李灿
- 作品数：9 被引量：25H指数：4
- 供职机构：成都医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅重点项目四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 连翘酯苷A对肝星状细胞增殖及凋亡的影响
- 2023年
- 目的 研究连翘酯苷A(FA)对肝星状细胞增殖活化及凋亡的影响。方法 以人肝星状细胞(LX-2)作为实验对象,采用血小板衍生生长因子(PDGF)-BB模拟肝纤维化微环境,实验分为对照组、PDGF-BB组、FA组、PDGF-BB+FA组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LX-2细胞活力;采用油红O检测细胞内脂滴的情况;采用免疫荧光染色检测细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测纤维化相关标志蛋白[α-SMA、α1-I型胶原蛋白(COL1A1)]和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(BCL-2)、剪切的-腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、剪切的-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-CASPASE-3)]的表达;采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 FA处理后LX-2细胞活力明显下降,且呈剂量依赖性;油红O实验结果显示,与PDGF-BB组比较,FA组细胞内脂滴数量较多;免疫荧光染色结果显示,与PDGF-BB组相比,FA组细胞内α-SMA荧光斑点的数量减少;WesternBlot实验结果显示,FA组α-SMA、COL1A1、BCL-2蛋白表达减少,cleaved-PARP、BAX、cleaved-CASPASE-3蛋白表达增加。结论 FA可抑制肝星状细胞的增殖、活化,促进凋亡,改善PDGF-BB诱导的体外肝纤维化。
- 刘蓉唐斌刘漪沦谭悦浩李灿胡雪沈昊天邓峰美
- 关键词：凋亡肝纤维化肝星状细胞连翘酯苷A
- 锁阳对肝纤维化模型大鼠血细胞分型的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨锁阳对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化血细胞分型影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组(0.2mg/kg)和锁阳组(200mg/kg),每组各15只。前6周,正常对照组大鼠用花生油,其余组大鼠2次/周,以3mL/kg的剂量,用CCl4与花生油(4∶6)混合液,皮下注射复制肝纤维化模型。6周后,秋水仙碱组与锁阳组大鼠分别以相应剂量,1次/d,灌胃,正常对照组和模型组大鼠给予等容生理盐水,持续6周。12周末,大鼠麻醉后处死,取血清,采用血细胞分析仪进行外周血常规分析。结果与模型组相比,锁阳组大鼠白细胞数目(WBC)、中性粒细胞比值(NEUT%)、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)、血小板分布宽度(PDW%)和红细胞分布宽度(RDW%)较模型组明显降低,淋巴细胞百分比(LYM%)、红细胞数目(RBC)、红细胞压积(HCT%)、血红蛋白含量(MCH)和平均红细胞体积(MCV)较模型组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论锁阳对肝纤维化大鼠的血细胞分型产生了影响。
- 李卉园黄小梅郭莉娜李荣华李灿陈建文黄迪林友胜王航宇刘漪沦邓峰美
- 关键词：肝纤维化锁阳
- 重度烧伤患者血糖与炎性因子及免疫功能的相关性研究被引量：5
- 2018年
- 目的研究重度烧伤患者血糖与炎性因子及免疫功能的相关性。方法选取2012年1月至2017年12月在成都医学院第一附属医院烧伤整形外科治疗的重度烧伤患者96例作为试验组,另选取成都医学院第一附属医院经体检证明健康的志愿者60名作为对照组,检测两组空腹血糖(FPG)、炎性因子及T淋巴细胞水平,比较两组间FPG、炎性因子以及T淋巴细胞水平之间的差异;再将试验组患者根据FPG浓度分为血糖正常组(17例,FPG<7.0 mmol/L)和血糖升高组(79例,FPG≥7.0 mmol/L),比较两组炎性因子以及T淋巴细胞水平之间的差异,并对重度烧伤患者的FPG与炎性因子及T淋巴细胞水平进行Pearson相关性分析。指标比较采用t检验。结果试验组患者FPG(11.39±2.28)mmol/L、C反应蛋白(CRP)(39.67±4.15)mg/L、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(108.12±6.49)ng/L、白细胞介素(IL)-6(139.77±7.43)ng/L、IL-8(91.56±4.91)ng/L,均高于对照组[FPG(5.07±1.15)mmol/L、CRP(5.91±0.76)mg/L、TNF-α(12.94±1.69)ng/L、IL-6(14.11±3.93)ng/L、IL-8(17.22±2.89)ng/L],差异均有统计学意义(t=5.365、4.365、11.912、9.834、6.139,P值均小于0.01);试验组患者免疫指标CD4+T淋巴细胞水平为(29.77±4.12)%、CD4+/CD8+为0.91±0.24,分别低于对照组(41.89±5.36)%、1.59±0.37,而试验组的CD8+T淋巴细胞水平为(32.69±4.73)%,高于对照组(25.83±3.52)%,差异均有统计学意义(t=3.931、2.433、2.696,P值均小于0.05)。试验组患者中,血糖升高组的血浆CRP(45.19±5.45)mg/L、TNF-α(121.81±5.43)ng/L、IL-6(153.31±5.57)ng/L、IL-8(106.56±5.65)ng/L、CD8+T淋巴细胞水平(35.46±4.11)%,均高于血糖正常组[CPR(36.67±3.45)mg/L、TNF-α(91.58±4.93)ng/L、IL-6(114.65±6.33)ng/L、IL-8(79.62±3.74)ng/L、CD8+T淋巴细胞水平(28.62±4.03)%],差异均有统计学意义(t=2.341、2.894、4.167、3.018、2.763,P值均小于0.05);CD4+T淋巴细胞水平(28.89±3.79)%、CD4+/CD8+(0.82±0.37)均低于血糖正常组[(33.47±4.98)%、(1.17±0.52)],差�
- 马燕郭莉娜李灿严伟恒刘月明邓峰美刘卫华刘漪沦
- 关键词：烧伤血糖肿瘤坏死因子Α白细胞介素6白细胞介素8T淋巴细胞亚群
- 配对盒基因6抑制肝星状细胞活化的作用机制
- 2022年
- 目的探究配对盒基因6(Pax6)对血小板衍生因子(PDGF-BB)诱导下人肝星状细胞迁移能力的影响。方法体外培养人肝星状细胞系(LX-2),慢病毒感染LX-2敲减Pax6,使用PDGF-BB诱导其活化,实验分为4组:空白组(shNC+PBS)、实验组(shPax6+PBS)、PDGF-BB处理的空白组(shNC+PDGF-BB)、PDGF-BB处理的实验组(shPax6+PDGF-BB);采用划痕实验、Transwell小室细胞迁移实验,分析细胞迁移能力;细胞免疫荧光及蛋白质印迹技术检测细胞迁移相关蛋白的表达水平。结果PDGF-BB诱导下的LX-2活化,可促进其迁移能力增强;敲降Pax6后,能够抑制活化后细胞增强的迁移能力;蛋白质印迹技术实验结果表明,PDGF-BB刺激下能明显上调LX-2中N-cad表达、抑制E-cad表达;敲降Pax6后能抑制PDGF-BB诱导的N-cad表达、增加E-cad表达;细胞免疫荧光实验结果显示,PDGF-BB诱导下能明显上调Vimentin表达,敲降Pax6后,PDGF-BB对Vimentin的上调作用被抑制,E-cad与N-cad趋势同上述蛋白质印迹技术检测结果一致。结论敲降Pax6能抑制PDGF-BB诱导下LX-2增强的迁移能力,为临床抗肝纤维化药物开发提供了可能靶点,为治疗肝纤维化提供了新的策略。
- 张迪谭悦浩刘漪沦李灿李灿胡雪唐斌邓峰美
- 关键词：人肝星状细胞迁移肝纤维化
- 二甲双胍对小鼠肝纤维化保护作用的研究被引量：2
- 2019年
- 目的初步探索二甲双胍对小鼠肝纤维化的保护作用及相关机制的研究。方法将45只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和二甲双胍治疗组,每组各15只。正常组给予橄榄油,经腹腔注射,2 次/周,剂量为0.4 mL/kg;其余2组给予橄榄油、CCL 4混合物处理,按1 ∶3比例,经腹腔注射,2次/周,剂量为0.4 mL/kg,建立肝纤维化模型。造模3周后,给予各组小鼠相对应药物,二甲双胍治疗组给予二甲双胍200 mg/次,1 次/d,灌胃;正常组、造模组给予生理盐水,200 mg/次,1 次/d,灌胃。造模6周后处死小鼠,收集标本。分别检测血清中肝功能相关ALT、AST指标含量,进行HE、天狼星红染色,观察小鼠肝脏病理学变化,评估肝纤维化程度;免疫组化检测α-SMA 变化。将LX-2细胞分为4组,即空白对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Met低剂量组和PDGF-BB+Met高剂量组。空白对照组不做处理;PDGF-BB组给予10 ng/mL的细胞因子PDGF-BB诱导细胞活化;PDGF-BB+Met低剂量组给予10 ng/mL的细胞因子PDGF-BB和5 mmol/L的二甲双胍;PDGF-BB+Met高剂量组给予 10 ng/mL 的细胞因子PDGF-BB和10 mmol/L的二甲双胍。通过细胞克隆形成实验观察细胞增殖变化,Western blot检测各组细胞α-SMA变化。结果经二甲双胍治疗后,肝功能相关指标ALT、AST含量较模型组明显降低( P <0.01);肝脏HE、天狼星红染色显示,与模型组比较,二甲双胍治疗组假小叶形成减少,炎性细胞浸润减少,胶原沉积减少,即肝纤维化减轻。细胞克隆形成实验、Western blot实验显示,二甲双胍降低肝星状细胞增殖能力,抑制肝星状细胞活化。结论二甲双胍可缓解肝纤维化发展,且机制可能与通过抑制肝星状细胞活化和增殖有关。
- 郭莉娜李灿谭悦浩孔德华胡康安邓峰美王航宇马燕刘漪沦
- 关键词：二甲双胍肝纤维化肝星状细胞
- 阿奇霉素诱导衰老细胞凋亡研究
- 2021年
- 目的探究阿奇霉素(AZM)对H_(2)O_(2)诱导的小鼠胚胎成纤维细胞系(NIH/3T3)衰老模型的效果及相关机制。方法采用H_(2)O_(2)处理NIH/3T3细胞,构建细胞衰老模型,利用ELISA检测相关标志物水平,分析衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-GAL)活性以检测模型的相关表型;运用Western blot检测其衰老相关分泌表型(SASP)的蛋白标志物表达水平,qPCR分析其相关mRNA水平;使用AZM处理正常细胞及衰老细胞,并运用流式细胞术、TUNEL、Western blot等检测AZM作用下相关表型并验证相关表型的标志物。结果H_(2)O_(2)处理后的NIH/3T3细胞核体积变大;β-半乳糖苷酶染色蓝染比率升高(P<0.05);衰老相关细胞炎性因子IL-6、IL-8/CXCL8分泌量显著上升(P<0.05);衰老标志性蛋白P53、P21、P16水平均显著升高(P<0.05),同时mRNA呈相同趋势(P<0.05)。衰老细胞在使用不同浓度AZM处理后,发生凋亡,并具有浓度依赖性。使用AZM处理不同实验组细胞24h后,Western blot结果显示衰老细胞cleaved PARP/PARP、Bax上调、Bcl-2下调(P<0.05);经Annexin V-PE/7-AAD双染,Annexin V阳性比率上升(P<0.05);正常细胞在AZM的处理下凋亡比例未见明显差异(P>0.05);TUNEL实验结果与上述一致。结论AZM可能特异性诱导衰老细胞凋亡,为临床上抗衰老药物的选择与应用提供了新的策略。
- 谭悦浩李灿刘漪沦孔德华胡康安张迪孙静王航宇邓峰美
- 关键词：阿奇霉素NIH/3T3细胞衰老细胞凋亡
- 锁阳通过抑制炎症因子的表达对抗CCL_4导致的小鼠肝纤维化被引量：5
- 2018年
- 目的初步探索中药锁阳的粗提取物对抗CCL4诱导的小鼠肝纤维化的效果和可能机制。方法将C57BL/6J小鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组、锁阳低剂量组和锁阳高剂量组,正常组给予生理盐水,其余4个组给予橄榄油和CCL4混合物,按1∶3比例,4mL/kg剂量腹腔注射,2次/周,直到第4周,复制肝纤维化模型,从第5周开始每组给予相应的药物至第6周,分别检测小鼠肝脏指数,血清中ALT、AST指标以及炎症因子TGF-β1、TNF-α、IL-1的表达,Masson染色观察小鼠肝脏病理学变化,最后用Image J软件,分析各组中肝纤维化程度。结果相比正常组,模型组小鼠的肝脏指数增加,说明小鼠肝脏受到严重损伤;相比模型组,用药组小鼠的肝脏指数明显减轻,肝脏血清中AST、ALT的水平以及TGF-β1、TNF-α、IL-1的浓度均比模型组降低(P<0.05);同时,相比锁阳低剂量组,锁阳高剂量组纤维化降低更明显。结论中药锁阳粗提取物通过抑制炎症因子TGF-β1、TNF-α、IL-1的表达减弱了CCL4诱导的小鼠肝纤维化。
- 黄小梅郭莉娜李灿李荣华李卉园孔德华胡康安林友胜邓峰美王航宇刘漪沦
- 关键词：肝纤维化炎症因子
- 不同能量CO_2点阵激光对博来霉素诱导的小鼠增生性瘢痕的作用及Hedgehog信号通路的影响被引量：6
- 2019年
- 目的:探讨不同能量CO_2点阵激光对博莱霉素诱导的小鼠增生性瘢痕模型的作用及其对瘢痕组织中Hedgehog信号通路的影响。方法:于雄性C57BL/6J小鼠背部皮肤注射博来霉素(1 mg/d,4周)制作增生性瘢痕模型,另取4只小鼠背部注射PBS缓冲液作为对照。造模成功之后,随机将小鼠分为瘢痕对照组(模型组),10 mj激光治疗组(10 mj组)和20 mj激光治疗组(20 mj组),每组6只小鼠。10 mj组小鼠给予10 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周);20 mj组小鼠给予20 mj激光治疗(共3次,每次间隔2周)。治疗结束后,处死小鼠,取瘢痕全层标本进行病理组织学染色观察(HE、Masson染色)以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、GLi1免疫荧光观察。结果:①我们成功复制出小鼠增生性瘢痕模型;②20 mj CO_2点阵激光治疗可有效修复瘢痕组织,经治疗后皮肤瘢痕程度显著减轻,同时可降低真皮层厚度和减轻瘢痕组织的纤维化程度;③免疫荧光染色结果提示,CO_2点阵激光可显著减少小鼠皮肤增生性瘢痕中α-SMA、GLi1表达。结论:于小鼠的背部皮肤注射博莱霉素可建立增生性瘢痕模型。CO_2点阵激光为治疗增生性瘢一种有效的治疗方式,其作用可能与其对Hedgehog信号通路的抑制有关。
- 肖明明张瑞芳李灿刘漪沦刘卫华
- 关键词：增生性瘢痕组织病理GLI1蛋白
- 缺氧微环境调控Twist促进人肝癌细胞株SMMC-7721的上皮间质转化被引量：5
- 2018年
- 目的探讨缺氧条件下,Twist基因的表达及其在人肝癌SMMC-7721细胞株上皮间质转化中的作用机制。方法模拟缺氧微环境,分别在常氧(21%O_2)和缺氧(1%O_2)条件下培养SMMC-7721细胞24 h。在倒置光学显微镜下检测SMMC-7721细胞形态学的改变;RT-PCR和Western blot法检测细胞中HIF-1α、Twist、上皮表型标记蛋白E-cadherin及间质表型标记蛋白Vimentin的表达;Transwell小室侵袭实验检测缺氧条件和常氧条件下细胞侵袭能力的变化。使用Twist1靶向siRNA抑制其表达后,进一步采用RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力变化。结果在缺氧模拟条件下,人肝癌SMMC-7721细胞中Twist基因表达水平显著升高,同时细胞发生上皮-间质转化和侵袭能力增强。靶向沉默Twist基因后,低氧诱导的上皮间质转化过程被逆转,同时细胞侵袭能力显著减弱。结论低氧条件下Twist基因异常激活,进而促进SMMC-7721细胞上皮-间质转化的发生和侵袭能力的增强。
- 郭莉娜黄小梅马燕李灿严伟恒刘漪沦邓峰美
- 关键词：肝癌低氧上皮间质转化
