方伟 作品数:10 被引量:8 H指数:2 供职机构: 湖北省农业科技创新中心 更多>> 发文基金: 湖北省农业科技创新中心资助项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 化学工程 医药卫生 更多>>
诺沃霉素植生链霉菌发酵培养基的优化 被引量:2 2015年 通过优化发酵培养基中的成分及其含量,提高诺沃霉素有效组分的产量。以高效液相色谱检测目标产物的峰面积作为指标,通过单因素试验获得最佳碳源及氮源。使用正交试验等获得最佳发酵培养基:葡萄糖4.0%,酵母浸粉0.5%,豆粕1.0%,磷酸氢二钾0.035%,碳酸钙0.05%,豆油0.1%。相关发酵条件为p H 7.0,种龄96 h,接种量10%,发酵温度28℃,发酵时间120 h。根据高效液相色谱检测结果,在最佳发酵条件下,目标产物产量比对照培养基提高了657%。 丁璟剑 万中义 方伟 彭冬麟关键词:培养基优化 正交试验 发酵条件 琼脂扩散法用于放线菌源生防菌剂筛选的活性影响因素 2023年 以灰霉病菌(Botrytis cinerea)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeobosporioides)、番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、西瓜猝倒病菌(Pythium aphanidematum)为模式靶标,探讨了放线菌源生防杀菌剂筛选的活性特征、影响活性稳定性和敏感度的因素。采用琼脂扩散法,测试了模式靶标、化合物标准样品和放线菌标准菌株的发酵液样品对杀菌活性测试的影响。结果表明,靶标的处理过程、靶标菌的含量、样品的类型以及样品的加入量与活性反应有直接关联。不同模式靶标菌对破碎处理的耐受程度不同,必须针对不同模式靶标进行个性化处理,以保证模式靶标菌在测试中的稳定生长状态。在琼脂扩散法中,不仅可以检测样品的杀菌活性强度,而且活性成分与靶标菌的不同作用方式也可以呈现。保留活菌的放线菌发酵液样品在加入量较宽的范围内都显示活性,而经过滤除菌处理的放线菌发酵液样品和标准化合物都只在样品加入量比较大时才显示出活性。 张志刚 王开梅 吴兆圆 万中义 方伟关键词:琼脂扩散法 抑菌圈 放线菌 HBERC-39158抗真菌活性产物的分离鉴定 从我国四川乐山地区采集的土样中分离到一株放线菌HBERC-39158,农药活性测定发现其发酵提取物对多种重要农业病原真菌具有很强的活性.通过HPLC半制备组分进行农药活性测定,确定活性成分出峰时间在14~19min.根据... 万中义 方伟 张亚妮 张志刚 吴兆圆 王开梅 杨自文关键词:抗真菌活性 放线菌 微生物源活菌除草剂活性筛选方法研究 2020年 以狗牙根[Cynodon dactylon(L.)Pers.]、反枝苋(Amaranthus retroflexus L.)为材料,比较了3种不同筛选方法用于微生物源活菌除草剂室内活性筛选的不同表现。结果表明,微孔板法适用于化合物或活性成分速效的样品筛选,具有筛选通量大、可操作性强、样品用量少等优点,但可观察培养时间短,抗污染能力差,可用于除草剂先导化合物初筛,但不适合于微生物发酵液或活菌样品的筛选;离体叶片菌饼法筛选敏感度高、用药量少、保湿、抗污染能力强,但离体叶片的代谢较在体叶片慢,而且生长点几乎停止活动,不能完全反映样品对在体叶片的活性;微型盆栽法适用于成分复杂的样品筛选,具有结果接近田间用药方式、抗污染强、可观测时间长等优点,但用药量相对较大,操作复杂、筛选通量受限,适用于复筛和微生物发酵液、活菌样品的筛选。 张志刚 王开梅 吴兆圆 万中义 方伟关键词:除草活性 种子处理 链霉菌HBERC-44441活性成分的分离鉴别及其抗菌活性测定 2023年 在筛选微生物源杀菌剂的过程中,从湖北省通山县九宫山采集的土样中分离到一株链霉菌,编号为HBERC-44441。经扫描电镜观察和16S rRNA基因序列比对,菌株被鉴定为利迪链霉菌Streptomyces lydicus。室内生物活性测定结果表明,该菌株发酵提取物对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌等具有强烈抑制活性。经分离制备,获得了其中几个活性组份,经波谱学分析,解析了其中4个化合物的化学结构,分别是吲哚-3-甲酸、pimprinine、另有两个pimprinine二聚体,鉴定为新的化合物。抗菌活性测试表明,吲哚-3-甲酸具有较好抗真菌活性,pimprinine及其二聚体抗真菌活性较弱,首次检测到pimprinine对植物重要病原细菌青枯劳尔氏菌有一定活性,其MIC值可达25μg/mL。 万中义 方伟 张志刚 吴兆圆 李泰明 王开梅 杨自文关键词:抗菌活性 放线菌HBERC-39158抗真菌活性化合物的分离鉴定 被引量:1 2020年 以从四川省乐山市采集土样中分离的1株放线菌HBERC-39158为研究对象,对该菌株进行了16S分子鉴定、摇瓶发酵及室内生物活性测定,并对发酵提取物进行HPLC制备,获得了不同时间流出的样品36份,经组分活性测定,确定了其活性部位,并制备了活性化合物纯品,对其进行了HPLC-MS及NMR分析。结果表明,该菌株为链霉菌(Streptomyces kronopolitis),提取物对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、小麦颖枯病菌(Septoria nodorum)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)等重要农作物病原真菌具有良好活性,其活性组分出现在14~19 min。根据活性化合物紫外吸收光谱、质谱数据以及核磁共振谱的解析,结合文献比对,确定其活性化合物为factumycin。 万中义 方伟 张亚妮 张志刚 吴兆圆 王开梅 杨自文关键词:抗真菌活性 放线菌 真菌NBERC-170301中农药活性化合物的研究 被引量:1 2018年 筛选到一株具有农药活性的真菌NBERC-170301,通过活性跟踪,确定出其中的活性组分。并经过大量发酵,提取分离得到4个化合物,经超高效液质联用(UPLC-MS)和NMR确定其中3个化合物分别为青霉酸、郝金青霉素和郝青霉素酮,活性测试结果表明,化合物4对小菜蛾具有较好的毒杀活性,但结构暂未确定。 张亚妮 方伟 王开梅 张志刚 王燕 万中义 吴兆圆关键词:农药活性 青霉酸 稗子用于微生物源生物除草剂筛选的研究 2021年 以马唐[Digitaria sanguinalis(L.)Scop.]作为参照靶标,使用水琼脂表面涂布微孔板法及小型盆栽法对稗子[Echinochloa crusgalli(L.)Beauv]的筛选敏感性进行试验。使用微孔板法对化学除草剂标准样品、真菌及放线菌除草剂标准菌株的发酵液进行了除草活性比较;使用小型盆栽法对真菌及放线菌除草剂标准菌株的发酵液进行了除草活性比较。结果表明,微孔板法中稗子的敏感性差,尤其不适用于针对稗子的微生物源生物除草筛选;小型盆栽法中稗子与马唐的敏感度相近,适用于针对稗子的微生物源除草筛选,具有稳定高、抗杂菌污染强、操作简单等突出优点;针对稗子用于除草剂筛选中敏感性低的缺点可以通过选择适当苗龄的方法加以优化。 张志刚 王开梅 吴兆圆 万中义 方伟关键词:单子叶植物 苏云金芽胞杆菌杀线虫活性因子分析及杀虫机制研究进展 被引量:1 2017年 苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt),是一种重要的昆虫病原细菌,对多种农业害虫包括鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目和线虫等具有高特异杀虫活性,是迄今应用最广泛的微生物杀虫剂。本文总结了杀线虫Bt菌株的活性因子种类以及不同类的活性物质杀线虫机制的分析,能够为生物杀线剂的研究与创制提供理论基础。 刘晓艳 闵勇 黄大野 方伟 王开梅 杨自文关键词:苏云金芽胞杆菌 微生物源生防杀菌剂的筛选方法研究 被引量:3 2022年 以胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeobosporioides)、番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、西瓜猝倒病菌(Pythium aphanidematum)作为模式靶标,使用半固体培养基法(PDB培养基加入适量琼脂)及平板对峙法(PDA培养基),对真菌及放线菌杀菌剂标准菌株的发酵液、上清液和菌丝进行了杀菌活性比较。结果表明,样品的活性与筛选方法和培养时间有直接关联。半固体培养基法中发酵液及菌丝的活性分辨度差,而对真菌及放线菌标准菌株的上清液的活性反应清晰;平板对峙法中,随着培养时间的增加,发酵液及菌丝的活性增强,而真菌及放线菌杀菌剂标准菌株的上清液的活性减弱。半固体培养基法适用于针对不含活菌的上清液的筛选,平板对峙法适用于针对含有活菌的发酵液、菌丝和上清液的筛选,根据样品的类型选择适当的筛选方法和培养时间可以减少假阴性结果。 张志刚 王开梅 吴兆圆 万中义 方伟关键词:生物杀菌剂