李琦
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
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- 活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶通过脱甲基修饰调控膀胱尿路上皮细胞癌致癌网络
- 目的探讨AID(活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶)在人体膀胱尿路上皮细胞癌、癌旁组织中的表达情况以及与疾病的相关性;明确AID对膀胱尿路上皮细胞癌细胞株T24和5637增殖、侵袭、迁移以及凋亡的影响及机制;AID对膀胱尿路上皮...
- 李琦
- 关键词：膀胱尿路上皮细胞癌脱甲基
- 文献传递
- IGHG1基因对膀胱癌细胞增殖凋亡及迁移的影响被引量：5
- 2018年
- 目的探讨沉默IGHG1基因对膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法将靶向沉默IGHG1基因的慢病毒载体(LV-IGHG1-RNAi)感染EJ细胞,构建稳定沉默IGHG1基因的EJ细胞(sh IGHG1-EJ细胞)作为实验组;将阴性对照序列(NC)慢病毒载体感染EJ细胞,构建稳定转染NC序列的NC-EJ细胞作为阴性对照组;未转染膀胱癌EJ细胞作为空白对照组。用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测细胞IGHG1 m RNA的相对表达量,Western blot检测细胞Ig G、Caspase-3和Caspase-3剪切片段蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡,细胞划痕实验检测细胞的迁移。结果 sh IGHG1-EJ细胞转染率为(76.667±0.042)%,NC-EJ细胞转染率为(75.333±0.055)%。q RT-PCR、Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞IGHG1 m RNA和Ig Gγ蛋白表达量降低(P<0.05),sh IGHG1-EJ细胞IGHG1基因被沉默。CCK-8法结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞增殖降低(P<0.05);FCM和Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞凋亡率增加(P<0.05),且在17 k D处出现Caspase-3剪切片段;细胞划痕实验结果显示,sh IGHG1-EJ细胞迁移能力仅为EJ细胞的36%(P<0.05);同时NC-EJ细胞在增殖、凋亡及迁移方面与EJ细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EJ细胞经慢病毒载体沉默IGHG1基因后,细胞增殖和迁移水平降低,细胞凋亡率增加。
- 吴遥西李浩勇周治彦陈金火李琦马哲金应霞梁培育
- 关键词：膀胱肿瘤基因沉默增殖
- shRNA抑制活化诱导的胞苷脱氨酶(AID)对前列腺癌细胞C4-2表型的影响
- 2019年
- 目的:探讨AID在前列腺癌中的表达情况,AID对前列腺癌细胞C4-2的侵袭、迁移、增殖以及凋亡方面的影响。方法:应用靶向敲减AID的慢病毒对前列腺癌细胞C4-2进行干扰,运用Western-blot、免疫组化、平板克隆形成、流式、Transwell实验对前列腺癌组织和前列腺癌细胞C4-2表型的变化情况进行研究。结果:临床前列腺癌样本中AID高表达,良性前列腺增生组织中AID低表达,正常前列腺组织不表达(*P<0.05);shRNA干扰以后的shAICDA-C4-2单克隆细胞株中AID的表达量显著降低,其增殖、迁移和侵袭能力阳性对照组(Monoclonal6)与阴性对照组(NC)相比分别降低49%、80%、63%,凋亡率阳性对照组(Monoclonal6)为阴性对照组(NC)的3.2倍。结论:前列腺癌组织中AID高表达,AID在促进前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,抑制前列腺自细胞的凋亡中具有极其重要的作用。AID表达极可能与前列腺癌的进展、预后明显相关。
- 范进锋陈松强马哲李琦周治彦金应霞梁培育梁培育
- 关键词：前列腺癌
- 诱导多能干细胞的安全性及应用研究进展被引量：12
- 2017年
- 背景:诱导多能干细胞技术解决了伦理学和免疫排斥等矛盾,高效安全定向诱导多能干细胞技术成了当今研究的主流。目的:综述诱导多能干细胞的诱导安全性和应用进展。方法:应用计算机检索Pub Med及中国期刊全文数据库2006年1月至2016年3月有关诱导多能干细胞的文章,英文检索词为"induced pluripotent stem cell,reprogramming,clinical application,safety,transcription factor,disease model",中文检索词为"诱导多能干细胞,重编程,临床应用,遗传安全性,转录因子,疾病模型"。结果与结论:近年来诱导多能干细胞的研究备受科研界和医学界的关注,并努力克服了免疫和伦理问题,成功获得了诱导多能干细胞。但由于无法解决诱导多能干细胞技术中的安全性、效率和诱导多能干细胞细胞再分化机制等方面的问题,而局限于理论和实验室研究,迟迟无法应用于临床。如何安全高效的将诱导多能干细胞诱导为患者需要的类型并进行移植,如何建立良好的疾病模型与高通量药物筛选平台,涉及各方面的基础研究,面临着巨大的困难和挑战。
- 田胜男王博李琦黄元华马燕琳
- 关键词：干细胞多能干细胞诱导多能干细胞重编程转录因子疾病模型国家自然科学基金
- 活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶对膀胱癌T24细胞表型的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨AID(活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶)在人体膀胱癌、癌旁组织中的表达情况以及AID对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭、迁移以及凋亡的影响。方法运用Western bolt以及免疫组织化学染色法检测16例临床膀胱癌组织以及癌旁组织中AID的相对表达量;将携带有抑制AID表达的shRNA序列(shAICDA-T24组)或空载序列(NC-T24组)以慢病毒为载体对T24细胞进行感染,利用Western bolt对T24、NC-T24以及shAICDA-T24组进行AID表达量的检测;因为转染后的多克隆细胞株AID的表达抑制效果有限,随后我们对转染的T24细胞进行单克隆细胞筛选,通过Western bolt结果选取抑制效果最明显的组别用于后续试验;然后运用细胞增值试验(CCK8)、流式细胞术(凋亡)、细胞划痕实验以及细胞小室实验(Transwell)检测抑制AID的表达对T24细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移的影响。结果人体膀胱癌组织中存在AID的表达,并且膀胱癌组织中AID的表达显著高于癌旁组织(P<0.05);通过RNA干扰技术(RNAi)抑制AID的表达可显著降低膀胱癌细胞株T24的增殖、侵袭和迁移能力,并且增加了T24细胞的凋亡率(P<0.05)。结论抑制AID的表达可显著降低T24细胞增殖、侵袭以及迁移能力,并且增加T24细胞的凋亡,其表达可能与膀胱癌的进展具有相关性。
- 李琦马哲周治彦吴遥西陈金火金应霞宋鹏程帆程帆梁培育
- 关键词：RNA干扰技术膀胱癌
- RNAi抑制PSA表达对前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭力的影响被引量：1
- 2017年
- 目的研究PSA表达对去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭的影响。方法构建含有针对PSA基因特异性短发夹RNA(shRNA,分别为shPSA1、shPSA2、shPSA3、shPSA4)和阴性对照序列(NC)的慢病毒载体并由慢病毒颗粒包装后,分别感染去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞并筛选稳定表达PSA特异性shRNA的shPSA1-、shPSA2-、shPSA3-、shPSA4-和表达NC序列的NC-22RV1细胞。分别应用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测shRNA对22RV1细胞中PSA mRNA及蛋白表达的影响;采用CCK-8法、Transwell侵袭试验和流式细胞术检测PSA基因沉默后的22RV1细胞增殖、侵袭和凋亡情况。结果与NC-22RV1细胞相比,shPSA3-22RV1细胞的基因和蛋白表达水平的沉默效果最好;shPSA2组在24、48、72h的吸光度值分别为(0.156 4±0.022 5)、(0.243 8±0.035 8)、(0.364 1±0.020 5),shPSA3组分别为(0.106 9±0.012 0)、(0.158 8±0.019 2)、(0.253 4±0.028 9),与NC组比较差异均有统计学意义(P<0.01);shPSA1、shPSA2、shPSA3组侵袭力分别为NC组的77.35%(P=0.002)、54.35%(P<0.001)、42.21%(P<0.001);shPSA2、shPSA3组凋亡率分别为(27.97±4.28)%(P=0.001)、(43.03±3.19)%(P<0.001),高于NC组[(16.77±0.59)%]。结论 PSA具有促进去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞的增殖和侵袭效应,抑制PSA表达后前列腺癌22RV1细胞凋亡增加。
- 马哲李琦周治彦吴遥西陈金火金应霞宋鹏李浩勇梁培育
- 关键词：前列腺特异性抗原前列腺癌
