸入浓度为0,3,6,12,25,50,100 mg/ml Mch,测定气道高反应性,制作肺病理切片,计数肺泡灌洗液中白细胞总数及分类,检测血清和肺泡灌洗液(BALF)中相关炎性因子的含量,对各组小鼠气道高反应性及炎性因子水平的变化情况进行统计学分析。结果与NIRA组相比,在吸入乙酰甲胆碱(Mch)浓度为12,25,50,100 mg/ml时,IRA组小鼠气道阻力明显升高(P<0.05);肺组织病理切片中,HC组、IRNA组小鼠肺组织无炎症改变,NIRA组、IRA组炎细胞浸润明显,尤以IRA组更甚。与HC组比较,NIRA组、IRA组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞比例明显增高(均P<0.01);血清中抗OVA特异性Ig E和Ig G1水平显著升高(P<0.01或P<0.05);BALF中IL-4、IL-17的水平明显升高(P<0.01或P<0.05),且IRA组明显高于NIRA组(P<0.05);IFN-γ的水平明显降低(P<0.05),且IRA组明显低于NIRA组(P<0.05)。结论胰岛素抵抗促进哮喘小鼠炎症因子的释放,加重肺部炎症,增加气道高反应性,加重哮喘的发生和发展。
- 周宁娟张娟马婧一郭颖汤丽萍苏慧孙新
- 关键词：胰岛素抵抗哮喘气道高反应性炎性因子
- 布地奈德对呼吸道合胞病毒感染的哮喘小鼠肺损伤保护作用被引量：3
- 2017年
- 目的观察布地奈德对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的哮喘小鼠模型肺部损伤的保护作用。方法 6-8周龄雄性BALB/c小鼠36只,随机分为对照组、模型组、布地奈德组,每组12只。模型组和布地奈德组用卵清蛋白腹腔注射致敏和雾化吸入激发,建立小鼠哮喘模型,对照组用生理盐水替代。于28,30,32 d,用RSV病毒液隔日滴鼻,连续3次,建立急性病毒感染哮喘模型。对照组用生理盐水滴鼻。布地奈德组于27-33 d给予布地奈德雾化吸入,每日1次,每次30 min,第34天给予各组小鼠肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计数BALF中的白细胞数目;制作肺组织的病理切片,HE染色光镜观察肺组织病理变化;免疫组化法观察HMGB1、TLR4在肺组织中的表达;ELISA检测BALF与血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-13及嗜酸性粒细胞趋化因子。结果与对照组相比,模型组与布地奈德组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞及巨噬细胞升高(P<0.01)。与模型组相比,布地奈德组小鼠BALF中白细胞总数明显降低(P<0.01),BALF及血清中细胞因子,嗜酸性粒细胞趋化因子、IL-13水平降低(P<0.01);IFN-γ、IL-2水平明显增高(P<0.01)。肺组织病理结果显示吸入布地奈德可减少小鼠肺组织炎症细胞浸润,抑制HMGB1、TLR4在肺组织中的表达。结论布地奈德可减轻RSV感染的哮喘小鼠气道炎症,吸入布地奈德对于RSV感染的哮喘小鼠具有一定的治疗作用。
- 郭颖张娟蔡玉香周宁娟徐海军孙新
- 关键词：布地奈德卵清蛋白肺损伤小鼠
